刘振
- 作品数:5 被引量:14H指数:2
- 供职机构:安徽省立医院更多>>
- 发文基金:安徽省自然科学基金国家自然科学基金安徽省科技攻关计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 微小RNA-21通过调控上皮-间充质转化对胆管癌细胞侵袭与转移的影响被引量:7
- 2014年
- 目的 观察微小RNA-21(miR-21)通过调控上皮-间充质(EMT)转化进程对胆管癌细胞的侵袭转移的影响.方法 构建合成无关序列、miR-21 mimics和miR-21 inhibitor并转染到胆管癌QBC939及RBE细胞中,实验设自然生长组(Cell组)、转染无关序列组(Cell-NC组)、转染miR-21mimics组(Cell-21M组)及转染miR-21 inhibitor组(Cell-21I组).通过实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-21在各组细胞中的表达;采用划痕实验、Transwell侵袭及迁移实验检测各组细胞侵袭力;RT-qPCR、Western blot检测EMT相关分子E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)及波形蛋白(Vimentin)的mRNA及蛋白表达.结果 在胆管癌QBC939和RBE细胞中,Cell组与Cell-NC组miR-21表达差异无统计学意义(P>0.05),Cell-21M组较Cell组表达增高,而Cell-21I组表达降低(P<0.05).Cell-21M组细胞侵袭迁移能力增加,Cell-21I组细胞侵袭迁移能力减弱(P<0.05).同时,Cell组与Cell-NC组E-cadherin、N-cadherin及Vimentin mRNA及蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05),Cell-21M组较Cell组E-cadherin mRNA及蛋白表达降低,N-cadherin及Vimentin mRNA及蛋白表达增高,Cell-21I组E-cadherin mRNA及蛋白表达增高,N-cadherin及Vimentin mRNA及蛋白表达均降低(P<0.05).结论 miR-21能够诱导胆管癌细胞发生EMT转化,促进胆管癌细胞的侵袭与转移.
- 刘振黄强刘臣海林先盛谢放朱成林邵峰
- 关键词:微小RNA-21胆管癌上皮-间充质转化
- 人胰腺星状细胞的新型分离方法
- 2018年
- 目的探讨人胰腺星状细胞(PSCs)的新型分离方法。方法通过gentleMACS“组织处理器.恒温震荡消化制备正常胰腺组织、胰腺癌组织的单细胞悬液。通过密度梯度离心法分离获得静息态和活化态的PSCs。结果通过新型的分离法,1g人正常胰腺组织能够获得约(2.6±0.7)×10^6个静息态PSCs,平均活率约为90.0%,细胞形态符合典型的静息态特征,328Jim激发波长下可观察到短暂蓝绿色自发荧光;1g人胰腺癌组织能够获得约(4.1±1.1)×10^6个活化状态的PSCs,平均活率约为92.0%,活化态的细胞均表达d一平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(vimentin)、成纤维细胞特异性蛋白1(FSP-1)等特征性标记。结论本研究所用新型分离方法,适用于静息态与活化态两种表型的PSCs,不但分离纯度较高,分离时间亦极大缩短,值得推广借鉴。
- 孟府陶黄玫刘振黄强
- 关键词:胰腺星状细胞密度梯度离心法
- microRNA-21对裸鼠人胆管癌细胞移植瘤EMT的影响被引量:2
- 2015年
- 目的观察microRNA-21(miR-21)对裸鼠人胆管癌细胞移植瘤生长及上皮间质转化(EMT)进程的影响。方法在两组裸鼠侧腹部皮下注射对数生长期的胆管癌细胞QBC939和稳定表达miR-21的QBC939-miR-21细胞,建立裸鼠移植瘤模型。采用Western blot、免疫组化及实时定量RTPCR法检测EMT的上皮细胞标志物E-钙粘蛋白(E-cadherin)和间质标志物N-钙粘蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的表达。结果 QBC939-miR-21组移植瘤体积大于QBC939组(P<0.05),且E-cadherin相对表达量降低,Vimentin、N-cadherin相对表达量增加。结论 miR-21促进了裸鼠胆管癌细胞移植瘤生长和EMT进程,为进一步研究miR-21在胆管癌中的功能及作用机制奠定了基础。
- 晋志远黄强刘臣海刘振林先盛谢放
- 关键词:胆管癌MICRORNA-21移植瘤
- 难以鉴别的胰腺肿块的诊治体会与分析被引量:1
- 2014年
- 目的探讨自身免疫性胰腺炎(autoimmune pancreatitis,AIP)的临床特点与胰腺癌鉴别的要点,提高对AIP的认识,降低临床误诊率。方法回顾我院普外科近期收治4例自身免疫性胰腺炎的诊疗经过并文献复习,分析总结AIP的诊疗体会。结果 4例患者均以黄疸、腹部不适为主要表现。2例胰腺病变为弥漫型,另2例为局限型;胰管狭窄2例,伴有胆管狭窄2例。4例患者均符合亚洲诊断标准及HISORt诊断标准。3例患者予以口服强的松治疗,随访疗效均良好,另1类患者行手术治疗,术后病理提示符合LPSP,术后恢复良好。结论 AIP是一种与免疫相关的特殊类型的慢性胰腺炎,临床少见,与胰腺癌难以鉴别,可结合血清IgG4水平、影像学表现、超声内镜下细针穿刺及诊断性应用激素等综合判断。
- 谢放黄强刘振林先盛胡俊
- 关键词:自身免疫性胰腺炎胰腺癌IGG4
- MicroRNA-21对胆管癌细胞侵袭与转移的影响被引量:4
- 2014年
- 目的探讨microRNA-21对胆管癌QBC939细胞株侵袭转移能力的作用。方法构建合成无关序列、microRNA-21 mimics和microRNA-21 inhibitor并转染至胆管癌QBC939细胞中。实验设自然生长组(Cell)、转染无关序列组(Cell-NC)、转染microRNA-21 mimics组(Cell-21M)及转染microRNA-21 inhibitor组(Cell-21I)。运用实时定量RTPCR检测各组细胞microRNA-21的表达;通过黏附实验检测各组细胞聚集能力的变化;划痕实验、Transwell迁移观察细胞迁移能力变化,Transwell侵袭实验观察细胞侵袭能力变化。结果与Cell组相比,microRNA-21在Cell-NC组表达无明显差异,在Cell-21M组表达增加,在Cell-21I组表达降低。黏附实验显示:与Cell组相比,Cel-NC组细胞聚集能力无明显变化,Cell-21M组细胞聚集能力增强,Cell-21I组细胞聚集能力减弱(P<0.05);划痕实验及Transwell迁移实验示Cell-NC组细胞迁移能力无明显变化,Cell-21M组细胞迁移能力增强,Cell-21I细胞聚集能力减弱(P<0.05);Transwell侵袭实验示Cell-NC组细胞侵袭能力无明显变化,Cell-21M组细胞侵袭能力增强,Cell-21I细胞侵袭能力减弱(P<0.05)。结论 microRNA-21可增强胆管癌QBC939细胞的侵袭与转移能力,提示microRNA-21可能在胆管癌的侵袭转移过程中发挥重要作用。
- 刘振黄强刘臣海林先盛谢放朱成林任维华
- 关键词:胆管癌MICRORNA-21MICRORNA-21