- 维拉帕米耐药性人白血病细胞亚系的建立及其耐药机制的研究
- 1999年
- 为探讨人白血病细胞对耐药逆转维拉帕米的耐药机制,我们通过不断提高培养液中维拉帕米浓度建立维拉帕米耐药性K562亚系(K562/VER),采用MTT法测定维拉帕米、潘生丁和环孢素A对K562、K562/VER细胞的毒性或耐药性;采用高效液相色谱仪、荧光检测器检测细胞内维拉帕米聚集量;采用S—P免疫细胞化学技术检测P—糖蛋白(PgP)、GST、癌基因蛋白和抑癌基因蛋白的表达。结果显示:K562/VER细胞对VER的耐药程度是K562细胞的104倍,并对潘生丁和环孢素A存在交叉耐药性;K562/VER细胞内VER聚集量比K562细胞下降35~43倍,二者均中度或高度表达P53、P16、c—fos蛋白,低度表达P21蛋白;K562/VER细胞高度表达PgP,Bcl-2只在K562细胞中表达。说明K562细胞系能产生对VER的获得性耐药性,其耐药机制可能与PgP表达过量,并由此导致细胞内VER聚集下降等因素有关。
- 谢佐福林贤东周冬梅林声
- 关键词:白血病维拉帕米耐药性基因表达
- 恶性肿瘤患者血清sAPO-1/Fas和血清总MMP-9水平的临床意义被引量:5
- 2004年
- 谢佐福卢林周冬梅林声
- 关键词:恶性肿瘤FASMMP-9癌症
- 维拉帕米耐药性人白血病细胞亚系的建立及其耐药机制研究
- 谢佐福周冬梅林贤东林声
- K562细胞和K562/ADM细胞通过剂量递增体外持续诱导获得了对维拉帕米的耐药性和对其它耐药逆转剂潘生丁和环孢素A的交叉耐药性。通过高效液相、荧光分光光度计和免疫细胞化学技术分别测定细胞内VER、ADM含量以及七种癌基...
- 关键词:
- 关键词:维拉帕米耐药性白血病细胞亚系耐药机制耐药逆转剂
- 肺癌患者血清VEGF及其它肿瘤标志物检测及其临床意义被引量:3
- 2002年
- 目的 :探讨血清 VEGF检测在肺癌临床上的应用价值。方法 :采用抗人 VEGF单克隆抗体、夹心 EL ISA法检测 6 3例肺部恶性肿瘤患者血清 VEGF。结果 :不论是原发性肺癌还是转移性肺癌 ,其血清 VEGF、TPA水平与健康对照组比较 ,差异具有显著性 (P<0 .0 1)。原发性肺癌有转移组血清 VEGF和 TPA水平显著高于无转移组 (P<0 .0 1)进展期肺癌血清 VEGF水平显著高于 CR组、PR组和死亡组 (P<0 .0 5 )。血清 VEGF水平在患者不同年龄、不同性别、不同临床分期之间无显著差异。结果还显示 ,肺癌血清 VEGF水平与 CEA水平之间存在显著的正相关 (P<0 .0 5 ) ,但 TPA、NSE、CA2 4 2之间无显著相关性 (P>0 .0 5 )。结论 :血清 VEGF可作为肺癌转移、治疗反应性的一个良好指标 ,如与 TPA合用 ,效果更好。
- 谢佐福吴允昆林贤东周冬梅林声
- 关键词:肺癌肿瘤标志物血清VEGF治疗反应性
- 肺部恶性肿瘤患者血清总MMP-9检测及其临床意义被引量:3
- 2002年
- 目的 探讨检测血清总MMP 9在肺部恶性肿瘤中的临床应用价值。方法 采用抗人总MMP 9的单克隆抗体和夹心ELISA法检测 6 3例肺癌患者血清总MMP 9。结果 肺部恶性肿瘤患者血清总MMP 9为 ( 92 .2± 74.39) μg/L ,显著高于健康对照组 ( 9.5± 6 .74) μg/L(P <0 .0 5 )。伴淋巴结转移组患者血清总MMP 9水平显著高于无淋巴结转移组 (P <0 .0 5 )。进展组 (PD)和死亡组血清总MMP 9水平显著高于完全缓解组 (CR)和部分缓解组 (PR) (P <0 .0 5 )。肺部恶性肿瘤患者血清总MMP 9水平与血清CA2 42水平存在显著的负相关 (P =0 .0 2 1)。结论 血清MMP
- 谢佐福吴允昆周冬梅林贤东林声
- 关键词:肺肿瘤治疗反应性血清MMP-9肿瘤标志物
- FasL抗体对人白血病细胞株(K562/ADM)多柔比星耐药性的逆转作用被引量:3
- 2003年
- 目的 :探讨FasL抗体对K5 6 2 /ADM细胞的多柔比星 (阿霉素 )耐药性的逆转作用及其可能机制。方法 :以K5 6 2 /ADM细胞为研究对象 ,设立了对照组、VER处理组、anti FasL处理组及anti FasL +VER处理组 ,进行MTT、FCM、TUNEL、S P免疫组化及RT PCR检测。结果 :anti FasL或VER处理能增强K5 6 2 /ADM细胞对ADM的敏感性 ,其ID50 分为 2 0 0ng/ml、6 μg/ml;从细胞周期分析曲线可见上述各组细胞凋亡DNA含量呈逐渐上升趋势(分为 7 4 2 %、32 10 %、4 9 2 9%、5 6 2 6 % ) ,TUNEL染色结果亦然 (原位凋亡率分为 4 5 %、36 %、4 5 %、5 8% ) ;anti FasL可影响各组细胞FasL及bcl 2的表达 ,但不影响Pgp的表达。 结论 :采用anti FasL封闭肿瘤细胞FasL表达可逆转K5 6 2 /ADM细胞的耐药性 ,并与VER处理有协同作用 ,它可能为一种新型的肿瘤耐药逆转疗法。
- 郑天荣周冬梅谢佐福卢林林声
- 关键词:耐药逆转白血病细胞株
- SGC-_(GM-CSF)转基因克隆株的生物学特性鉴定
- 2003年
- 目的 以基因枪为介导建立 GM- CSF基因转染的肿瘤细胞株 ,为 GM- CSF应用于肿瘤基因治疗奠定实验基础。方法 采用基因枪介导的方法 ,将真核表达质粒 ( pc DNA3.1GM- CSF)导入人胃癌细胞株 ( SGC) ,经 G4 1 8筛选 ,获得五株阳性克隆 ( SGC- GM- CSF - 1~ 5)。运用 RT- PCR、EL ISA、MTT法和半固体琼脂培养法鉴定 SGC- GM- CSF生物学特性。结果 SGC- GM- CSF细胞的形态、体外增殖能力及克隆形成能力与 SGC无显著性差异。 GM- CSF基因已整合到胃癌细胞的染色体中并得以有效表达。细胞上清液 EL ISA分析表明 ,SGC- GM- CSF表达量平均水平达到 2 4 7ng/10 6每 2 4小时。对照组 ( SGC- neo)和 SGC均未检测到 GM- CSF。SGC- GM- CSF- 3在长达 12 0天体外培养中 ,能保持稳定分泌 GM- CSF,经 GM- CSF依赖株 TF- 1细胞检测 ,具有生物学活性。结论 获得的转基因肿瘤克隆株能稳定表达GM- CSF,为 GM-
- 林贤东谢佐福周冬梅吴允昆林声
- 关键词:转基因克隆株生物学特性肿瘤细胞
- 维拉帕米耐药性人白血病细胞亚系的建立极其耐药机制研究
- 谢佐福周冬梅林贤东林声
- 该课题组建立维拉帕米耐药性K562(K562/VER)细胞系和阿霉素耐药性人白血病细胞系维拉帕米耐药性亚系(K562/ADM/VER)。采用MTT法测定细胞对维拉帕米的耐药性以及对潘生丁和环孢素A的交叉耐药性。并建立了一...
- 关键词:
- 关键词:耐药机制研究
- 脐血浆体外对肿瘤细胞的生长及端粒酶活性的影响
- 2002年
- 目的 探讨脐血浆对 K5 6 2、SMC细胞的生长及端粒酶活性的影响。方法 采用 MTT法检测脐血浆对 K5 6 2、SMC细胞生长的影响 ;采用 PCR- EL ISA检测脐血浆及 AFP对 K5 6 2、SMC细胞端粒酶活性的影响。结果 脐血浆对 K5 6 2、 SMC细胞有促生长作用 ,脐血浆及 AFP能增强 K5 6 2、 SMC细胞的端粒酶活性。结论 脐血浆能促进 K5 6 2、 SMC细胞的生长及增强这两种细胞的端粒酶活性 ,脐血浆对 K5 6 2、 SMC细胞的促生长作用可能与
- 周冬梅谢佐福吴允昆林声林贤东
- 关键词:脐血浆端粒酶活性肿瘤生长肿瘤细胞株
- 用基因芯片研究尼古丁对肺腺癌细胞凋亡基因表达的影响被引量:5
- 2007年
- 目的:探讨尼古丁对人肺癌细胞生长的影响及其机制。方法:采用MTT法分析尼古丁处理人肺腺癌细胞SPC-A后生长变化;采用基因芯片技术检测尼古丁处理SPC-A-1细胞前后,细胞凋亡相关基因表达的变化。结果:尼古丁对SPC-A细胞的生长具有显著的促进作用,但随着尼古丁浓度的增大,促进作用也下降。100μg/L尼古丁处理后,SPC-A-1细胞451个凋亡相关基因中有显著变化的基因有80个,其中,促进凋亡相关基因上调的有29个,下调的有13个;抑制凋亡相关基因上调的有26个,下调的有12个。结论:尼古丁能促进人肺腺癌细胞生长,调节许多凋亡相关基因表达。
- 谢佐福郑天荣卢林袁丁周冬梅林声
- 关键词:尼古丁细胞凋亡肺肿瘤