曾令兵
- 作品数：262 被引量：854H指数：17
- 供职机构：中国水产科学研究院长江水产研究所更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项国家现代农业产业技术体系建设项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生经济管理更多>>
- 斑点叉尾病毒病研究概述被引量：7
- 2007年
- 简要介绍了斑点叉尾病毒病的临床症状、流行病学特征、诊断与防治方法以及病毒的生物学特性与检测技术等。
- 孟彦肖汉兵曾令兵
- 关键词：病毒病
- 青鱼γ-干扰素基因的克隆与表达分析被引量：1
- 2016年
- 【目的】开展青鱼γ-干扰素（IFN-γ）基因的克隆、结构特征与表达谱分析研究。【方法】采用cDNA末端快速扩增技术获得了青鱼（Mylopharyngodon piceus）IFN-γ基因cDNA的5′和3′末端序列,然后根据其末端序列设计特异性引物,扩增得到青鱼IFN-γ基因cDNA全长序列,对其序列和编码氨基酸序列进行生物信息学、同源性比较及系统进化树分析,同时对其在青鱼各组织中的表达进行分析。通过构建真核表达载体,将其转染青鱼鳍条组织细胞进行表达分析。【结果】青鱼IFN-γcDNA全长为895bp,其开放阅读框大小为549bp,编码182个氨基酸。氨基酸序列比对分析结果显示,青鱼IFN-γ与人、鸡、鼠IFN-γ的序列相似性仅为1.5%~7.7%,与其他鱼类IFN-γ序列相似性较高,为16.3%~92.9%。青鱼IFN-γ分子N末端包含1个信号肽序列、C末端有IFN-γ特征序列（[I/V]-QX-[K/Q]-A-X2-E-[L/F]-X2-[I/V]）以及核定位基序（RRRR）。青鱼IFN-γ蛋白二级结构与高等脊椎动物IFN-γ类似,包含7个α螺旋结构。经Poly I：C诱导后发现,IFN-γ在青鱼头肾、肾、脾、皮肤和鳃组织中表达显著上调,最高的为头肾,其次为脾、皮肤、鳃和肾,而在心脏和脑组织中无显著变化。青鱼γ-干扰素真核表达质粒在青鱼鳍条组织细胞中成功表达IFN-γ。【结论】成功克隆了青鱼IFN-γ基因cDNA,经Poly I：C诱导后,该基因在头肾中上调倍数最为显著,青鱼γ-干扰素在体外获得表达。
- 周勇范玉顶黄莉莉曾宪辉张雪萍张琳琳曾令兵
- 关键词：青鱼IFN-Γ基因结构特征
- 池塘养殖患病泥鳅两种病毒病原的电镜观察初报被引量：2
- 2018年
- 利用电子显微镜技术,对湖北荆州池塘养殖患病泥鳅的组织进行超薄切片电镜观察。电镜观察结果显示:在患病泥鳅的脾脏、肾脏、心脏及肠道组织中观察到大量球形和杆状两种形态的病毒颗粒。球形病毒颗粒无囊膜,直径约50~75 nm;杆状病毒颗粒有囊膜,形态多样,大小约为(50~100)nm×(300~500)nm;细胞培养分离病毒结果显示,球状病毒可在鲫鱼脑组织细胞系(Gi CB)中增殖,可导致细胞出现典型的细胞病变效应(CPE,cytopathic effect),但没有观察到Gi CB细胞中杆状病毒的增殖。
- 刘文枝范玉顶江南赵建青周勇曾令兵
- 关键词：病毒病原电镜观察细胞培养
- 水产生物安保发展趋势与政策建议被引量：14
- 2016年
- 本文基于我国水产养殖疫病防控发展的现状和趋势,对我国水产生物安保需求形势形成基本判断。针对水产养殖业"十三五"发展规划,凝练出水产生物安保的战略目标、基本原则和战略重点,并提出了"以生物安保为指导调整我国水产养殖业发展政策""积极与国际接轨提升我国水生动物卫生管理水平"和"尽快实施一批水产生物安保科技重点研发计划"等重大建议;指出应认清生物安保属国家生态安全的战略地位,是行业执政能力的反映,应以生物安保为核心引领我国水产养殖业的技术升级与结构调整,并尽快重点抓好国家级和省级原良种场的生物安保,为我国水产养殖业的健康可持续发展提供支撑。
- 黄倢曾令兵董宣梁艳谢国驷张庆利
- 关键词：可持续发展生态安全
- 一种大鲵虹彩病毒病疫苗及制备方法和应用
- 本发明公开一种大鲵虹彩病毒病疫苗及制备方法和应用。本发明的大鲵虹彩病毒病疫苗为将大鲵虹彩病毒主衣壳蛋白基因截短优化后翻译的重组蛋白，其序列为SEQIDNO.2所示。将该蛋白对应的核苷酸序列按酵母密码子偏好性进行优化，合成...
- 周勇曾令兵范玉顶徐进马杰
- 文献传递
- 体外抗草鱼呼肠孤病毒药物筛选细胞模型的建立被引量：4
- 2011年
- 以草鱼肾细胞系(CIK)和草鱼呼肠孤病毒为材料,采用噻唑蓝比色法分先给药后感染、先感染后给药、药物与病毒共孵育后感染3组进行抗草鱼呼肠孤病毒药物的筛选,建立了体外抗草鱼呼肠孤病毒药物筛选的细胞模型。先给药后感染试验组的结果表明,穿琥宁在阻断草鱼呼肠孤病毒吸附和侵入细胞时效果最强,其次是利巴韦林和板蓝根,黄芩的阻断效果最弱;而在先感染后给药试验组中,穿琥宁、利巴韦林和黄芩抑制草鱼呼肠孤病毒增殖的作用显著,板蓝根抑制病毒增殖的作用不明显;在药物与病毒共孵育后感染试验组中,利巴韦林对草鱼呼肠孤病毒有一定的直接杀灭作用,黄芩、板蓝根和穿琥宁等的体外杀病毒效果不明显。该模型的建立确认了药物在CIK细胞上具有抑制草鱼呼肠孤病毒的作用,不同给药方式药物的作用效果不同,也为抗病毒药物的筛选提供了有效的技术平台。
- 安伟曾令兵周勇徐进范玉顶肖艺
- 关键词：草鱼呼肠孤病毒CIK细胞药物筛选抗病毒噻唑蓝
- 嗜水气单胞菌灭活疫苗免疫后大鲵外周血免疫指标的变化研究
- 以福尔马林灭活的嗜水气单胞(Aeromonas hydrophila)作为免疫原(F-AH),通过腹腔注射免疫健康大鲵,剂量为0.5ml/尾,分别免疫后的第1、4、7、14、21、28天采集血液样品,进行大鲵外周血液的血...
- 杨星曾令兵刘文枝肖汉兵孟彦高正勇张辉
- 关键词：嗜水气单胞菌灭活疫苗吞噬活性
- 文献传递
- 化学合成小干扰RNA分子高效抑制草鱼呼肠孤病毒复制被引量：7
- 2009年
- 采用化学合成法分别合成靶向草鱼呼肠孤病毒(GCRV)RNA基因组节段L2片段上的RNA聚合酶基因(RdRp)和S4片段上的外衣壳蛋白基因(OCP)的小干扰RNA分子siRNA-RdRp1 286、siRNA-RdRp1 441和siRNA-OCP117,脂质体转染法转染草鱼肾脏组织细胞系CIK。转染6 h后用草鱼呼肠孤病毒感染细胞,48 h后收集感染细胞的培养液,微量培养法测定病毒lgTCID50/0.1mL值。以细胞管家基因-βactin mRNA水平为参照,RT-PCR法检测呼肠孤病毒siRNAs靶基因的mRNA水平。病毒滴度测定结果表明:转染siRNA-RdRp1 286、siRNA-RdRp1 441和siRNA-OCP117三种siRNAs的病毒滴度lgTCID50/0.1 mL分别为4.41±0.16、3.83±0.44和1.94±0.42,极显著低于阳性感染对照组的病毒滴度(7.92±0.52,P<0.01),转染siRNA阴性对照组的病毒滴度无明显变化(7.50±0.17,P>0.05)。RT-PCR检测结果显示:与阳性感染对照组比较,转染siRNA-RdRp1286、siRNA-RdRp1 441和siRNA-OCP117后的CIK细胞中GCRV mRNA水平显著下降,抑制率分别为82.08±2.15%、89.19±1.14%和92.62±0.17%,而转染阴性对照组对GCRV mRNA水平没有显著的影响(P>0.05)。
- 李兵范玉顶李艳秋徐进周勇曾令兵
- 关键词：草鱼呼肠孤病毒RNA干扰
- 一种可调节注射深度鱼用注射器
- 本实用新型属于水产养殖辅助器械技术领域，公开了一种可调节注射深度鱼用注射器，针筒组件与针头组件卡接，针头组件设置有针头，在针头部分标有刻度，针头上穿插有滑块；滑块右端开有螺纹孔，滑块通过螺纹与顶针旋接，且顶针与针头硬接触...
- 孟彦梁宏伟邹桂伟曾令兵
- 文献传递
- 鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF25B编码蛋白诱饵载体的构建及其互作蛋白的筛选
- 2021年
- 【目的】鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid herpesvirus 2,CyHV-2)感染养殖鲫引起的鲫造血器官坏死病,给鲫养殖业造成了重大的经济损失。揭示CyHV-2感染宿主细胞的机制,是建立鲫造血器官坏死病有效防治技术的重要基础。【方法】本研究针对CyHV-2富含抗原表位的ORF25B区域设计引物,扩增ORF25B基因截短序列。将扩增产物克隆至酵母双杂交诱饵载体pGBKT7,构建诱饵载体pGBKT7-tORF25B,转化至酵母菌株Y2HGold中。在营养缺陷型培养基上,验证诱饵表达载体pGBKT7-tORF25B对酵母菌Y2HGold自激活现象和毒性作用。利用酵母双杂交技术,将诱饵菌株pGBKT7-tORF25B/Y2HGold与鲫脑组织细胞系(GiCB)cDNA文库杂交。【结果】ORF25B基因截短序列扩增大小约为981 bp,成功构建了诱饵菌株pGBKT7-tORF25B/Y2H Gold,自激活和毒性验证结果表明,诱饵表达载体对酵母菌株无自激活现象,也无毒性作用,初步筛选出4种与tORF25B基因编码蛋白互作的宿主蛋白。【结论】本研究结果为深入开展CyHV-2 ORF25B编码蛋白功能及病毒入侵宿主细胞的机制研究奠定了重要基础。
- 聂细荣薛明洋林格李逸群范玉顶刘文枝孟彦江南曾令兵周勇
- 关键词：酵母双杂交诱饵载体
