侯理理
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 供职机构：上海市计划生育科学研究所更多>>
- 发文基金：上海市科委科技攻关项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重组人卵泡刺激素在昆虫细胞中的表达
- 2004年
- 为了研究在昆虫细胞中表达重组人卵泡刺激素,我们以人胎盘组织提取的染色体DNA为模板,利用重叠PCR方法扩增出hFSHβ亚基的cDNA的编码区。将此cDNA克隆入核型多角体病毒(AcNPV)非融合蛋白基因表达载体pVL1393,我们得到了表达载体pVL1393-hFSHβ,然后与BaculoGold^(TM)线性杆状病毒DNA共转染昆虫细胞SF9,经多次扩增后获得高滴度的重组病毒AcNPV-hFSHβ。将此重组病毒感染昆虫细胞,我们得到了在胞浆中表达的hFSHβ亚基,Western blot显示分子量大约为21kDa。以重组病毒AcNPV-hFSHβ与AcNPV-hCGα一同感染昆虫细胞得到了具有分泌性的重组hFSH异二聚体,在非还原的条件下Western blot显示分子量大约为33kDa。
- 侯理理蒋俶沈卫英黄哲平申庆祥
- 关键词：昆虫细胞重组病毒糖蛋白
- 重组人卵泡刺激素在昆虫细胞和巴斯德毕赤酵母细胞中的表达
- 人卵泡刺激素(human follicle stimulating hormone,hFSH)是糖蛋白家族成员之一,该家族除了FSH外还包括黄体生成素(luteinizing hormone,LH),促甲状腺素(thyr...
- 侯理理
- 关键词：重叠PCRSF9细胞巴斯德毕赤酵母
- 文献传递
- hCGβ-CTP37多聚体在巴斯德毕赤酵母中的表达及其表达产物的结构预测被引量：5
- 2005年
- hCGβ-CTP37(简称CTP)肽段是hCG分子的特有部分,存在hCG的特异表位。为了解CTP利用毕赤酵母进行表达的情况及探索其作为研制调节生育和抗肿瘤疫苗的可行性,本研究中我们将2、3、4个CTP以头尾串联的方式重组成多聚体基因,然后克隆入载体pPIC9K得到表达质粒pPIC9K-Cα-(CTP)_n(n=2,3,4),电转染入酵母细胞进行表达。在培养基上清中我们检测到了目的基因表达产物,Westernblot结果显示它们的分子量分别约为:20KDa、30KDa、40KDa,且能与抗hCG多克隆抗体结合。另外,我们还利用ANTHEPROT4.3蛋白序列分析软件包对表达产物CTP四聚体的结构进行了预测分析,结果表明CTP四聚体的抗原性明显强于hCGβ-CTP37单聚体,CTP四聚体与hCGβ二级结构较为相似,但CTP四聚体的抗原专一性要优于hCGβ。CTP多聚体在毕赤酵母系统中的成功表达及对表达产物抗原性的初步分析为今后利用CTP研制调节生育和抗肿瘤疫苗奠定了基础。
- 喻光荣孙学铮沈卫英侯理理冯文华蒋俶申庆祥
- 关键词：巴斯德毕赤酵母多聚体基因表达产物分析软件包四聚体酵母系统
