吴正存
- 作品数：30 被引量：8H指数：2
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金国家自然科学基金云南省应用基础研究计划面上项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>
- 一种hFGF21基因敲除人肝细胞株的构建方法
- 本发明公开了一种hFGF21基因敲除人肝细胞株的构建方法，该方法通过设计hFGF21靶位点引物并合成sgRNA寡核苷酸链序列，然后构建重组慢病毒质粒，获得重组慢病毒转染细胞，稳定敲除hFGF21基因，获得hFGF21基因...
- 张莹鲁帅尧胡婧雯马开利江勤芳高家红黄璋琼吴正存李云李聪杜廷福
- 文献传递
- 一种携带恒河猴抵抗素剪接体基因慢病毒载体的构建方法
- 本发明公开了一种携带恒河猴抵抗素剪接体基因慢病毒载体的构建方法，运用普通PCR直接同时扩增抵抗素全长和剪接体基因，用胶回收方法直接回收剪接体条带，然后进行载体的快速克隆测序；使用慢病毒载体高效转染试剂转染所有慢病毒载体质...
- 鲁帅尧马开利乞素冬李鸿钧和占龙马进陈瑜吴正存
- 文献传递
- 全身性过表达人源α-Syn-NLS转基因鼠的构建方法
- 本发明公开一种全身性过表达人源α‑Syn‑NLS转基因鼠的构建方法，本发明方法首先通过PCR方法获取人源α‑Syn编码序列和SV40核易位信号序列，再通过BP反应构建含有目的序列的入门克隆载体，酶切后，通过LR反应将入门...
- 黄璋琼唐东红叶尤松马开利李哲丽龙维虎王陈芸韦梦晨李国祥吴正存胡鹏
- 一种过表达SNCA的腺相关病毒载体AAV-SNCA、制备方法及其应用
- 本发明公开一种过表达SNCA的腺相关病毒载体AAV‑SNCA、制备方法及其应用，属于生物技术和医药领域，其技术方案包括构建过表达SNCA的腺相关病毒载体AAV‑SNCA和高滴度的AAV‑SNCA病毒滴度包装制备，将过表达...
- 马开利吴正存黄璋琼唐东红高家红易红昆
- 文献传递
- 食蟹猴体内自然成熟和体外培养成熟的卵母细胞对卵胞质内单精子显微注射(ICSI)结局的影响
- 2015年
- 目的：探讨食僖猴体内自然成熟和体外培养成熟（IVM）的卵母细胞对卵胞质内单精子显微注射（ICSI）结局的影响。方法：选取有正常月经周期和生育功能的13只健康成熟的雌性食蟹猴，使用优化的促排卵方案进行促排卵后，B超下观察用药后的卵巢情况，手术取卵后对已成熟的MⅡ期卵母细胞进行ICSI，未成熟的GV及MⅠ期卵母细胞在IVM16-38h后发育为MⅡ期卵母细胞，再进行ICSI，观察IVM及体内自然成熟的卵母细胞的受精情况和胚胎发育情况。结果：IVM为76．1％±14．9％，受精率为56．79％，卵裂率为73．91％，优质胚胎率为44．12％；体内自然成熟的卵母细胞受精率为68．52％，卵裂率为94．59％，优质胚胎率为58．57％。在受精率和卵裂率方面，两者间均有统计学差异（P〈0．05和P〈0．01），而优质胚胎率无统计学差异（P〉0.05）。结论：食蟹猴体外培养成熟的卵母细胞对ICSI结局有较大影响。
- 黄璋琼曾桥高家红江勤芳吴正存叶尤松李聪李云马开利
- 关键词：食蟹猴卵母细胞
- 一种食蟹猴的未成熟卵母细胞和胚胎的体外培养液及其应用
- 本发明公开一种食蟹猴的未成熟卵母细胞和胚胎的体外培养液及其应用，在商品化的基础培养液TL‑FERT中添加组合营养添加剂FBS+猴血清+100×非必须氨基酸+50×必须氨基酸，取出未成熟卵母细胞放置其中培养，培养液上方添加...
- 黄璋琼范胜涛马开利唐东红吴正存江勤芳李云
- 小鼠resistin基因慢病毒表达载体构建及在KMB17细胞中的表达被引量：3
- 2016年
- [目的]构建携带小鼠resistin基因的慢病毒表达载体,并高效转导靶细胞。[方法]从小鼠脂肪组织提取总RNA,经PCR扩增、酶切、连接、转化后构建重组质粒;通过293T细胞包装为重组慢病毒颗粒,然后感染KMB17细胞,检测小鼠resistin基因在靶细胞中的表达。[结果]PCR扩增到预期的342 bp大小的resistin基因目的片段;构建的重组质粒经酶切得到了342 bp大小的目的片段,测序鉴定为小鼠resistin基因序列;重组慢病毒包装可观察到很强的绿色荧光,说明具有较高的质粒转染效率;重组慢病毒感染KMB17后可检测到小鼠resistin基因转录水平和蛋白水平的表达,证明resistin基因得到有效转导并可在靶细胞中高水平表达。[结论]成功构建了携带小鼠resistin基因的慢病毒表达载体并可在KMB17靶细胞中获得高效表达。
- 陈瑜赵远岳俊李鸿钧和占龙马开利马进吴正存唐东红鲁帅尧
- 关键词：RESISTIN慢病毒载体靶细胞小鼠
- 非人灵长类帕金森模型的研究进展被引量：1
- 2021年
- 帕金森病(Parkinson’s disease,PD),作为全球第二大神经系统退行性疾病,目前已有的治疗手段仍不能从根本上逆转疾病的进程,而治疗手段的发现和评价离不开动物模型的建立,一个可靠、有效的动物模型将有利于PD的发病机制、诊断、治疗方法以及药物筛选的研究。啮齿类动物和非脊椎动物已被广泛用于建立PD模型,但其并不能完全呈现人类PD的行为学和病理特征,而非人灵长类(nonhuman primate,NHP)在生理、解剖结构和免疫等方面与人最为接近,更适合用来探索疾病机理和发现新的治疗方式,因此,本文就帕金森病NHP模型的建立方法进行综述,为帕金森病NHP模型建立提供参考。
- 刘永芳吴正存马开利
- 关键词：帕金森病
- 单纯疱疹病毒1型及其与常见神经退行性疾病相关性的研究进展被引量：2
- 2022年
- 单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus-1,HSV-1)是一种嗜神经性的DNA包膜病毒,通过感染口腔黏膜导致唇疱疹及眼部损害,可潜伏于大脑中,激活时能引起中枢神经系统的病变而发生单纯疱疹病毒性脑炎(herpes simplex virus encephalitis,HSVE)。神经退行性疾病以特异性神经元的大量丢失为主要特征,是一类进行性发展的复杂疾病,常表现为认知功能障碍、运动障碍、小脑出现共济失调、肢体震颤及眼球震颤等临床表现。常见的神经退行性疾病包括阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)、帕金森病(Parkinson disease,PD)、多发性硬化症(multiple sclerosis,MS)等,这些疾病与HSV-1感染密切相关。因此,本文就HSV-1及其与常见神经退行性疾病相关性的研究进展作一综述。
- 胡鹏吴正存马开利
- 关键词：单纯疱疹病毒1型阿尔兹海默病帕金森病多发性硬化症
- 一种登革3型病毒E蛋白在293F细胞中的高分泌表达方法
- 本发明涉及一种登革3型病毒E蛋白在293F细胞中的高分泌表达方法，所述表达方法包括的质粒优化步骤中，优化后的质粒序列为SEQ ID NO.2。所述优化后的质粒序列添加在pSectag2A载体的Kpn1和Not1两个酶切位...
- 孙强明索家乐闫玲梅潘玥吴正存
