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间充质干细胞移植抑制小鼠急性移植物抗宿主病的实验研究(英文): 2010年; 目的研究间充质干细胞的体内免疫调节活性。方法将C57/BL脾脏细胞输注入受亚致死量照射的BALB/c小鼠,建立急性移植物抗宿主病模型,受体小鼠或同时接受密质骨骨髓来源的间充质干细胞,流式细胞技术检测脾细胞表面表达的活性分子。结果模型经输注间充质干细胞后,鼠脾脏CD11b+细胞表达的CD86和CD69减少,提示抗原呈递细胞的成熟度下降。此外,作为一种效应T细胞早期活化和发育的标记,CD3+CD69+细胞/CD3+细胞的比值降低,导致脾内CD3+细胞的绝对和相对数目减少。但是,在同系脾细胞输注模型中,CD11b+细胞表面的CD69和MHCⅡ表达以及CD3+细胞表面的CD69不受影响。结论 MSCs可以分3个阶段抑制急性移植物抗宿主病,有望成为急性移植物抗宿主病的有效治疗手段,但仍需进行深入研究。; 李红郭子宽李秀森江小霞朱恒要辉宇王晓燕苏永丰廖丽刘元林吴英张毅毛宁; 关键词：急性移植物抗宿主病抗原呈递细胞免疫调节 T淋巴细胞

DC-CIK治疗对肾癌患者淋巴细胞亚群的影响被引量：10: 2012年; 目的:观察自体树突状细胞(dendritic cell,DC)联合细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced kill cell,CIK)(DC-CIK)免疫疗法治疗肾癌的近期临床疗效和不良反应,及其对患者外周血淋巴细胞亚群的影响。方法:采集10例肾癌患者外周血单个核细胞,经体外诱导产生DC和CIK细胞,分次回输给患者,随访3～12个月,观察患者临床疗效和不良反应。分别于第1次治疗前1周和每次治疗后1个月取患者外周血,流式细胞仪检测其淋巴细胞亚群变化。结果:本研究中6例晚期肾癌患者接受1～3疗程DC-CIK细胞免疫治疗后,完全缓解1例,部分缓解3例,病情稳定1例,疾病进展1例;近期有效率为60%,临床反应率为90%。治疗前及1～3疗程治疗后患者外周血的CD3+CD4+CD8-、CD3+CD4-CD8+、CD3+CD19-、CD3-CD19+、CD3-CD16+CD56+、CD3+CD16+CD56+、CD3+HLA-DR-、CD3+HLA-DR+、CD3+CD28+CD8+细胞无明显变化(P>0.05),CD4+CD25+T细胞(Treg细胞)治疗后有降低趋势(P<0.05)。除1例患者出现一过性发热外,余患者无不良反应。结论:DC-CIK免疫治疗肾癌能改善患者免疫抑制状态,提高机体的抗肿瘤免疫效应,有较好的近期疗效,无明显不良反应。; 王赛男高海燕潘欣廖丽吴春喜吴行伟王丹红陈虎; 关键词：肾细胞癌树突状细胞临床疗效

3例骨髓有核红细胞≥50%髓系肿瘤的诊断被引量：1: 2017年; 目的分析3例髓系肿瘤的临床资料、诊断及预后,理解WHO(2016)中骨髓有核红细胞≥50%的髓系肿瘤的诊断,并初步探讨相关疾病的临床特征及预后。方法分析3例骨髓有核红细胞≥50%的髓系肿瘤患者初诊时的年龄、病史、症状、体征及实验室检查结果,对比WHO(2016)和WHO(2008)诊断标准并进行诊断,用IPSS-R预后评分系统分析预后。结果根据WHO(2008)诊断标准,3例均诊断为急性红白血病(AEL);根据WHO(2016)诊断标准,其中2例诊断为MDS伴原始细胞增多-2(MDS-EB-2),1例诊断为急性髓系白血病(AML)伴成熟型。其预后也不同,前2例均为老年男性,骨髓细胞有明显发育异常和复杂的遗传学异常,预后差,而第3例为中年女性,骨髓细胞未见明显发育异常及遗传学异常,预后中等。结论 WHO(2016)分型系统更关注疾病的不同生物学特征,能更好地区分具有不同临床特征及预后的两类疾病,其较WHO(2008)分型系统更具合理性。; 周丽娜赵鹏陈虎王建中盛宏霞高冬格廖丽张斌; 关键词：髓系肿瘤骨髓增生异常综合征急性红白血病

180例急性白血病流式细胞术免疫分型的特点分析被引量：23: 2004年; 为了探讨急性白血病的免疫表型特征与诊断价值 ,采用流式细胞术三色免疫荧光直接标记技术检测白血病患者 ,根据抗体积分系统进行分型。结果显示 ,三染色标记法检测 180例白血病患者中 ,急性淋巴细胞白血病(ALL)患者除均表达淋系抗原外 ,同时有 4 9.4 %伴髓系抗原 (CD13,CD33)的表达 ;急性髓细胞白血病 (AML)患者除均表达髓系抗原外 ,同时有 4 3.2 %伴淋系抗原 (CD4 ,CD7)表达。结论 :流式细胞仪三色免疫荧光直接标记法进行白血病免疫分型能确诊一些特殊类型的白血病 ,对于急性白血病的诊断治疗和预后判断均有很大帮助。; 姚志娟廖丽党永辉张婧田瑛冯凯齐聪燕王谨峰陈虎; 关键词：流式细胞术免疫分型急性白血病

人脐带羊膜来源和骨髓来源间充质干细胞的免疫调控特征比较被引量：2: 2011年; 本研究旨在比较人脐带羊膜来源的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)与骨髓来源MSC的免疫调控能力,为临床开展异基因造血干细胞移植提供实验依据。采用胶原酶消化法分离人脐带羊膜贴壁细胞,并从细胞形态、生长特性、细胞表型、多向分化能力进行鉴定。利用淋巴细胞转化实验和混合淋巴细胞反应比较人脐带羊膜来源MSC与人骨髓来源MSC的免疫调控能力的差异。结果表明,人脐带羊膜来源和骨髓来源的MSC具有相似的生物学特征,即细胞呈成纤维样形态生长,并具有强大的体外扩增能力;流式细胞仪检测细胞表型结果显示,脐带羊膜来源MSC高表达CD73、CD90、CD105,而骨髓来源MSC表面标志CD34、CD45以及参与免疫反应的细胞表面分子HLA-DR和CD86等为阴性。其诱导多向分化能力结果表明,两组细胞均可向成脂肪、成骨和成软骨分化。混合淋巴细胞反应和淋巴细胞转化实验证明,两组MSC均可抑制异体T细胞的增殖,且随MSC数量的增加,抑制效应逐渐增强;RT-PCR检测显示两组MSC表达相同的免疫相关因子。结论:人脐带羊膜来源的MSC可以替代成人骨髓MSC,可作为满足实验和临床需要的MSC重要来源。; 徐曼刘元林陈晨廖丽张毅陈虎; 关键词：间充质干细胞骨髓免疫调控

人外周血CD4^+ CD25^+细胞体外扩增T细胞亚群及功能检测被引量：3: 2008年; 目的建立尼龙面柱法体外分选、扩增CD4+CD25+细胞的方法,并检测扩增后T细胞亚群及其功能,为临床输注供者来源的CD4+CD25+细胞抑制急性移植物抗宿主病(acute graft versus host disease,aGVHD)提供实验基础。方法体外用尼龙棉柱法分离T细胞,加入含Anti-CD35μg/ml、IL-2 500 IU/ml、10%FCS的RPMI-1640培养基进行培养扩增CD4+CD25+细胞,分别在培养前、培养后3、8、16、21、28 d检测T细胞亚群CD3、CD4、CD8,CD4+CD25+及其功能;同时检测CD28+和fasL的表达。结果体外尼龙棉柱法分离的T细胞约16 d后,CD4+CD25+细胞可扩增(50.88±6.21)倍;但CD8+细胞也同时扩增,甚至略多于CD4+CD25+细胞。而T细胞活化指标fasL(介导细胞凋亡的死亡因子)的表达在培养前后的变化无统计学差异。结论尼龙棉柱法在体外扩增培养可获得数量较多的CD4+CD25+Treg细胞,这些细胞不会促进T细胞活化,可能不会增加对宿主细胞的杀伤力。; 王志红陈虎刘广贤冯凯廖丽; 关键词：扩增 T细胞亚群

HLA相合同胞HSCT治疗标危恶性和非恶性血液病的移植物:G-CSF预激骨髓、外周血造血干细胞还是骨髓?: 目的研究哪种移植物在安全性和疗效方面具有比较优势,综合评价解决选择G-CSF预激骨髓(G-pBM)、外周血造血干细胞(PBSC)还是骨髓(BM)作为移植物何者更合理的问题。方法对2004年3月至2009年3月完成的HL...; 江岷扈江伟楼晓曹履先冯凯张婧廖丽陈虎李欲航胡亮钉李渤涛徐晨俞志勇陈健琳宁红梅王军

脐带间充质干细胞联合UM171对脐血源CD34^+细胞的扩增效果研究被引量：3: 2017年; 目的研究脐带间充质干细胞联合UM171对脐血来源CD34^+细胞的扩增效果。方法脐血来源CD34^+细胞及脐带来源间充质干细胞分为以下4组进行体外扩增培养10 d:对照组、UM171培养组、间充质干细胞共培养组、UM171联合间充质干细胞共培养组,采用方差分析比较不同组别间细胞扩增倍数及流式表型和集落培养情况。结果脐带间充质干细胞CD105,CD73,CD90,不表达CD14,CD34,CD19,CD45,HLA-DR,经过诱导可以向成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞分化。CD34^+细胞在不同条件下体外培养10 d后,UM171培养组总有核细胞数扩增14倍,CD34^+细胞扩增13.5倍;MSCs共培养组总有核细胞数扩增11倍,CD34^+细胞扩增10倍;联合培养组总有核细胞数扩增达22倍,CD34^+细胞扩增21倍。联合培养组扩增后细胞CD34^+CD38^-比例达(91.49±2.67)﹪,较间充质干细胞培养组(78.11±2.35)﹪及UM171培养组(91.49±2.68)﹪相比差异具有统计学意义(P均<0.01)。扩增后细胞集落培养14 d后,各系集落形成良好,UM171扩增组细胞较MSCs扩增组在红系及粒系形成能力方面存在优势。结论脐带血间充质干细胞作为细胞滋养层可提高CD34^+细胞体外扩增效果,UM171在扩增过程中可较好的保持细胞干性,二者联合应用扩增效果最佳,建立的脐带间充质干细胞联合UM171对脐血源CD34^+细胞的扩增方法可用于CD34^+细胞体外扩增培养。; 李猛盛宏霞刘阳廖丽田宠孙鹏张斌陈虎; 关键词：间质干细胞 CD34^+脐血

体外连续传代培养脐带间充质干细胞染色体核型的稳定性被引量：3: 2012年; 目的分析不同代次人脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSCs)的染色体核型,初步评价UC-MSCs在体外连续传代培养过程中染色体结构的稳定性。方法采用胶原酶消化法分离UC-MSCs,贴壁培养传代,通过细胞形态、免疫表型及多向分化潜能等生物学特性进行鉴定,利用G显带分析第3、5、7代细胞的染色体核型。结果染色体核型分析显示,第3、5、7代UC-MSCs为正常二倍体核型,G显带未见染色体结构异常。UC-MSCs呈成纤维样形态生长,高表达CD73、CD90、CD105,不表达CD34、CD45、CD40、CD80、CD86、CD154、HLA-DR;在特定的体外诱导条件下可以向骨、脂肪、软骨分化。结论 UC-MSCs在体外连续传代培养7代以内染色体结构稳定,为临床应用UC-MSCs的安全性提供了遗传学方面的实验依据。; 王军徐曼盛宏霞孔维霞扈江伟廖丽汤永永宁红梅张斌陈虎; 关键词：间充质干细胞脐带核型连续传代

小鼠胚胎AGM区永生化MSC样基质细胞的分离及其生物学特征被引量：3: 2008年; 为了探讨小鼠胚胎主动脉-性腺-中肾(aorta-gonad-mesonephros,AGM)区基质微环境对胚胎造血的作用,分离鉴定小鼠背主动脉(dorsalaorta,DA)来源间充质干细胞样基质细胞(mesenchymal stem cell like stromal cells,MSC like stromal cells)并研究其生长特性、表面标志和间质分化能力。取E11.5小鼠胚胎,分离获得DA区细胞,转染质粒pSV3neo-SV40,筛选具有G418抗性的阳性细胞,挑取成纤维样细胞,传代培养并检测其增殖能力,应用流式细胞术检测相关表面标志,诱导其向脂肪、成骨和成软骨细胞分化。结果表明:筛选获得的20个细胞克隆多为成纤维样细胞。mDAF3和mDAF18可在体外传代50代以上,稳定表达G418抗性,细胞倍增时间约为24小时,具有向成骨细胞、脂肪细胞和成软骨细胞分化的能力,流式细胞术检测结果显示其表达CD29、CD44、CD105、Sca-1,弱表达CD34,CD45和CD31。结论:永生化的mDAF3和mDAF18具有MSC的表型特征和分化功能,提示小鼠胚胎DA区可能存在MSC,小鼠胚胎DA区MSC样基质细胞可为研究基质微环境对胚胎造血发育的调控作用提供支持细胞。; 方妮侯春梅要晖宇廖丽贺文艳张毅毛宁; 关键词：AGM区基质细胞

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廖丽

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