杨思源 作品数:3 被引量:21 H指数:1 供职机构: 西南交通大学生命科学与工程学院 更多>> 发文基金: 四川省科技支撑计划 国家自然科学基金 中央高校基本科研业务费专项资金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
猪链球菌铁元素吸收及其机理研究进展 被引量:1 2014年 铁是生物体生命活动所必需的金属营养元素,几乎所有病原菌感染过程都需要铁,病原菌与宿主之间对铁元素的争夺是感染性疾病发生与发展的核心。干扰和阻断病原菌金属离子吸收转运与调节,有望成为筛选抗菌药物的新靶点,与之相关的一些蛋白被认为是重要的疫苗候选分子。生物信息分析显示猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)菌株存在4个与铁吸收相关操纵子;链球菌金属离子吸收相关的金属离子绑定蛋白和调节蛋白为猪链球菌重要毒力因子和预防性疫苗候选分子。 黎明 马超 李学如 杨思源关键词:猪链球菌 铁吸收 疫苗 化脓性链球菌溶血素O活性结构重组蛋白的制备 2016年 生物信息分析化脓性链球菌溶血素O(streptolysin O,Slo)蛋白结构表明,Slo蛋白除含有由461氨基酸残基组成的溶血活性结构域Thiol_cytolysin外,在N端还有一跨膜结构域。利用pET101-GENE蛋白表达系统,成功构建出表达具有Slo活性重组蛋白的重组子,采用镍柱亲和层析分离技术,纯化目的蛋白;纯化蛋白SDS-PAGE检测分析表明,重组蛋白与预测的溶血活性结构域的分子量相一致;溶血实验显示,纯化重组蛋白具有溶血活性。以纯化的重组蛋白为免疫原,对大鼠进行4次免疫,所获得免疫血清经Elisa检测,抗Slo血清效价达到1∶12 800;Western blot检测猪链球菌、马链球菌和化脓性链球菌中的链球菌溶血素结果显示,抗Slo多克隆抗体仅能与化脓性链球菌溶血素O发生反应,表明研究制备的化脓性链球菌溶血素O活性结构重组蛋白抗原具有较好的特异性,所制备的抗原Slo可用于进一步开发抗链球菌溶血素O(ASO)试剂盒。 杨思源 潘敬梅 王硕 邓开轩 邓强 黄新河 李学如关键词:化脓性链球菌 多克隆抗体 山楂、泽泻、决明子与红曲霉混合发酵制备调血脂中药工艺研究 被引量:20 2016年 目的以药食两用调血脂中药山楂Crataqgi Fructus、泽泻Alismatis Rhizoma和决明子Cassiae Semen等为培养基组分,以实验室筛选的产洛伐他汀(Lovastatin)的红曲霉Monascus purpureus为菌种,对制备既含有传统中药降脂成分又含有他汀类降脂药物的天然降脂中药的固态发酵工艺进行探索与研究。方法通过单因素试验和正交试验优化固态发酵工艺,用TLC和HPLC分析方法对发酵产物有效成分进行定性和定量分析。结果实验获得的混合发酵制备调血脂中药优化工艺条件为500 mL三角瓶装量100 g固态培养基,接种培养48 h的液态种子10 mL,30℃恒温培养2 d后,打散培养基,第3天加入培养基干基质24%的无菌水,5 d后温度降至25℃继续培养至18 d,洛伐他汀产量可达5.127 mg/g,较优化前提高124.8%。TLC和HPLC分析结果显示:与大米红曲比较,获得中药红曲发酵产物含有更多有效成分,洛伐他汀产量提高42.27%,但γ-氨基丁酸产量下降17.89%;与未发酵基质比较,中药发酵产物中中药的有效成分熊果酸、2,3-乙酰泽泻醇-B、大黄酚和大黄素甲醚分别提高了232.7%、173.7%、767.6%和888.4%。结论山楂、泽泻和决明子经红曲霉菌固态发酵后,除能显著提高调血脂有效成分的量外,还能提高中药有效成分的量,获得的调血脂中药发酵工艺具有一定的实际应用价值。 杨静云 赖永勤 李宇兴 杨思源 李学如 黄新河关键词:山楂 泽泻 决明子 红曲霉 降脂中药 大黄素甲醚