顾军 作品数:39 被引量:108 H指数:5 供职机构: 北京大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家攀登计划 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
人UREB1基因克隆及其在肿瘤组织中的分布 被引量:5 2001年 目的:大鼠 UREB1基因编码的蛋白质能特异性地结合位于强吗啡基因启动子上游的一段 DNA序列(upstream regulatory element,URE)。早期研究证实 UREB1对强吗啡基因启动子的转录具有促进作用,而对p53的转录激活作用具有抑制效应。本实验目的就是克隆人UREB1基因,探索其与肿瘤发生发展的关系。方法:利用人工合成寡核苷酸探针从人脑cDNA文库中筛选人UREB1基因,应用大肠杆菌表达的重组蛋白质制备的抗体检测肿瘤组织中UREB1的表达分布。结果:获得了人UREB1基因,核苷酸序列在对应区域及氨基酸序列与大鼠UREB1基因cDNA序列和氨基酸序列皆有91%的同源性。在各种肿瘤组织中都有UREB1的表达,但是表达水平及定位不一样。初步发现有这样一个规律,随着肿瘤的恶性程度增加 UREB在1核内的聚集程度增加。 UREB1的酪氨酸磷酸化分析结果显示,肿瘤恶性程度高,UREB1的酪氨酸磷酸化程度高。结论:UREB1可能参与肿瘤的发生发展,其酪氨酸磷酸化水平可以影响肿瘤的恶性程度。 明文玉 银巍 刘子川 林学颜 顾军关键词:基因克隆 肿瘤 蛋白质磷酸化 胚胎干细胞体外分化为心肌细胞诱导因素的探讨 被引量:28 2000年 目的:用胚胎干细胞(ESC)体外诱导分化为心肌细胞,从分子水平上研究早期心脏发育相关基 因及其功能。方法:(1)胚胎干细胞的培养。(2)胚胎于细胞的分化培养。(3)被分化的心肌细胞鉴定:RNA的 提取;心脏特异性引物的合成和RT-PCR反应;探针标记、纯化和比放射活性测定;RNA斑点杂交。结果:用最 适条件培养液对FSC定向诱导分化,可使80%以上的ESC分化为心肌细胞。心肌细胞以同步的方式进行收缩。 反转录PCR和斑点杂交的结果显示:心肌在早期发育就开始表达其特异性基因。结论:胚胎干细胞体外能诱导 分化为心肌细胞。胎牛血清、二甲基亚砜和维甲酸的浓度及它们之间的组成不同,对ES细胞定向诱导为心肌 细胞均有影响。最佳诱导条件是用2nmol/L维甲酸、0.6%二甲基亚砜和20%胎牛血清组成的条件培养液。 刘兰英 杨琨 朱振宇 刘玉川 余细勇 银巍 汤建 马涧泉 顾军关键词:胚胎 干细胞 心肌细胞 ESC 一种抑制p38激酶活性的多肽及其应用 本发明公开了一种抑制p38激酶活性的多肽及其应用。该多肽,是具有下述氨基酸残基序列之一的多肽:1)序列表中的SEQ ID №:1;2)序列表中的SEQ ID№:2;3)将序列表中SEQ ID №:1或序列表中的SEQ I... 顾军 傅璟文献传递 双靶点抗肿瘤基因工程重组蛋白 顾军 邹宇飞 高锦 肿瘤严重危害人类的健康,而且肿瘤的发病呈持续增长的趋势。研制和开发安全有效的肿瘤治疗药物已经成为越来越紧迫的医学领域的头等大事,各国都纷纷投入巨大的人力物力和财力,希望在更短的时间内找寻治疗肿瘤的有效药物。由于肿瘤是多阶...关键词:关键词:双靶点 抗肿瘤 重组蛋白 人ureb1在大肠杆菌中高效表达及其抗体的制备 被引量:5 2001年 目的 :构建人的ureb1(hureb1)原核高效表达重组质粒 ,以此表达的外源蛋白为抗原制备抗ureb1的抗体。方法 :用XhoI/NotI从pGU 2质粒酶切得到hureb1的ORF与pGEX 4T 2的XhoI/NotI大片段连接 ,构建表达GST hureb1融合蛋白的重组载体。转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,IPTG诱导表达。以粗制的GST hureb1融合蛋白分别免疫大白兔和小鼠 ,制备抗hureb1的多克隆抗体和单克隆抗体 ,采用WesternBlot进行特异性鉴定。结果 :构建了高效表达GST hureb1融合蛋白的原核表达载体 ,融合蛋白的表达量占菌体蛋白质总量的 33 45 %。以大肠杆菌表达的GST hureb1融合蛋白免疫动物制备了高滴度、高特异性的抗hureb1的抗体。结论 :利用重组GST hureb1融合蛋白免疫动物可获得高滴度的抗hureb1抗体。重组GST 明文玉 林学颜 银巍 顾军关键词:DNA 原核表达载体 抗体 大肠杆菌 重组融合蛋白 质粒 gC1qR细胞抗病毒机制研究 顾军 该成果属于生物医药领域。gC1qR是补体蛋白C1q的受体,是一个多配体、多功能蛋白。该成果的主要研究内容是在RNA病毒的感染下,gC1qR是如何参与细胞的抗病毒反应,在这一反应中起什么样的作用,这种作用的机制是什么。该成...关键词: pBR322质粒天然重组的研究 顾军一种用于治疗类风湿关节炎注射用多肽制剂 本发明公开了一种用于治疗类风湿关节炎注射用多肽制剂。本发明提供了一种用于治疗类风湿关节炎注射用多肽制剂,为针剂,其活性成分为SEQ ID No.1所示多肽。利用本发明所提供的注射用多肽制剂能够改善类风湿性关节炎小鼠模型的... 顾军 孟宪梅 傅璟肌动蛋白在体外与p38激酶结合并抑制其激酶活性 被引量:4 2002年 p38激酶(简称p38)参与炎症、应急、细胞生长与凋亡、细胞周期调控、缺血/再灌损伤及心肌肥厚等生理、病理过程中的信号转导.为了研究该信号通道的分子机理和调节作用,寻找p38的结合蛋白,并检测其相互作用对激酶活性的影响,采用体外蛋白结合试验,在细菌内毒素或紫外辐射处理的鼠源性巨噬细胞系(RAW264.7)中,发现有两种蛋白在体外与p38直接结合,其中一种蛋白经肽质谱图鉴定为β-肌动蛋白(β-actin),激酶活性检测表明,actin在体外抑制p38的自磷酸化活性,并抑制p38对其底物ATF2的磷酸化作用.提示actin与p38的结合在体内可能产生一种负反馈作用,调节p38通路的信号转导,从而调节细胞功能. 杨琨 姜勇 韩家淮 顾军关键词:丝裂原活化蛋白激酶 P38激酶 肌动蛋白 蛋白-蛋白相互作用 信号通道 激酶活性 人重组白蛋白基因在巴斯德毕赤酵母中的高效表达 被引量:29 2001年 The yeast Pichia pastoris was transformed by the multi\|copy Pichia expression vector that can express secreted human albumin.The high level expression of cell line was selected after screening.The expression of human recombinant albumin in Pichia pastoris induced by different methods were compared.The retio of secreted human albumin is 80% in total secreted proteins and the expression level reaches as high as is 10g/L. 崔蕴霞 明文玉 银巍 任哲 汪健 顾军关键词:酵母菌 血液制剂 基因工程