于向华
- 作品数：7 被引量：16H指数：3
- 供职机构：四川大学华西医学中心更多>>
- 发文基金：四川省学术和技术带头人培养资金国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 利用基因芯片技术快速检测结核杆菌耐药性的初步研究被引量：3
- 2003年
- 目的 :探讨利用基因芯片技术检测结核杆菌的耐药性。方法 :结核杆菌耐药性检测基因芯片的制备 ;临床分离株结核杆菌培养和药敏检测 ;结核杆菌基因组DNA的制备和结核杆菌耐药基因的聚和酶链反应 ;基因芯片的杂交、洗涤、检测与分析。结果 :临床分离株结核杆菌培养和药敏检测结果 :1株为药物敏感株结核杆菌 (对异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇 4种药物均敏感 ) ;4株为多耐药株结核杆菌 (对异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇 4种药物均耐药 ) ;药敏检测结果与 5位患者临床的诊断性治疗的结果完全一致 ;进一步利用基因芯片技术进行检测 ,检测结果与上述结果相符合。结论 :利用基因芯片技术检测结核杆菌的耐药性 ,准确、快速、高效。
- 张万江鲍朗王晓樱张会东谢勇恩陈玮于向华
- 关键词：分支杆菌结核药物耐受性
- 结核杆菌检测基因芯片的制备研究
- 2001年
- 张万江鲍朗王晓樱谢勇恩陈玮张会东于向华
- 关键词：结核杆菌基因芯片
- 利用基因芯片技术检测结核分枝杆菌耐药性的研究被引量：7
- 2002年
- 张万江鲍朗王晓樱于向华谢勇恩陈玮张会东
- 关键词：基因芯片技术结核分枝杆菌耐药性
- 结核杆菌Ag85A及ESAT-6双价抗原融合表达载体的构建及其在大肠杆菌中的高效表达被引量：2
- 2002年
- 目的 为结核病新型疫苗研究提供靶基因和靶抗原。方法 采用PCR扩增的方法获得结核杆菌两种免疫保护性抗原Ag85A及ESAT - 6的基因 ,将其定向克隆入真核及原核穿梭表达型载体 pBK -CMV构建含嵌合目的基因的重组质粒 ,转化大肠杆菌后用IPTG进行诱导表达 ,并通过SDS -PAGE和Western -blotting对表达蛋白进行初步分析。结果 1)从结核杆菌H37Rv株基因组DNA中扩增出Ag85A及ESAT - 6基因。 2 )成功构建了结核杆菌Ag85A及ESAT - 6双价抗原融合表达质粒 pBK - 85A -E6。 3)重组质粒 pBK - 85A -E6经IPTG诱导后能在大肠杆菌中稳定表达 38kDa的融合蛋白。 结论 成功构建了结核杆菌Ag85A及ESAT - 6双价抗原融合表达载体 ,并在大肠杆菌中实现了稳定表达 ,为进一步研究其在结核病基因工程疫苗研制中的应用奠定了基础。
- 谢勇恩鲍朗陈炜李学敏于向华
- 关键词：结核杆菌AG85AESAT-6大肠杆菌
- 结核杆菌检测基因芯片的制备研究被引量：4
- 2002年
- 目的 建立结核杆菌检测基因芯片的制备技术。方法 制备和标记靶基因 ,用点样仪将靶基因点于玻片介质上 ,并经点样后处理制成基因芯片 ,用扫描仪测定处理前后芯片上荧光强度的变化 ,计算 DNA固定率 ,同时测定和比较两种不同玻片、不同点样液和三种不同点样后处理方法的 DNA固定率。结果 制备结核杆菌检测基因芯片 ,用醛基修饰玻片作为介质 ,用 DMSO溶液作为点样液 ,点样后芯片处理以水合 1小时再干燥 30分钟为佳。
- 张万江鲍朗王晓樱谢勇恩陈玮张会东于向华
- 关键词：结核杆菌基因芯片
- 赖型钩端螺旋体鞭毛钩相关蛋白K基因的克隆表达与功能初步研究
- 该研究利用SSH筛选得到的致病钩体与非致病钩体的差异片段AF325810,设计引物进行进行巢式PCR扩增,进而进行序列测定和生物信息学分析、克隆表达和相关功能鉴定,对赖型钩体的分子致病机制及疾病的防治具有重要理论意义和应...
- 于向华
- 关键词：钩端螺旋体毒力相关基因巢式PCR
- 文献传递
- 钩端螺旋体赖型017鞭毛钩相关蛋白K基因的克隆及序列分析
- 2002年
- 在以抑制消减杂交比较强毒株赖型钩端螺旋体017株和无毒株双曲钩体Patoc I株 的基因组差异时,获得了一系列仅存在于强毒株而无毒株缺如的差异片段.选取差异片段AF325810设计特异性引物,以赖型钩端螺旋体017株基因组DNA为模板,进行巢式PCR扩增,PCR纯化产物T载体克隆,选取阳性克隆测序,进一步进行生物信息学分析,以获得强毒株赖型钩端螺旋体017株特有的毒力相关基因,DOT BLOT显示其在钩端螺旋体各株间有不同分布PCR扩增得到了产物为2kb大小的DNA片段,序列分析结果显示得到了问号钩端螺旋体赖型017株的鞭毛钩相关蛋白K基因的上游序列,为进一步探索钩端螺旋体的致病机制奠定了基础.
- 于向华鲍朗谢勇恩张会东
- 关键词：钩端螺旋体巢式PCR生物信息学
