李杰
- 作品数：22 被引量：64H指数：5
- 供职机构：湖南农业大学更多>>
- 发文基金：湖南省科技重大专项国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学文化科学更多>>
- 猪瘟病毒NS3基因克隆、原核表达及间接ELISA方法初步建立
- 采用PCR方法从猪瘟病毒兔化弱毒(Hog Cholera Lapinized Virus HCLV)疫苗株cDNA中扩增到长度为2000bp左右NS3基因序列,将其克隆进原核表达载体pET32a(+),构建重组原核表达载...
- 蒋大良余兴龙李润成葛猛颜爱李杰刘春红刘俊琦
- 关键词：基因克隆原核表达免疫印迹间接ELISA
- 文献传递
- 雏鸡白痢的综合防治措施
- 2010年
- 鸡白痢是由沙门氏菌引起鸡的一种较为常见的肠道传染病，是严重影响雏鸡成活率的因素之一，又是成鸡减产的不可忽视的隐患。目前．我国各种类型的养鸡场都有不同程度的发生。该病目前尚无有效的免疫预防方法，本病的控制必须采取综合措施，包括实施严格的检疫、淘汰阳性鸡、严格的种蛋消毒，以及采取敏感药物控制。但药物预防易产生抗药菌株，同时在鸡肉产品中造成药物残留，宜选用中草药来进行防治。笔者临床中就某养殖场雏鸡发生鸡白痢进行病因分析，提出防治措施。
- 胡辉李杰罗小波胡艳
- 关键词：雏鸡白痢药物控制肠道传染病雏鸡成活率沙门氏菌种蛋消毒
- 猪瘟病毒NS3基因克隆、原核表达及间接ELISA方法初步建立被引量：11
- 2010年
- 采用PCR方法从携带猪瘟病毒兔化弱毒(Hog cholera lapinized virus,HCLV)全长基因组cDNA的质粒pPOHCLV中扩增到长度为2000bp左右NS3基因序列,并将其克隆至原核表达载体pET-32a(+),构建成重组原核表达载体pETNS3。将pETNS3在大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行优化表达,SDS-PAGE分析重组蛋白NS3主要以包涵体形式表达,分子大小约95kD。Western Blotting分析表明重组蛋白NS3具有免疫原性。采用Ni+亲和层析方法纯化得到重组蛋白NS3(90%)。以纯化的重组蛋白NS3为抗原初步建立了检测CSFVNS3抗体的间接ELISA方法,检测221份不同猪群和年龄猪的血清样品。检测结果与IDEXX公司CSFV-Ab检测试剂盒检测结果进行对比,阳性符合率为83.33%,阴性符合率为89.38%,总符合率为86.43%。30份存在差异的血清样品用间接免疫荧光法(Indirect immunofluorescence assay,IFA)进行检测,结果显示IFA检测结果与NS3间接ELISA和IDEXX公司CSFV-Ab检测试剂盒符合率分别为56.67%和43.33%。
- 蒋大良余兴龙李润成葛猛罗维颜爱李杰刘春红涂长春
- 关键词：CSFNS3基因克隆原核表达IFA
- 猪INSIG2、GPR40基因的多态性及其与肉质性状的相关分析
- 本研究利用7个猪品种(组合),两个外来品种杜洛克、大白猪,四个中国地方品种沙子岭猪、五指山猪、大围子猪、桃源黑猪,还有杜长大商品猪共401头猪为实验材料,研究了胰岛素诱导基因2(INSIG2)和游离脂肪酸受体1基因(GP...
- 李杰
- 关键词：肉质性状
- 文献传递
- 博落回生物碱对猪肠上皮细胞增殖作用及胃泌素表达的影响研究
- 本论文通过体外细胞培养实验,探讨了博落回生物碱对肠上皮细胞IPEC-1增殖作用及胃泌素表达的影响。首先,博落回生物碱对肠上皮细胞增殖试验旨在研究博落回中血根碱、白屈菜红碱、原阿片碱和别隐品碱在不同浓度、不同时间段对猪肠上...
- 李杰
- 关键词：增殖胃泌素
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型Rep蛋白ELISA抗体检测方法的建立被引量：3
- 2012年
- 为建立一种快速检测猪圆环病毒2型(PCV2)抗体的方法,本研究通过基因合成PCV2的Rep编码序列,将其克隆至pET-28a(+)并在E.coli中表达,表达的重组Rep蛋白经Ni2+亲和纯化。采用纯化的目的蛋白作为包被抗原,建立检测PCV2 Rep蛋白抗体的间接ELISA方法。结果表明最佳抗原包被浓度为200 ng/孔,血清和二抗最佳反应时间分别为1 h和30 min。该方法具有良好的特异性和敏感性,与韩国金诺公司试剂盒的符合率为81.4%,表明建立的ELISA方法可以用于PCV2的流行病学检测。
- 李杰葛猛罗维舒晓亮蒋大良李润成李波刘国华余兴龙
- 关键词：猪圆环病毒REP蛋白间接ELISA
- 桃江病圃稻瘟病菌生理小种鉴定及含不同抗性基因品系的抗瘟性评价
- 水稻是我国最重要的粮食作物,稻瘟病是水稻生产上最具毁灭性的病害,选育与利用抗病品种是防治稻瘟病最经济安全有效的措施,而抗瘟性鉴定评价是开展抗病品种选育与合理利用研究的基础。迄今为止,在稻瘟病选择压力大、病菌群体遗传组成丰...
- 李杰
- 关键词：稻瘟病生理小种基因聚合
- 快速鉴定猪肉和牛肉多重PCR方法的建立及初步应用被引量：9
- 2011年
- 建立了快速有效地鉴定猪肉和牛肉的多重PCR方法。根据GenBankTM登陆的猪和牛的线粒体基因序列设计特异性引物,通过PCR条件优化建立起多重PCR方法,并评价该方法的敏感性和特异性。结果表明,该多重PCR方法能特异性扩增到目的大小的牛和猪线粒体基因片段;该方法不能扩增羊、鸡、狗等8种常见动物线粒体基因组片段;该方法最低能检测到牛DNA9.8×101fg/μ L和猪DNA6.7×101fg/μ L;能检测出市场上猪肉和牛肉商品中的假冒产品。该方法具有高度的特异性和敏感性,能够快速鉴别检测猪肉和牛肉商品。
- 李杰乔绪稳余兴龙李润成肖朝庭刘国华蒋大良
- 关键词：多重PCR牛肉猪肉
- 孢子型乳酸菌对常用抗生素耐药性及最低抑菌浓度测定被引量：1
- 2012年
- 利用MRS选择性培养基,从商业产品倍健素中分离出其主要成分孢子型乳酸菌。通过药敏纸片法测定其在体外对临床常用抗生素的敏感性及对饲料常用添加抗生素的MIC值,以指导临床用药及饲料药物添加,同时进行质粒抽提研究。结果表明,该菌株对于多种临床常用抗生素较为敏感,致使这些抗生素与该产品不能同时使用,大大降低了临床抗生素的使用范围。但质粒抽提结果表明,该菌株不含有任何耐药性质粒,即该菌株用于益生保健产品的开发,具有分子生物学参考意义。
- 曾卫军李杰
- 关键词：药敏试验质粒
- 基于猪圆环病毒Rep和Cap蛋白ELISA方法的建立及其应用
- 本研究的主要目的是通过建立PCV2-Rep蛋白间接ELISA方法,与本实验室已建立的PCV2-Cap蛋白间接ELISA方法结合使用,对猪群中抗PCV2-Rep蛋白和抗PCV2-Cap蛋白抗体进行检测,从而描述猪群中PCV...
- 李杰
- 关键词：PCVREP蛋白CAP蛋白间接ELISA
- 文献传递
