岳保红
- 作品数：96 被引量：249H指数：8
- 供职机构：郑州大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省科技攻关计划河南省医学科技创新人才工程项目更多>>
- 相关领域：医药卫生电子电信生物学农业科学更多>>
- 组织型纤溶酶原激活剂真核表达载体的构建及其在乳癌细胞系MCF-7中的瞬时表达被引量：1
- 2006年
- 目的:构建组织型纤溶酶原激活剂(t- PA)真核表达载体,并检测其在乳癌细胞系MCF-7中的瞬时表达。方法:以含t PAcDNA的质粒PETPFR为模板,PCR扩增目的片段t PA,HindⅢ和SalⅠ双酶切t- PA,HindⅢ和XhoⅠ双酶切pcDNA3真核表达载体。SalⅠ和XhoⅠ的黏性末端互补,体外连接酶切产物,重组体转化感受态JM109细菌,筛选菌落和测序鉴定。以脂质转染胺试剂LipofectamineTM2000将pcDNA3t PA转染入乳癌细胞系MCF-7,G418筛选。应用原位杂交技术,以地高辛标记的t PAcDNA为探针,显示t PA在MCF7中的瞬时表达。结果:电泳获得目的片段t PA的条带2.1kb,初步鉴定为阳性重组体,测序证实为正确的t PA序列。MCF-7细胞原位杂交显示大部分细胞表达阳性。结论:组织型纤溶酶原激活剂真核表达载体构建成功,可在乳癌细胞系MCF7中表达。
- 朱晓燕岳保红丁一张钦宪
- 关键词：组织型纤溶酶原激活剂真核表达载体
- siRNA对生长抑素基因表达的抑制作用
- 2006年
- 目的:研究siRNA对生长抑素(SOM)基因表达的抑制作用．方法:根据生长抑素基因序列设计和合成 RNA干扰的靶序列,应用RiboMAXT7体外转录试剂盒合成siRNA并转染胃癌细胞系 SGC-7901,经RT-PCR,免疫组化法检测生长抑素在mRNA和蛋白质水平的抑制效应．结果:成功合成了siRNA(21 bp)．胃癌细胞系 SGC-7901中SOM基因的表达呈强阳性,分布在胞质中,siRNA作用48 h后SOM基因的表达明显抑制,与空转染和空白对照组相比有显著性差异(49．71％±0．056％vs 10．49％±0．021％, 0％,P<0．01)．结论:siRNA可特异性抑制生长抑素基因的表达．
- 朱晓燕岳保红张钦宪
- 关键词：生长抑素RNA干扰
- 急性白血病患者白细胞表面分化抗原34的检测
- 2000年
- 目的 研究白细胞表面分化抗原 (CD) 34在急性白血病中的表达情况 ,探讨CD34与白血病的关系。方法 采用间接免疫荧光技术对 118例初诊为急性白血病患者的骨髓标本进行细胞免疫学表型分析。结果 急性淋巴细胞白血病 (ALL)、急性髓细胞性白血病 (AML)、急性杂合细胞白血病 (HAL)、急性未分化细胞白血病 (AUL)中高表达CD34抗原的病例分别为 45 .8% (2 2 / 48)、37.5 %(18/ 48)、6 0 .0 % (12 / 2 0 )和 10 0 .0 % (2 / 2 )。CD34阳性细胞 (CD34+)在各型白血病骨髓中的数量 ,以CD34+细胞数占单个核细胞百分率计 :ALL中 ,B ALL、T ALL和T/B ALL组分别为 30 .7%、11.0 %和16 .0 % ;AML中 ,M0 亚型组为 41.2 % ,M1～M5亚型组为 2 4.3% ;HAL和AUL分别为 43.0 %、35 .0 %。结论CD34与急性白血病的发生密切相关 ,不同亚型之间CD34高表达发生率和CD34+细胞数有很大差异。未分化的AUL、低分化的M0 及细胞表型紊乱的HAL的CD34+细胞数高于分化明确的白血病。
- 岳保红曹孟德秦东春毛红丽黄波田
- 关键词：抗原分化急性白血病免疫表型分型
- 抑制p53缺失和突变型白血病细胞PPP2R5A表达后细胞生物学变化
- 2012年
- 目的探讨在p53缺失和突变型白血病细胞内PPP2R5A表达量的下降与细胞生物学变化之间的关系,为寻找核干细胞因子(NS)的非p53依赖性信号转导通路提供依据。方法利用脂质体转染技术将针对PPP2R5A的siRNA转染到p53缺失或突变型的白血病细胞HL-60、THP-1和Raji细胞内,沉默PPP2R5A基因。RT-PCR法和免疫细胞化学法检测siRNA的转染效果并找出最佳转染浓度和时间。倒置显微镜观察转染组和对照组细胞的生长状态并绘制细胞生长曲线。瑞-吉染色观察转染组和对照组细胞的胞核、染色质及形态改变。流式细胞术AnnexinV/PI双染法进行细胞凋亡分析,PIDNA染色法进行细胞周期测定。结果倒置显微镜观察显示转染后细胞生长状态和形态均出现变化,瑞-吉染色显示转染后细胞有凋亡小体形成。细胞凋亡分析和细胞周期测定显示转染组凋亡细胞百分比率增高,G1期和G2/M期细胞百分比上升,而S期细胞百分比减低,表明细胞增殖减弱。结论抑制p53缺失或突变型白血病细胞PPP2R5A基因后细胞的凋亡、分化有一定变化,提示p53缺失或突变型白血病细胞中PPP2R5A在细胞分化、凋亡调控中扮演一定角色,为验证NS非p53途径的信号通路是否与PPP2R5A有关提供了依据。
- 付书贞孙晓莉Abdallah Dlykan贾宇魏园玉刘帅岳保红
- 关键词：白血病细胞核干细胞因子脂质体转染细胞生物学
- 成人急性髓性白血病免疫学表型分析被引量：7
- 2008年
- 目的:分析成人急性髓性白血病(AML)免疫学表型特征。方法:采用三色流式细胞仪(FCM),以CD45/SSC双参数散点图设门,对213例AML患者进行免疫学表型分析。结果:AML主要表达CD117(88.73%)、CD13(90.61%)、CD33(75.59%)、CD34(62.91%)、HLA-DR(63.85%)抗原;CD14和CD64在AML-M4中表达率为54.55%和31.82%,在AML-M5中表达率为40.00%和60.00%,CD14的特异性高于CD64。30.5%的AML患者伴有淋系抗原表达,主要是CD7(23.0%)。AML-M3患者CD117表达率为86.67%,CD34和HLA-DR表达率偏低(P<0.05)。结论:CD13、CD117和CD33联合应用更有利于确定髓性白血病。CD14和CD64有助于确定AML-M4、M5,前者特异性更强。CD34及HLA-DR低表达为AML-M3的特征。
- 王清霞张秋堂岳保红刘帅
- 关键词：急性髓性白血病免疫学表型成年人
- 核干细胞因子基因在HL-60白血病细胞诱导分化后的表达
- 目的检测核干细胞因子(Nucleostemin,NS)基因在HL-60白血病细胞诱导分化后的表达变化,探讨NS基因表达与细胞分化之间的关系以及与急性白血病发病存在的可能机制。方法:从NS基因的3个变异体中筛选出共同序列设...
- 岳保红张慧蔚利纳王园园尹惠卿刘帅
- 关键词：核干细胞因子诱导分化HL-60细胞
- 文献传递
- HLA-DRB1基因多态性与急性淋巴细胞白血病和慢性髓性白血病易感性关联的研究
- 目的:为了探讨急性淋巴细胞白血病和慢性髓性白血病易感性与 HLA-DRB1基因多态性之间的关联性,试图找出急性淋巴细胞白血病和慢性髓性白血病的易感基因。方法:采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)DNA 分型技...
- 曹孟德秦东春岳保红苏堤王东升苏天水燕桂香盛光耀
- 文献传递
- 酶联免疫吸附实验质量控制体会被引量：3
- 2017年
- 酶联免疫吸附试验（ELISA）具有特异性好、高效稳定、适合医院大批量标本检测等优点。但ELISA试验影响因素较多、步骤偏多，稍有疏忽就会影响试验结果。
- 刘鸿雁岳保红
- 关键词：酶联免疫酶联免疫吸附试验
- 非小细胞肺癌重组人血管内皮抑素治疗与循环内皮祖细胞水平研究被引量：3
- 2012年
- 目的分析晚期非小细胞肺癌（NSCLC）患者抗血管生成治疗前后外周血中循环内皮祖细胞（cEPCs）的变化，探讨cEPCs在NSCLC中的应用价值。方法采用吉西他滨＋顺铂化疗（GP）方案联合重组人血管内皮抑素（实验组）及单用GP方案（对照组）治疗晚期NSCLC患者52例，流式细胞法检测治疗前后cEPCs水平。结果实验纽组临床有效率为44．0％，对照纽为25．9％（P=0．245）；实验纽临床受益率为80．0％，对照组为51．8％（P=0．044）；实验组cEPCs平均下降（0．041±0．044）％，对照组平均下降（0．011±0．047）％（P〈0．05）。结论化疗联合抗血管生成治疗治疗晚期NSCLC优于单用化疗，cEPCs可以作为有效的疗效预测指标。
- 栾文强毕文静岳保红刘帅鲁培
- 关键词：非小细胞肺癌循环内皮祖细胞重组人血管内皮抑素
- 核干细胞因子特异性短发夹状RNA对HL-60细胞分化抗原和生物学性质的影响被引量：8
- 2006年
- 目的研究核干细胞因子(nuc leostem in,NS)特异性短发夹状RNA(shRNA)阻断NS基因表达对HL-60白血病细胞分化抗原及生物学性质的影响,探讨NS的生物学功能和与急性白血病的关系以及用于基因治疗的可能性。方法特异性转染试剂和合成的NS短发夹状RNA(NS-shRNA)体外直接转染HL-60细胞,采用RT-PCR判断基因阻断效果,MTT法测定转染后细胞增殖能力,流式细胞仪(FCM)测定细胞分化抗原,形态学观察细胞形状和生长状态,血细胞分析仪测定细胞大小、粒度。结果合成的2条NS-shRNA均能明显阻断NS基因表达,抑制率分别为37.82%和71.88%;NS-shRNA能显著抑制HL-60细胞的增殖并存在时间和浓度依赖性,以48 h和10 nmol/L浓度最佳。转染后:分化抗原CD11b、CD33、CD14、CD64、HLA-DR增高,CD38降低,显示有向粒系继续成熟和向单核系重新分化趋势;细胞聚团性减弱,碎片增多,一部分细胞形态变成梭形和长尾形,染色后细胞核紧密,凹陷,髓过氧化物酶(MPO)和α-醋酸萘酚酯酶(α-NAE)活性增强;大小和粒度分析小体积细胞和核碎裂细胞增多。结论NS-shRNA通过阻断NS基因表达,对HL-60细胞有抑制增殖和促分化作用,改变了细胞的生物学性质,使细胞恶性程度有所减弱,并有可能诱发凋亡,在白血病的基因中具有潜在的临床价值。
- 岳保红朱晓燕张功员孙玲赵小强王清霞刘帅张秋堂张钦宪
- 关键词：核干细胞因子短发夹状RNA分化抗原生物学性质分化
