徐然然
- 作品数:4 被引量:1H指数:1
- 供职机构:中国食品药品检定研究院更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 基于CFSE和PI的流式细胞术测定CTL杀伤率方法的建立及优化
- 目的:建立一种基于CFSE和PI的流式细胞术的CTL测定方法。方法:首先使用CFSE标记靶细胞,利用TNFαTNF模拟靶细胞杀伤,PI染色,流式检测,确定CFSE和PI的浓度及作用时间。然后利用已确知有较强细胞免疫作用的...
- 徐然然卫江波郑秀玉付志浩饶春明王军志
- 关键词:碘化丙啶流式细胞术
- 文献传递
- 基于CFSE和PI的流式细胞术测定CTL杀伤率方法的建立及优化
- 目的:建立一种基于CFSE和PI的流式细胞术的CTL测定方法。方法:首先使用CFSE标记靶细胞,利用TNFαTNF模拟靶细胞杀伤, PI染色,流式检测,确定CFSE和PI的浓度及作用时间。然后利用已确知有较强细胞免疫作用...
- 徐然然卫江波郑秀玉付志浩饶春明王军志
- 关键词:碘化丙啶流式细胞术
- 文献传递
- 疫苗诱导的特异性细胞杀伤活性检测方法的建立被引量:1
- 2012年
- 目的建立一种基于流式细胞术的评价疫苗诱导的特异性细胞杀伤活性的方法,以完善疫苗及基因治疗药物的评价方法。方法用羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯(Carboxyfluorescein diacetate,succinimidyl ester,CFSE)标记淋巴细胞,利用肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor,TNFα)模拟杀伤淋巴细胞,用碘化丙啶(Propidium iodide,PI)染色,流式细胞仪检测,确定CFSE和PI的浓度及作用时间。利用已确知有较强细胞免疫作用的治疗性乙型肝炎疫苗免疫小鼠,分离特异性淋巴细胞并用特异性肽刺激,分离未免疫小鼠的淋巴细胞作为靶细胞,并用特异性抗原肽致敏,并从靶细胞的标记、效应细胞培养时间,效靶作用时间、效靶比几方面进行优化,确定试验方法的操作流程。结果采用CFSE/PI双标记能有效分离实验所需各组群,细胞分为CFSE+PI-、CFSE+PI+、CFSE-PI+、CFSE-PI-4个组群,可区分活细胞和凋亡细胞。CFSE标记靶细胞的时间为6 h;效应细胞培养时间为72 h;效靶作用时间为6 h;效靶比可使用100∶1和50∶1。结论建立了基于流式细胞术的评价疫苗诱导的特异性细胞杀伤活性的方法,该方法可有效和精确地评价CTL杀伤效应,完善了疫苗及基因治疗药物的评价方法。
- 卫江波徐然然付志浩郑秀玉饶春明高凯杜丽芳王军志沈心亮
- 关键词:碘化丙啶流式细胞术
- 基于CFSE和PI的流式细胞术测定CTL杀伤率方法的建立及优化
- 目的:建立一种基于CFSE和PI的流式细胞术的CTL测定方法。方法:首先使用CFSE标记靶细胞,利用TNF α TNF模拟靶细胞杀伤,PI染色,流式检测,确定CFSE和PI的浓度及作用时间。然后利用已确知有较强细胞免疫作...
- 徐然然卫江波郑秀玉付志浩饶春明王军志
- 关键词:碘化丙啶流式细胞术