李志萍
- 作品数：34 被引量：85H指数：5
- 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 犬瘟热病毒N蛋白的B细胞抗原表位预测被引量：4
- 2014年
- 将1段犬瘟热病毒N蛋白氨基酸序列（GenBank编号为：AEV77096．1）与GenBank登录的其他氨基酸序列进行比对，分析其同源性；通过DNAStar生物信息学分析软件中的Protean模块及The PredictProteinserver在线蛋白分析工具预测犬瘟热病毒N蛋白的理化性质、二级结构、亲水性、表面可及性、柔韧性、抗原指数、跨膜螺旋、蛋白相互作用位点、蛋白功能位点等特性，并预测其B细胞优势抗原表位。结果显示，犬瘟热病毒N蛋白具有规则的二级结构、亲水性、柔韧性片段多，多处于表面可及性大，抗原指数高，蛋白质相互作用位点区域。潜在的B细胞优势抗原表位为12～18、61～66、243～246、410～415、421～429、434～447、452～456、480～487氨基酸序列。结果表明，本试验预测了犬瘟热病毒N蛋白的B细胞优势抗原表位，为进一步设计犬瘟热病毒的诊断抗原多肽、免疫用抗原多肽和研发血清学检测试剂盒奠定了理论基础。
- 张海雷白换力薛慧亮李志萍苏红艳唐志文靳朝夏志平
- 关键词：犬瘟热病毒生物信息学B细胞抗原表位
- 一种猪血凝性脑脊髓炎细胞培养灭活疫苗及其制备方法
- 本发明提供一种猪血凝性脑脊髓炎细胞培养灭活疫苗，包含有抗原猪血凝性脑脊髓炎病毒(HEV-67N)和佐剂。本发明以PK-15细胞增殖HEV-67N，优化病毒的增殖条件，提高疫苗的质量和使用效果，制备的猪血凝性脑脊髓炎细胞培...
- 陈克研高丰贺文琦陆慧君宋德光高巍赵传博李志萍兰云刚臧德跃
- 狂犬病病毒G蛋白昆虫细胞表达及其生物信息学分析
- 2016年
- 利用RT-PCR方法从SRV9株细胞毒基因组RNA扩增G蛋白基因,然后将其克隆到p MD18-T载体上,将得到的重组克隆质粒SRV9G-p MD18T进行PCR和测序鉴定。结果表明:克隆的基因全长为1 609 bp,阅读框正确;将此SRV9株G基因亚克隆到供体质粒p Fast Bac Dual后获得了重组供体质粒SRV9G-p Fast Bac Dual;进而将重组供体质粒转化DH10Bac感受态细胞,经2次抗性、蓝白斑筛选及PCR分析后,获得重组穿梭质粒SRV9G-Bacmid;将其转染Sf9细胞48 h后,通过细胞形态学和重组杆状病毒负染电镜观察显示,杆状病毒转染成功;通过Western blot检测显示,Sf9细胞成功表达了SRV9 G蛋白。随后,利用Ex PASy服务器上的在线分析工具和生物信息学分析软件DNAStar对G蛋白的基本性质进行了分析。试验采用昆虫细胞Bac-toBac杆状病毒表达系统,成功表达出G蛋白,并对其进行了生物信息学分析,为蛋白纯化及狂犬病诊断试剂盒的进一步研制奠定了基础。
- 王园园董晓琳孙钰李志萍靳朝夏志平
- 关键词：杆状病毒表达系统生物信息学分析
- 一种以适配体为支架原位合成纳米银的SERS方法
- 本发明公开了一种以适配体为支架原位合成纳米银的SERS方法，是以适配体为支架在病原菌表面原位合成纳米银壳达到目标菌SERS信号特异性增强的方法，目的旨在特异性增强目标菌株的SERS信号，简化数据分析程序，通过拉曼光谱图直...
- 高玮村夏志平李乾学李志萍曲晗李博王习文
- 文献传递
- 基于表面增强拉曼技术快速检测5种食源性致病菌被引量：10
- 2017年
- 为快速检测布鲁氏菌S2株、鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌O157:H7和福氏志贺氏菌,利用表面增强拉曼(SERS)光谱技术,以原位包覆纳米银为基底,获得5种细菌的SERS谱。结果表明:在400~2 000 cm^(-1)光谱内,布鲁氏菌S2株有10处明显的拉曼谱峰,鼠伤寒沙门氏菌有9处明显的拉曼谱峰,金黄色葡萄球菌有5处明显的拉曼谱峰,大肠杆菌O157:H7有9处明显的拉曼谱峰,福氏志贺氏菌有7处明显的拉曼谱峰。5种食源性致病菌的拉曼谱峰位置以及强度区别明显。利用SERS技术可以实现在10 min内识别5种食源性致病菌,达到增强细菌拉曼信号、快速检测食源性致病菌的目的。
- 高玮村李博王习文李乾学李楠李志萍夏志平
- 关键词：表面增强拉曼食源性致病菌鼠伤寒沙门氏菌大肠杆菌O157:H7福氏志贺氏菌
- 日本乙型脑炎病毒小鼠脑内分布研究
- 2012年
- 为定位检测日本乙型脑炎病毒(JEV)在试验小鼠脑内分布情况,本研究建立了JEV的小鼠感染模型,取发病死亡小鼠的脑组织制作石蜡切片,利用抗JEV单克隆抗体,采用免疫酶组化方法对抗原进行组织学定位检测。试验结果表明,所建立的间接免疫酶组化方法灵敏度高,特异性好,证明了JEV选择性感染神经元,抗原阳性表达主要集中在脑干、神经节及大脑皮质。
- 马丽敏李琳张宁胡乐鹏李晔何叶任秀梅李志萍薛慧亮李丹靳朝夏志平
- 关键词：日本乙型脑炎病毒抗原分布
- 一种以含唾液酸胎球蛋白磁珠富集流感病毒的方法
- 本发明公开了一种以含唾液酸胎球蛋白磁珠富集流感病毒的方法，包括以下步骤：（1）用涡旋仪将羧基化磁性微球进行震荡分散；（2）用1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）,将羧基化磁...
- 夏志平张馨元李乾学李志萍
- 文献传递
- 猪血凝性脑脊髓炎病毒HE基因的克隆及原核表达被引量：2
- 2008年
- 目的构建猪血凝性脑脊髓炎病毒株(67N)血凝素酯酶蛋白(HE蛋白)原核表达系统,为建立特异性免疫学诊断方法提供备选材料。方法克隆猪血凝性脑脊髓炎病毒(67N)HE蛋白抗原表位富集区基因,构建重组表达质粒pET-HE,并在大肠杆菌中诱导表达。经包涵体的初步纯化,金属螯合层析进一步纯化HE蛋白,SDS-PAGE和Western blot进行检测。结果大肠杆菌可高效表达HE蛋白,目的蛋白表达量可占菌体总蛋白的42.2%。纯化后蛋白浓度为0.6 mg/ml,纯度为85.4%。所表达的蛋白可被兔抗猪血凝性脑脊髓炎阳性血清所识别。结论已成功构建猪血凝性脑脊髓炎病毒HE蛋白原核表达载体,重组HE蛋白抗原具有良好的特异性,可作为检测猪血凝性脑脊髓炎病毒血清抗体的候选抗原。
- 常灵竹宋德光贺文琦陆慧君李志萍陈克研高丰
- 关键词：猪血凝性脑脊髓炎病毒克隆原核表达
- 大雁新城疫病毒的分离鉴定被引量：2
- 2011年
- 在自由生活状态下的野生鸟类中,虽然NDV或血清抗体检测阳性的情况较为常见,但群体中ND暴发导致发病死亡的情况却罕有报道。而在人工饲养条件下,多种鸟类可以感染NDV并导致疾病发生。2009年11月吉林省某动物园水禽饲养园的大雁、鹳等突然死亡,发病急、病程短、无明显特征性症状,同群体其他种类的动物(如野鸭等)无发病情况。通过病毒分离、电镜形态观察、血清学鉴定和致病性试验等,对该病原进行了分离和鉴定,为最终成功预防控制该病提供理论基础。
- 张爽李丹李志萍李琳马丽敏栾维民夏志平
- 关键词：大雁新城疫病毒病理变化
- 猪血凝性脑脊髓炎的诊断及病理形态学观察
- 本实验对临床表现为明显呕吐、腹泻以及运动障碍的仔猪进行诊断,利用多重PCR和电镜负染的方法对仔猪脑组织研磨后的上清进行检测,并对各组织进行细菌学鉴定,结果仔猪确诊为单纯血凝性脑脊髓炎病毒感染。对仔猪剖检并观察,其病理变化...
- 李志萍
- 关键词：血凝性脑脊髓炎临床病例病理
- 文献传递
