宋孚洋 作品数:16 被引量:6 H指数:1 供职机构: 宁夏大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 宁夏大学科学研究基金资助 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 生物学 文化科学 更多>>
全长A型肉毒毒素突变体构建及其在产气荚膜梭菌系统中表达的研究 肉毒神经毒素(botulinum neurotoxin, BoNT)是一种大分子的毒性蛋白,根据其抗原性的不同,可分划为A~G 7种血清型。每型BoNT均由一条单一多肽链组成,分子量约为150KDa,在结构上分为两部分:... 宋孚洋关键词:肉毒毒素 突变体 疫苗 产气荚膜梭菌 文献传递 重组全长A型肉毒毒素突变体疫苗 本发明公开了一种重组全长A型肉毒毒素突变体疫苗。本发明提供的蛋白质,是如下1)或2)所述的蛋白质:1)由序列表中的序列2的氨基酸残基序列组成的蛋白质;2)将序列表中的序列2氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/... 王景林 宋孚洋 高姗 康琳 马臣杰文献传递 产气荚膜梭菌β1毒素抗体的间接ELISA方法 本发明公开了一种产气荚膜梭菌β1毒素抗体间接ELISA检测方法,包括步骤一、产气荚膜梭菌β1毒素抗体的间接ELISA方法的建立,步骤二、结果判定标准的确定。本发明属于病原微生物检测技术领域,具体是提供了一种特异性好、灵敏... 马臣杰 曾瑾 马玲玲 李勇 宋孚洋 刘晓明 马红梅 吴霜 马嘉琦 王东 李文文献传递 动力蛋白相关蛋白1对高糖条件下BCG感染巨噬细胞后线粒体自噬的调控作用 宋孚洋甘草酸酶联免疫检测技术 本发明提供了一种甘草酸酶联免疫检测技术,它涉及微量免疫检测技术领域,它采用鼠源单克隆抗体技术,主要步骤包括:免疫原与包被原的合成与鉴定;进行动物免疫;制备杂交瘤细胞:取准备好的脾细胞与骨髓瘤细胞融合后,应用间接ELISA... 彭励 宋孚洋 张东涛 李宏福 任树勇 郑丽萍文献传递 豚鼠胎儿成纤维细胞的分离培养及生物学特性分析 被引量:2 2013年 为建立豚鼠成纤维细胞系,分离培养豚鼠胎儿成纤维细胞,并对其进行细胞活力、生长曲线、细胞周期及基因转染等分析。结果表明,豚鼠胎儿成纤维细胞在10代以内时形态良好,随着传代次数的增加,梭型细胞有拉长趋势,至第20代时梭形明显拉长,单位面积细胞数目大量减少。同时,细胞冻存后复苏贴壁情况良好。EGFP基因转染的成纤维细胞形态特征及生长状态与未转染细胞相似,转基因细胞和未转基因细胞的生长曲线均为S形,符合体外培养细胞正常生长增殖规律。以流式细胞仪分析逆转录病毒介导的EGFP基因转染细胞,可见染色体核型仍为二倍体,说明感染的细胞保持其遗传稳定性。流式细胞仪检测转染后不同时间点收集的病毒液感染的细胞效率,结果显示,病毒转染48h、72h收集病毒液组感染效率分别为16.9%和11.6%,显著高于24h收集病毒液组(0.9%)。 吴月红 何承文 宋孚洋 闫琰 刘升 何玉龙关键词:胎儿成纤维细胞 EGFP基因 逆转录病毒 甘草酸单克隆抗体的制备与ELISA方法的建立 被引量:1 2016年 目的制备特异性的甘草酸单克隆抗体。方法通过活性酯法分别制备了甘草酸免疫抗原GA-KLH和包被抗原GA-OVA;用免疫抗原免疫Balb/c小鼠,采用间接竞争ELISA法筛选后,成功获得了能稳定分泌甘草酸单克隆抗体的杂交细胞株3D6;用阳性细胞株刺激小鼠,获得了高效价的、特异性很高的甘草酸单克隆抗体。结果经检测与甘草酸主要结构类似物甘草次酸的交叉反应率低于0.5%,与熊果酸、齐墩果酸等甘草酸结构类似物无交叉反应;将该方法应用于甘草样品实测,采用HPCL法验证,结果表明:所采用的ELISA分析方法测定的数据与HPLC分析方法有很好的相关性(r^2=0.9977)。结论为甘草酸ELISA快速检测试剂盒的开发奠定了良好的基础。 宋孚洋 郝秀静 张东涛 马臣杰 彭励 丁晓莉关键词:甘草酸 单克隆抗体 酶联免疫法 甘草 甘草酸检测试剂盒的组装与效果评价 2015年 目的:研制甘草酸间接竞争酶联免疫试剂盒。方法:通过棋盘滴定法确定了抗原最佳包被浓度为1μg/m L,一抗稀释度为1:8000,并以此成功组装了甘草酸快速检测试剂盒。结果:使用试剂盒检测了甘草酸样品,并与HPLC测定结果进行对比,发现灵敏度有了显著提高,达到了纳克级别。试剂盒的回收率高于96%,变异系数低于4.5%。结论:开发出的试剂盒稳定性良好,不同批次产品间检测值没有显著差异,有效的缩短了检测时间和检测成本,为甘草酸快速检测提供了一种新方法。 宋孚洋 张东涛 郝秀静 马臣杰 彭励 任树勇关键词:甘草酸 检测试剂盒 酶联免疫吸附法 产气荚膜梭菌β2毒素抗体的间接ELISA方法 本发明公开了一种产气荚膜梭菌β2毒素抗体间接ELISA检测方法,包括步骤一、产气荚膜梭菌β2毒素抗体的间接ELISA方法的建立,步骤二、结果判定标准的确定。本发明属于病原微生物检测技术领域,具体是提供了一种特异性好、灵敏... 曾瑾 王玉炯 吴霜 宋孚洋 李勇 马臣杰 张思雨 马玲玲 马红梅 王东 李文文献传递 30株牛源分枝杆菌分离株基因分型鉴定 被引量:1 2022年 目的采用基因分型方法对30株分离自西北三省的牛源分枝杆菌分离株进行鉴定。方法从西北三省的规模化奶牛场采集结核菌素(PPD)阳性奶牛的咽拭子和鼻拭子,经分离培养后,采用16S rRNA、MPT64以及多位点PCR进行菌株分型鉴定,利用数目可变串联重复序列分析(variable-number of tandem repeats,VNTR)和分枝杆菌散在分布重复单元(Mycobacterial interspersed repetitive unit,MIRU)连用的方法对其基因型进行了分析。结果菌株分型鉴定结果表明,30株牛源临床分离株全部为分枝杆菌属,其中,12株属于结核分枝杆菌复合群,18株属于非结核分枝杆菌;12株结核分枝杆菌中10株为牛分枝杆菌,2株为人型结核分枝杆菌。MIRU-VNTR分析结果表明,12株结核分枝杆菌呈现10种VNTR基因型,4株聚集为2个基因簇。结论30株分离株均属于分枝杆菌属,且结核分枝杆菌中以牛分枝杆菌为主。 邓可新 王晓平 宋孚洋 严娜 张旭 张旭关键词:牛分枝杆菌 基因分型