凌世淦
- 作品数：163 被引量：433H指数：11
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项“九五”国家科技攻关计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HIV-1整合酶的纯化及活性检测
- 2000年
- 含整合酶基因的重组质粒 pET p31在E coliBL2 1(DE3)中以包含体形式高效表达HIV 1整合酶 (p31蛋白 )。初步纯化的包含体用 8mol/L尿素变性溶解 ,经阳离子交换剂柱层析和分子筛柱层析纯化 ,并通过梯度透析的复性过程去除尿素 ,获得可溶性及高纯度 p31。测定证实 ,复性后的 p31蛋白呈现良好的 3′加工。
- 李南张健慧凌世淦
- 关键词：艾滋病毒整合酶包含体纯化
- 丙型肝炎病毒抗干扰素机制研究进展被引量：2
- 2004年
- 丙型肝炎是人类常见疾病。丙型肝炎病毒 (HepatitisCVirus ,HCV)是丙型肝炎的致病原。全球感染者约有 2亿 ,我国抗HCV阳性检出率达 3 2 % ,预计HCV感染者也在 4千万以上[1 ] 。HCV感染能引起多数受感染个体的持续性感染 ,并进一步发展成慢性肝炎、肝纤维化和肝细胞癌(HCC) [2 ,3 ] ,因此危害极大。依赖于干扰素 (Interferon ,IFN)的HCV治疗是目前能够提供的唯一手段 ,但治疗结果并不能解除大部分病人的病毒感染和愈后复发问题。许多研究证明 ,HCV有拮抗IFN诱导的抗病毒应答能力 ,这涉及到病毒、宿主和IFN诱导三方之间的相互作用。深入理解IFN抗病毒机制和HCV与IFN相互作用的分子机制 ,有助于改进目前的IFN治疗方案和开发针对HCV感染的新型治疗手段。本综述主要讨论了IFN抗病毒应答和HCV拮抗IFN抗病毒作用的分子机制。
- 胡巍凌世淦
- 关键词：丙型肝炎病毒干扰素HCV致病原获得性免疫反应
- 利用6× His/ Ni-NTA 表达纯化系统一步纯化乙型肝炎前S抗原被引量：1
- 1999年
- 目的：利用 ６× Ｈｉｓ／ Ｎｉ Ｎ Ｔ Ａ 表达纯化系统表达并纯化带有 ６ 个 Ｈｉｓ 纯化标签的乙型肝炎前 Ｓ抗原。方法：利用 Ｎｉ Ｎ Ｔ Ａ Ｓｕｐｅｒｆｌｏｗ 亲和层析，比较了 Ｐｒｅ Ｓ１／２ 与 Ｐｒｅ Ｓ２ 蛋白分别在非变性和变性条件下的各种纯化条件和产率，并用三种方式对 Ｐｒｅ Ｓ２ 蛋白进行了复性。结果： Ｐｒｅ Ｓ１／２ 与 Ｐｒｅ Ｓ２ 蛋白均存在于 ２５０ ｍ ｍ ｏｌ／ Ｌ 咪唑洗脱峰中。从 １ Ｌ 诱导菌体中可以分别纯化 Ｐｒｅ Ｓ１／２ 与 Ｐｒｅ Ｓ２ 蛋白 １０～１５ ｍ ｇ，纯度达到电泳纯。三种复性方式中，在 Ｎｉ Ｎ Ｔ Ａ 柱上复性 Ｐｒｅ Ｓ２ 蛋白的复性率达 ６０．５％ 。结论：６× Ｈｉｓ／ Ｎｉ Ｎ Ｔ Ａ 表达纯化系统不仅可以使外源蛋白在大肠杆菌中获得高效表达，而且可以通过简单的纯化步骤得到较高纯度的目的蛋白。该表达纯化系统为利用大肠杆菌制备重组蛋白提供了一种简便可行的方法。
- 孟莉韩保光陈坤宋晓国张贺秋凌世淦马贤凯
- 关键词：重组蛋白质组氨酸标签乙型肝炎前S抗原
- 丙型肝炎病毒第一高变区抗原的筛选、克隆表达及临床初步应用
- 目的:本研究通过筛选丙型肝炎病毒第一高变区(HVR1)序列,组成多靶点抗原组合,分析HCV患者体内HVR1抗体的异质性,并对其临床初步应用进行评价.方法:采用生物信息学对现有HVR1序列筛选,并进一步克隆表达,用间接EL...
- 修冰水王国华张贺秋宋晓国陈坤阎瑾琦冯晓燕凌世淦朱翠霞
- 关键词：丙型肝炎病毒抗原克隆表达
- 文献传递
- CpG ODN作为黏膜免疫佐剂的研究进展被引量：4
- 2009年
- 经黏膜免疫因其简便易行、可同时激发黏膜免疫和系统免疫应答等优点受到极大关注。但由于存在黏膜屏障,能有效介导黏膜免疫应答的佐剂已成为研究热点。在诸多在研佐剂中,CpG ODN具有极强的黏膜免疫激活作用,诱导以Th1型为主的免疫应答,具有广阔的应用前景,本文综述了CpG ODN作为黏膜免疫佐剂的研究进展。
- 唐丽张贺秋许立博凌世淦
- 关键词：CPGODN黏膜免疫佐剂
- 丙型肝炎病毒第一高变区抗原及其在制备丙型肝炎病毒检测试剂中的用途
- 本发明公开了本发明提供丙型肝炎病毒(HCV)第一高变区抗原，还公开了该抗原在制备丙型肝炎病毒检测试剂中的用途。本发明采用生物信息学技术对现有丙型肝炎病毒第一高变区序列分析，筛选出17条具有变异株特异性HVR1多靶点抗原，...
- 修冰水王国华张贺秋宋晓国凌世淦阎瑾琦李昭
- 文献传递
- 甲型H1N1流感病毒NA、PB2和PA表位抗原区段的克隆和表达被引量：3
- 2010年
- 目的:分析比对甲型H1N1流感病毒神经氨酸酶(NA)、聚合酶B2(PB2)和聚合酶A(PA)抗原的序列,克隆表达保守的和变异的表位抗原区段,为免疫学诊断试剂的研究提供候选抗原。方法:采用BioSun生物学软件比较新近公布的A/H1N1流感病毒和我国猪流感病毒浙江株NA、PB2和PA抗原序列,并预测筛选NA、PB2和PA抗原表位保守区段与变异区段,采用PCR逐步合成法合成NA、PB2和PA表位抗原区段基因序列,并利用原核表达载体pBVIL1进行克隆表达。结果:筛选的保守表位抗原区段和变异表位抗原区段为NA/135～180aa、NA/310～350aa、PB2/1～80aa、PA/41～90aa、PA/231～280aa和PA/341～400aa;获得6条表位抗原区段基因序列,且6条表位抗原区段均获得了高效表达,得到纯化后的抗原。结论:获得了A/H1N1流感病毒NA、PB2和PA表位抗原区段,为进一步研制特异的甲型流感病毒快速诊断试剂提供了抗原储备。
- 宋晓国王国华朱翠侠戴振华修冰水何竞陈坤张向颖凌世淦杨静王升启张贺秋冯晓燕
- 关键词：甲型H1N1流感病毒神经氨酸酶克隆
- 丙型肝炎病毒核心蛋白不同区段在HEK293T细胞内的定位被引量：1
- 2004年
- 目的 :为进一步探讨HCV核心蛋白致癌机制 ,观察了HCV核心蛋白不同区段在HEK2 93T细胞内的定位情况。方法 :构建增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)和不同长度核心蛋白区段融合表达的pEGFP_C1系列重组载体 ,对HEK2 93T细胞进行瞬时转染 ,并在激光扫描共聚焦显微镜下观察核心蛋白不同区段在细胞内的定位。结果 :全长核心蛋白定位于细胞质 ;核心蛋白 1～ 5 9aa区段完全定位于细胞核 ;5 0～ 14 0aa区段和 1～ 14 0aa区段在细胞核和细胞质中均存在 ;130～ 191aa区段完全存在于细胞质中。结论 :核心蛋白不同区段在细胞内的定位不同 ,将导致其参与细胞调节的途径和功能的不同。
- 冯晓燕凌世淦刘荷中张贺秋宋晓国周涛
- 关键词：丙型肝炎病毒病毒核心蛋白质类
- 表达载体pBVTB及其构建方法和在HCV疫苗研究中的应用
- 本发明公开了一种具有免疫佐剂性质的表达载体pBVTB。该载体包含质粒pBV220的大部分序列和一些小分子免疫佐剂的基因。本发明还公开了运用基因工程方法制备pBVTB的过程，以及pBVTB与HCV高保守T细胞表位基因联合，...
- 凌世淦阎瑾琦
- 文献传递
- 利用IFNγ-ELISPOT检测肝癌复合表位抗原的细胞免疫反应
- 目的：构建肝癌多表位基因和含Tat PTD的多表位基因的原核表达载体,表达纯化融合蛋白,比较其细胞免疫反应。方法：中心模板法合成多表位和Tat PTD;PCR产物分别克隆入原核表达载体pBVIL1,构建含Tat PTD及...
- 何竞张贺秋王国华宋晓国陈坤朱翠侠凌世淦
- 关键词：肝癌细胞免疫反应融合蛋白
- 文献传递
