徐辉
- 作品数：56 被引量：86H指数：5
- 供职机构：四川大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：四川省自然科学基金国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学化学工程轻工技术与工程农业科学更多>>
- 具有温控开关的囊状聚氨酯药物控释体及其制备方法
- 本发明公开的具有温控开关的囊状聚氨酯药物控释体是由温敏聚氨酯囊管装载药物制得，在其应用中表现出温度响应的释药特性，呈现“开-关”效应：在开关温度以下，囊壁聚氨酯分子呈刚性结晶态，使控释体内药物的扩散、释放受阻；当温度升至...
- 徐辉史锐赖俊秀常金明黄乙洳陈意范浩军
- 文献传递
- 果胶寡糖生产菌的构建与筛选
- 2017年
- 生物酶解法是新兴益生元果胶寡糖(Pectin oligosaccharides,POS)生产的主要途径.通过构建黑曲霉来源的多聚半乳糖醛酸酶(Polygalacturonase,PGA)基因pga A表达载体p PIC9K-PGA,电转毕赤酵母GS115,筛选能够表达用于制备POS重组果胶酶的工程菌.利用SDS-PAGE检测诱导表达上清,TLC分析其水解产物成分,筛选得到一株特定降解果胶生成寡糖的酵母工程菌GS-12.该重组多聚半乳糖醛酸酶(Recombinant polygalacturonase,re PGA)相对分子量(Mr)为86×10~3,发酵液酶活水平24.8 U/m L;GS-12经30次传代后目的基因pga A仍能稳定遗传,水解产物成分未发生改变;酶促反应得出该酶最适温度50℃,最适p H 5.5,50℃保温5 h相对酶活保持50%以上.综上,所构建酵母工程菌GS-12遗传稳定性高,耐热性提升,作用果胶可得大分子量多糖产物,对POS的工业规模化生产具有重要价值.
- 李茜许毅杨赟博刘海霞徐辉曹毅乔代蓉
- 关键词：多聚半乳糖醛酸酶毕赤酵母分泌表达
- 紫外诱变选育高产丁二酮乳酸菌株及其低成本发酵优化被引量：1
- 2017年
- 2,3-丁二酮是一种常用的安全食品添加剂,为了提高微生物发酵中菌株的丁二酮产量,从泡菜水样品中分离筛选出一株野生型高产丁二酮菌株,并进行紫外诱变选育以及发酵条件优化.筛选获得高产丁二酮野生型乳酸菌株(1)-2,产量为67.02 mg/L,经16S r DNA分子鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum).紫外诱变获得高产丁二酮突变株U13,产量为127.88 mg/L.对突变前后菌株几种丁二酮代谢相关酶酶活变化的比较结果显示,突变株丁二酮产量的提高是因为乳酸脱氢酶减少及乙酰乳酸合成酶增加.正交实验优化突变株U13的最佳丁二酮发酵条件为接种量3%,初始pH 6.6,葡萄糖30 g/L,组合氮源(蛋白胨:酵母粉:牛肉膏=2:1:2)20 g/L,柠檬酸氢二铵3 g/L,乙酸钠2 g/L,吐温-80 1 m L/L,K_2HPO_4 2 g/L,Mg^(2+)2 mmol/L,Mn^(2+)0.7 mmol/L,Cu^(2+)2 mmol/L,温度为37℃.利用廉价碳氮源淀粉及小麦麸皮替代原有碳氮源,淀粉替代率不超过20%、小麦麸皮替代率不超过40%时,丁二酮产量降幅比较低.本研究通过诱变选育和发酵条件优化,提高了菌株丁二酮产量,并通过廉价碳氮源替换降低了成本,可为丁二酮的微生物工业发酵提供参考.
- 张白梅徐辉曹瑜刘博胡超李宪玲史红霞曹毅乔代蓉
- 关键词：植物乳杆菌紫外诱变发酵优化小麦麸皮
- 高产木聚糖酶细菌的筛选、鉴定及其部分酶学特性被引量：9
- 2017年
- 细菌木聚糖酶具有优良的酶学特性,发掘和研究高产菌株资源对促进木聚糖酶工业生产具有十分重要的意义.采用刚果红透明圈法从采集的土样样品中筛选分离得到1株高产细菌木聚糖酶的菌株SD4-4,通过形态特征及16S r DNA序列分析进行鉴定,并以本实验室保存的细菌木聚糖酶工业生产用菌枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis SL作为对照,对比研究SD4-4的产酶水平及酶学性质.结果表明,SD4-4为短小芽孢杆菌(B.pumilus),利用小麦麸皮摇瓶发酵,其上清酶活可达1 166.0 U/m L,而SL上清酶活为281.0 U/m L.SD4-4所产木聚糖酶作用最适温度约为50℃,最适p H约为5.0.粗酶液在30-50℃的环境下处理10 min,相对酶活均保持在90%以上;在p H 4.0的条件下处理30 min,相对酶活仍有76%,酸性环境下稳定性较好.因此,菌株SD4-4产酶水平高于对照菌株SL,酶学特性更为优良,工业应用前景良好,尤其在饲料添加剂行业具有较大的开发潜力.
- 高志强李茜徐岳松张玮佳曹毅乔代蓉徐辉
- 关键词：木聚糖酶RDNA短小芽孢杆菌枯草芽孢杆菌酶学性质
- 播娘蒿耐寒基因DsKIN1的克隆、序列分析及冷诱导表达分析
- 2017年
- 播娘蒿是极端耐寒的冷诱导植物,研究其低温胁迫下的冷响应基因对于揭示其抗寒性具有重要意义.根据拟南芥At KIN1和At KIN2同源比对,设计同源引物进行播娘蒿KIN基因克隆,通过RACE技术克隆得到Ds KIN1基因,利用Vector NTI11.5软件对其进行序列分析,采用Realtime-PCR测定Ds CBF1、Ds CBF2、Ds COR和Ds KIN1基因在不同处理方式[整株低温处理、同一植株局部低温处理和局部未受低温处理(两部分植株)]下各时间段(0.2 h、0.5 h、1 h、2 h、6 h、12 h、24 h)的表达,采用String数据库预测分析与Ds KIN1相互作用的蛋白.结果显示,Ds KIN1基因序列全长为462 bp,开放阅读框ORF长度为198 bp,编码66个氨基酸,分子量(Mr)为6.61×10~3,理论等电点为9.10,亲水性好.播娘蒿Ds CBF1和Ds CBF2在0.2 h开始表达,在2 h达到最大,随后下降.在冷诱导0.2 h后,Ds CBF调控的耐寒基因Ds COR和Ds KIN1基因开始表达,均呈现上调的趋势.整株、局部冷诱导植株与同一植株上未受低温胁迫部位的耐寒基因Ds COR和Ds KIN1表达模式类似.此外发现与Ds KIN1相互作用的蛋白大部分为低温诱导蛋白、盐和渗透压胁迫响应的信号蛋白、与渗透调节有关的家族蛋白、RING-H2锌指蛋白2B以及未知蛋白等.本研究说明播娘蒿局部冷诱导时,冷信号可进行传递,使未受冷诱导部位获得耐寒性能.
- 田磊常斐斐秦世尚唐滋一陈麒名马晓瑞徐辉乔代蓉曹毅
- 关键词：播娘蒿基因克隆低温胁迫
- 大肠杆菌植酸酶appA的融合表达及耐热性研究被引量：2
- 2006年
- 提取大肠杆菌(SUGL)基因组DNA,通过PCR方法从基因组扩增得到植酸酶基因ap-pA,测序结果表明该基因的ORF读框包含1440个核苷酸.将该基因重组于大肠杆菌表达载体pET-32a(+)中,导入大肠杆菌BL21(DE3),构建工程菌BL21(DE3)-pET32a-appA.对表达条件进行了优化,在30℃下,以0.1mmol/L IPTG诱导表达植酸酶,表达量达到10%以上.在37℃,用钒钼酸铵法测定了表达的植酸酶活性为40740.7U/g,同时观察不同加热温度对植酸酶活性的影响程度.发现融合表达的植酸酶的耐热性得到提高.
- 徐辉雷高鹏徐文华贺顺姬刘谊董明奇曹毅
- 关键词：大肠杆菌植酸酶耐热性
- 一种制备硫代异鼠李糖甘油二酯的方法
- 本发明公开了一种制备硫代异鼠李糖甘油二酯的方法，将干燥的藻粉在常压和室温的情况下用提取液I进行溶解搅拌4～5h，利用离心机分离收集有机相I，添加到提取液II中，再利用离心机分离收集有机相II，经低压色谱柱进行纯化，通过减...
- 徐辉曹毅乔代蓉
- 文献传递
- 一株高产油脂丝状真菌的形态学及rDNA-ITS2分子鉴定被引量：5
- 2012年
- 从采集的土样中分离获得45株产油脂菌株,其中丝状真菌7-4的原始油脂含量最高,达到46.80%.分别采用传统形态学鉴定方法及rDNA-ITS2序列克隆进行鉴定.形态学鉴定的结果初步表明该真菌为卷枝毛霉(Mucorcircinelloides),采用rDNA-ITS2序列进行复核表明该菌与卷枝毛霉(M.circinelloides)同源性为98.00%,而与易脆毛霉(M.fragilis)同源性达到100.00%.从构建的系统进化树中可以看出,该菌与易脆毛霉共同构成一个分支,并与卷枝毛霉聚成一大枝.结合形态学鉴定的结果确定菌株7-4为易脆毛霉(M.fragilis).其脂肪酸组成与植物相似,以棕榈酸、亚油酸、油酸为主,不饱和脂肪酸含量达91.77%.
- 周火祥冯晓虎宋涛刘艳孙显徐辉乔代蓉曹毅
- 关键词：RDNA-ITS2微生物油脂
- 一种利用微藻同时生产叶黄素和油脂的方法
- 本发明公开了一种利用微藻同时生产叶黄素和油脂的方法，包括以下步骤：(1)微藻细胞的收集；(2)微藻细胞的称取；(21)叶黄素的提取进和(22)油脂的提取过程；同时设有对叶黄素和油脂提取顺序对调的试验以确定最优化的提取顺序...
- 曹毅乔代蓉徐辉
- 文献传递
- 碱催化与脂肪酶催化联合制备生物柴油的方法
- 本发明公开了一种碱催化与脂肪酶催化联合制备生物柴油的方法，包括以下工艺步骤：将植物油、低碳醇、异质性碱催化剂和烷烃类共溶剂加入到反应器进行碱催化转脂反应；反应后的中间反应产物采用减压蒸馏去除共溶剂，沉降分离去除异质性碱催...
- 曹毅李璟徐辉乔代蓉
- 文献传递
