孙学强
- 作品数：26 被引量：78H指数：5
- 供职机构：中国动物卫生与流行病学中心更多>>
- 发文基金：国家科技基础性工作专项江苏省应用基础研究计划公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学交通运输工程自动化与计算机技术化学工程更多>>
- 信号肽对溶血素在大肠杆菌中跨膜转运的影响被引量：1
- 2018年
- 信号肽在引导外源蛋白的跨膜转运过程中具有重要作用。本试验通过PCR方法获得带有信号肽序列和不带有信号肽序列的溶血素基因,构建表达载体在大肠杆菌中进行诱导表达。经过溶血试验和免疫印迹试验证明缺失了信号肽的重组溶血素不能被跨膜转运至细胞外;带有信号肽的重组溶血素能够跨膜转运大肠杆菌细胞外。本试验为猪链球菌2型基因缺失弱毒疫苗的研究、细菌信号肽以及基因工程重组蛋白的可溶性表达进行了有益探索。
- 齐安生张秀娟宫枫举张兴进马喆潘子豪孙学强
- 关键词：溶血素信号肽大肠杆菌跨膜转运
- 三种感染动物阳性血清与口蹄疫病毒重组非结构蛋白的反应原性被引量：2
- 2017年
- 本试验通过生物信息学技术比对分析GenBank中口蹄疫病毒(A型、O型和亚洲1型)非结构蛋白的保守序列,根据大肠杆菌密码子偏好性,优化合成了非结构蛋白基因,经过测序和转化,筛选到能够表达重组非结构蛋白的阳性重组菌株。经过Western-blot试验,证明表达的重组非结构蛋白能分别与口蹄疫病毒感染的牛、羊和猪阳性血清发生特异性反应。该重组蛋白待进一步验证后,可用于口蹄疫病毒感染动物的鉴别检测试剂盒研究。
- 孙学强邵卫星张如民南文龙张兴进宫枫举张秀娟刘爽
- 关键词：感染血清反应原性
- 浅谈兽用生物制品生产过程中质量管理被引量：2
- 2007年
- 在日趋激烈兽用疫苗市场．国内兽用生物制品企业如何分得一羹．逐步树立自己的品牌。加大力度进行兽用新生物制品研发、提高产品质量的稳定性能．仍然是摆在我们目前的重要问题。就兽用生物制品生产过程中质量控制．谈谈我在生产过程中质量管理的体会．
- 肖长赏王宝华闫培安陆贾贤孙学强
- 关键词：兽用生物制品生产过程质量管理兽用疫苗稳定性能产品质量
- 对上海市区县兽医实验室设置问题的思考被引量：3
- 2013年
- 阐述了目前上海市区(县)兽医系统实验室设置情况比较混乱,部分区兽医系统实验室已转/并至农产品检测中心,名称五花八门,由此出现的问题也层出不断的情况。根据《动物防疫法》《应急条例》等法律法规,对动物疫病预防控制机构及兽医系统实验室承担的职责进行梳理,汇总和分析后,得出结论:区(县)兽医系统实验室应依法设置于动物疫病预防控制机构,疫病监测与诊断是兽医系统实验室法律所赋予的主要职能,与以检测为主的农产品安全检测中心有着本质的区别,剥离了兽医实验室的区(县)动物疫病预防控制机构,无法真正履行好其法定职责。并提出了相应的解决方案与建议。
- 王建孙学强刘佩红
- 关键词：兽医实验室
- 中华绒螯蟹'颤抖病'病原的鉴定及免疫学检测方法的建立
- 该研究从江苏省宝应市采集的患'颤抖病'濒死的河蟹,用健康的中华绒螯蟹进行人工复制试验,经过连传两代的人工复制试验并结合电镜观察,确定其病原为一种55~65nm的有囊膜的病毒.采用Sepharose4B柱层析方法人工人复制...
- 孙学强
- 关键词：免疫学方法颤抖病中华绒螯蟹
- 文献传递
- 猪伪狂犬病毒浙江株感染性细菌人工染色体克隆的构建被引量：10
- 2010年
- 通过同源重组将携带细菌人工染色体(Bacterial Artificial Chromosome,BAC)载体和GFP表达框的pHA2质粒序列插入到PRV病毒的UL23(TK)基因内,获得了重组病毒rPRV-HA2;将该重组病毒的环状基因组电转化到感受态细胞EscherichiacoliDH10B,筛选到病毒的感染性克隆PRV BAC(pPRV)。pPRV转染VeroE6细胞可以重新启动病毒的生产性感染,该拯救病毒的细胞病变和体外增殖特性与rPRV-HA2一致。病毒生长曲线表明TK基因的部分删除和BAC载体的插入不会影响病毒在体外的复制。PRV感染性BAC克隆的成功构建,将方便在大肠杆菌内对病毒基因组进行快速、准确的操作,为进一步开展PRV基因功能和病毒载体研究奠定基础。
- 尹文玲尹龙勃叶伟成孙学强姚火春张淼涛王一成张存
- 关键词：伪狂犬病毒细菌人工染色体感染性克隆重组病毒
- 非洲猪瘟病毒结构蛋白p54的原核表达与反应原性鉴定被引量：6
- 2019年
- p54蛋白为非洲猪瘟病毒(ASFV)的主要结构蛋白之一,参与病毒对靶细胞的吸附与进入。为深入研究p54结构蛋白的抗原性,根据GenBank序列号(MK128995)对应的E183L基因序列,设计1对特异性引物扩增其整个CDS区,并克隆至pET-30a(+)载体,构建了表达p54蛋白的重组质粒pET-30a(+)-p54。用BL21(DE3)转化该质粒,经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE电泳,可见重组质粒表达出1条分子量约为20 kDa的特异性条带,且重组表达蛋白以融合表达蛋白形式存在于上清。进一步通过His亲和层析法纯化目的蛋白,用ASFV阳性血清进行蛋白质免疫印迹反应,发现表达的重组p54蛋白能与ASFV阳性血清产生特异性反应,表明p54蛋白表达成功。本研究为ASFV抗体ELISA检测方法的建立奠定了基础。
- 官丽娟邵钰任伟杰宫枫举韩同福邹艳丽孙学强孙学强吴晓东黄保续
- 关键词：非洲猪瘟病毒结构蛋白
- ELISA双抗体夹心法检测河蟹“颤抖病”病毒被引量：4
- 2001年
- 用纯化的河蟹“颤抖病” (暂定名 )病毒分别免疫家兔和山羊 ,制备高效价的抗血清。羊抗血清经硫酸铵盐析纯化。经方阵滴定 ,选择P/N =2 95时作 1∶10 0稀释的抗血清为工作浓度 ,建立ELISA双抗体夹心法检测样本 14 4份 ,包括来自长江水域的野生河蟹、人工感染发病的河蟹、 1999年和 2 0 0 0年从江苏采集的自然发病的病蟹及市场购买河蟹。结果显示 ,病蟹和市场购买河蟹的阳性率为 6 6 7%～ 10 0 % ,人工感染的病蟹和人工感染石蟹致病组阳性率均为 10 0 % ,来自长江水域的健康河蟹及未接种病毒的对照石蟹阳性率均为 0 ,表明建立的方法可以用于检测河蟹“颤抖病”
- 孙学强金业陆承平
- 关键词：河蟹ELISA双抗体夹心法
- 河蟹颤抖病病毒的分离纯化及其动物致病性试验被引量：12
- 2002年
- 将人工复制发病的河蟹 (中华绒螯蟹 )组织匀浆 ,离心上清经聚乙二醇 (PEG 6 0 0 0 )沉淀 ,再经分子筛层析 ,分部收集分别测定 2 5 6～ 30 0nm的吸光值。各收集峰用PEG2 0 0 0 0 ,于 4℃浓缩 ,制作负染标本经透射电镜观察 ,发现在第一峰浓缩液中存在大量球状病毒颗粒 ,大小 5 0～ 10 0nm。用纯化的病毒进行动物致病性试验 ,接种石蟹 (锯齿华溪蟹 )发生“颤抖病” ,并用ELISA双抗体夹心法进行检测 。
- 孙学强陆承平
- 关键词：河蟹颤抖病病毒分离纯化
- 4株鸡源多杀性巴氏杆菌生物学特性分析被引量：1
- 2022年
- 禽多杀性巴氏杆菌可引起禽出血性败血症,又称为禽巴氏杆菌病、禽霍乱,发病快,死亡率高。为对禽多杀性巴氏杆菌的致病机制研究及临床防治提供支持,通过PCR鉴定、耐药性分析、生物被膜形成能力试验以及半数致死量(LD_(50))测定,对4株临床分离的鸡源多杀性巴氏杆菌(Pm01、Pm03、1801及1803)进行了相关生物学特性分析。PCR鉴定结果显示,4株多杀性巴氏杆菌均为荚膜血清A型,均含有pfhA、exBDtonB、nanB、oma87、ompH、hgbB、hgbA、sodC、sodA 9种毒力基因,不含有toxA、nanH、ptfA 3种毒力基因;耐药性分析结果显示,4株多杀性巴氏杆菌对克林霉素、红霉素、四环素、卡那霉素、阿莫西林、头孢噻吩和氨苄西林等7种抗生素表现出全部或部分耐药;生物被膜形成能力试验结果显示,Pm01菌株能形成极强的生物被膜,而Pm03、1801以及1803菌株几乎不能形成生物被膜;LD_(50)测定结果显示,4菌株LD_(50)分别为1.33×10^(1)、2.74×10^(2)、4.22和4.22 CFU。结果表明,4株鸡源多杀性巴氏杆菌含有多种毒力基因,均具有较强的致病性,其毒力与生物被膜形成能力不完全相关,且对多种抗生素耐药。本研究为禽巴氏杆菌病防治提供了技术支撑与参考数据。
- 于勇左家坤王凯民张瑶李思言韩先干孙学强
- 关键词：禽多杀性巴氏杆菌
