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磷脂酰肌醇3激酶特异性抑制剂LY294002对结核杆菌低分子多肽抗原激活γδT细胞的影响被引量：5: 2015年; 目的观察磷脂酰肌醇3激酶（P13K）特异性抑制剂LY294002对CD3单克隆抗体（CD3mAb）活化的T细胞及结核杆菌低分子多肽抗原（Mtb-Ag）激活γδT细胞的影响，探讨P13K在CD3mAb活化的T细胞及Mtb-Ag启动的78T细胞TCR途径信号转导中作用。方法分离获取健康人外周血单个核细胞（PBMC），用CD3mAb、佛波醇酯＋离子霉素（PMA＋IM）、Mtb-Ag刺激PBMC，采用流式细胞术检测CD3’T细胞和78T细胞0、6、12、24、48h和72h的CD69分子的表达情况。PBMC经LY294002（0、0．4、2、10~tmol／L）处理后再刺激培养，用EIA试剂盒检测CD3mAb和PMA＋IM刺激组CD3’T细胞白细胞介素（IL）一2的含量；经CD3PE和CD69FITC、v6PE和CD69FITC双染后，检测LY294002对CD3mAb活化T细胞和Mtb．Ag活化的γδT细胞增殖的影响，并计数培养扩增10d的细胞数量。结果用CD3mAb刺激24hCD3’T细胞和γδT细胞CD69的表达均达高峰（均在56％左右），用PMA＋IM刺激6h，均达高峰（均在99％左右），用Mtb-Ag刺激24h，亦均达高峰，但CD3^＋T细胞和γδT细胞CD69的表达分别为（16．0±0．0）％和（75．2±0．7）％，3组同时间点CD3^＋T细胞CD69的表达之间差异均有统计学意义（均P〈0．05），而78T细胞CD69的表达在PMA＋IM刺激组高于CD3mAb刺激组和Mtb-Ag刺激组（均P〈0．05），后两组差异则没有统计学意义（均P〉0．05）。用LY294002终浓度分别为0、0．4、2、10μmol／L处理的样本，CD3mAb刺激组CD3^＋T细胞CD69的表达分别为（52．0±0．5）％、（46．3±0．4）％、（33．2±0．4）％和（19．1±0．0）％；Mtb-Ag刺激组78T细胞CD69的表达分别为（66．2±0．6）％、（58．4＋0．5）％、（38．1±0．3）％和（19．3±0．1）％。0、0．4、2、10μmol／LLY294002处理CD3＋T细胞后，CD3mAb刺激组IL-2的含量分别为（561．1±86．2）、（477．0±75.5）、（280．3±53．9）、（36．0±8．7）ng／L，PMA＋IM刺激组为�; 王克强侯彦强段衍超陈岱韻吴家锋刘晶王雅姝李清华; 关键词：T细胞 1-磷脂酰肌醇3-激酶

MAPK/ERK特异性抑制剂对结核杆菌低分子多肽抗原活化γδΤ细胞的影响被引量：2: 2016年; 目的探讨丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶（MAPK/ERK）特异性抑制剂PD98059对结核杆菌低分子多肽抗原（Mtb-Ag）活化γδΤ细胞的影响。方法分离获取健康人外周血单个核细胞（PBMC），分别使用佛波醇酯＋离子霉素（PMA＋IM）、MtbAg刺激PBMC，流式细胞术检测处理0、6、12、24、48和72 h后γδΤ细胞CD69的表达。浓度为0、1、10和100μmol/L的PD98059预处理PBMC后再分别加入MtbAg（MtbAg组）、PMA＋IM（PMA＋IM组）处理24 h，流式细胞术检测活化γδΤ细胞CD69的表达；Mtb-Ag组继续培养10 d后收集细胞计数细胞总数、检测γδΤ细胞比例并计算γδΤ细胞的绝对数量。结果使用PMA＋IM处理6 h，γδΤ细胞CD69表达达高峰；使用Mtb-Ag处理24 h，γδΤ细胞CD69表达达高峰。处理后同一时点两组γδΤ细胞CD69表达比较，差异均具有统计学意义（均P〈0.05）。使用终浓度分别为0、1、10和100μmol/L的PD98059预处理PBMC后再分别加入Mtb-Ag、PMA＋IM处理24 h，流式细胞术检测显示Mtb-Ag组γδΤ细胞CD69表达分别为（79.0±0.8）%、（75.0±0.7）%、（54.0±0.5）%和（17.0±0.2）%，而PMA＋IM组γδΤ细胞CD69表达均在98%以上；MtbAg组继续培养10 d后，细胞总数由培养前的1.5x106分别增殖到（10.3±2.5）x106、（9.5±2.1）x106、（5.8±1.8）x106和（2.1±0.5）x106，γδΤ细胞数分别增殖到（6.2±0.9）x106、（5.0±0.8）x106、（2.1±0.5）x106和（0.4±0.1）x106。结论 Mtb-Ag可以通过MAPK/ERK信号转导通路特异性活化γδΤ细胞。; 王克强侯彦强冉张申吴家锋殷殷魏丽李清华李湘奇; 关键词：酶抑制剂

FSCE用于乳腺肿瘤术中诊断的研究: 2004年; 目的：探讨快速染色刮取涂片细胞学检查用于乳腺肿瘤术中快速诊断。方法：采用FSCE对90例乳腺肿瘤术中送检快速检查标本进行刮取涂片细胞学诊断，再与快速病理诊断对照，看其是否相吻合，最后与常规病理检查相比较，看其准确率。结果：FSCE制片全过程不超过1min，准确率98．7％，其中60例恶性肿瘤无一例假阳性，29例良性肿瘤无一例假阴性，1例未确诊者为粘液腺癌。结论：该方法用于乳腺肿瘤术中快速诊断，其时间快，设备简单，操作方便，准确率高，未见假阳性和假阴性。; 薛士中吴家锋王克强; 关键词：乳腺肿瘤术中诊断病理检查

非放射性原位杂交技术检测胃癌组织c-erbB-2和c-myc癌基因扩增的研究: 2005年; 目的研究c—erbB—2和c—myc癌基因在胃癌组织中扩增的意义。方法应用非放射性原位杂交技术检测81例胃癌标本中c—erbB—2和c—myc的扩增情况。结果C—erbB—2和c—myc在胃癌中的扩增率分别为50．6％和67．9％。c—erbB—2基因与胃癌组织分化程度、浸润深度及淋巴结转移有关（P〈0．05），分化程度越差、浸润深度越深、淋巴结有转移，c—erbB—2基因表达率越高，而C—myc癌基因与胃癌组织分化程度、浸润深度及淋巴结转移无关。两基因的扩增具有显著的相关性（x^2=7．26，P〈0．01）。结论c—erbB—2和c—myc扩增是胃癌发生过程中的一个重要的生物学因素，且两者具有较好的协同作用。; 王克强李雁晁储璋韩国新刘振忠东野圣伊吴家锋史继学; 关键词：原位杂交

351株病原菌感染的分布与耐药性分析: 2005年; 随着抗生素的广泛应用，细菌的耐药问题也日益严重，因此，了解医院某一时期内病原菌的种类、分布及耐药性状况。对指导临床用药有重要参考价值。我们对2004-01／2004—12从我院病房送检的各种标本中分离出的病原菌进行综合分析，为病人抗感染治疗提供病原学依据。; 杨凤霞吴家锋; 关键词：病原菌感染耐药性抗生素菌种

CD69分子在人外周血佛波醇酯＋离子霉素活化的γδT细胞表面表达的实验研究被引量：2: 2015年; 目的观察CD69分子在人外周血佛波醇酯（PMA）＋离子霉素（IM）活化的γδT细胞表面的表达情况。方法分离获取健康人外周血单个核细胞（PBMC），用PMA＋IM刺激，采用流式细胞术检测CD3^＋细胞和γδT细胞0、6、12、24、48和72h CD69分子的动态表达情况。结果PMA＋IM刺激PBMC0、6、12、24、48和72h，CD3^＋细胞CD69分子的表达分别为1．0％、99．5％、99．1％、98．0％、93．3％、92．1％；γδT细胞CD69分子的表达分别为0．91％、99．3％、98．6％、93．6％、88．7％、87．0％。结论PMA＋IM的刺激后CD3^＋细胞和γδT细胞迅速活化，CD69的表达几乎为100％，6h达高峰，随后缓慢下降，两种细胞活化表达CD69基本一致。; 晋红梅张婷婷王克强朱莉吴家锋段衍超; 关键词：佛波醇酯 ΓΔT细胞

咽拭子及耳脓性分泌物同时分离出形态变异的肺炎链球菌: 2005年; 杨凤霞徐志泉吴家锋; 关键词：肺炎链球菌脓性分泌物咽拭子大叶性肺炎条件致病菌机体抵抗力

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吴家锋

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