柴荣耀
- 作品数：147 被引量：774H指数：17
- 供职机构：浙江省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金浙江省公益性技术应用研究计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学自动化与计算机技术理学更多>>
- 利用抑制差减杂交筛选稻瘟菌继代接种菌株差异表达基因被引量：2
- 2012年
- 稻瘟菌是重要的水稻病原微生物,通过各种变异机制提高自身对水稻的致病力。通过继代接种可使稻瘟菌发生适应性变异,从而增强致病力。为了解相关适应性变异的分子机制,利用稻瘟菌原始菌株与在水稻上继代接种的第四代菌株构建了抑制消减杂交文库。经过PCR验证及测序分析,共计获得168条EST非冗余序列。拼接后,Unigene的数量为110个。利用不同数据库,进行BLASTX分析,获得了与这些序列推测蛋白相似的功能蛋白,分析蛋白功能注释表明这些蛋白主要与合成和信号传导相关。GO分析表明相关蛋白涉及生命活动的多个方面,但主要集中于细胞生长发育、核酸结合及外界刺激的感知及传导。
- 姜华苏志杰张震王艳丽王教瑜柴荣耀邱海萍毛雪琴杜新法孙国昌
- 关键词：稻瘟菌抑制消减杂交表达序列标签
- 变色稻谷寄藏的真菌种类及其致病性研究被引量：19
- 1991年
- 1987～1988年我们从全国17个省市采集的220份变色稻谷样品中,共分离得真菌21属,其中以交链孢属(Alternaria sp.)、弯孢霉属(Curvularia sp)、镰刀菌属(Fusarium sp.)及青霉属(Penicillium sp)的检出频率高,分布地区广,为优势真菌。我国各稻区变色稻谷上的真菌种类大致相同,但检出率有所不同。由变色稻谷分离的19种主要真菌,于水稻开花期进行人工喷雾接种,均能产生大量的变色稻谷,但发病程度和表现症状,因真菌种类不同而有一定差异。
- 柴荣耀金敏忠张庆生
- 关键词：水稻寄藏真菌
- 一种林间除草设备
- 本实用新型公开了一种林间除草设备，包括除草机体，所述除草机体的底部固定连接有防护罩，所述防护罩的底部设置有刀盘，所述刀盘的顶部固定连接有连接杆，所述连接杆的顶端贯穿防护罩并延伸至防护罩的顶部，所述连接杆的表面固定安装有位...
- 邱海萍郝中娜张震柴荣耀王教瑜王艳丽孙国昌
- 利用荧光蛋白标记研究稻瘟病菌有性世代的细胞结构被引量：9
- 2018年
- 稻瘟病是水稻最重要的病害之一,同时稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)是植物病原真菌研究的模式生物。稻瘟病菌是异宗配合的子囊菌,但其有性世代的细胞学过程、形态结构、分子机制以及对病菌变异的贡献研究都较少,也缺乏必要的研究手段。该文利用荧光蛋白标记结合荧光染色的方法对稻瘟病菌有性世代结构进行了标记和显微观察,以期为稻瘟病菌有性生殖过程和机制研究提供方法与借鉴。将绿色荧光蛋白GFP和红色荧光蛋白m Cherry分别导入两个相对交配型的稻瘟病菌菌株Guy11(MAT1-2)和70-15(MAT1-1),各转化子及野生型按交配型组合对峙培养,观察有性世代结构中的荧光表达情况。结果表明,组蛋白H3启动子、核糖体蛋白RP27启动子和疏水蛋白MPG1启动子均可在稻瘟病菌有性孢子形成过程中高丰度表达。进一步利用这三种启动子和两种荧光蛋白对稻瘟病菌有性孢子的细胞器(细胞核、过氧化物酶体)进行标记和观察,结果表明,融合组蛋白H2B的m Cherry及融合核定位信号(NLS)的GFP均能有效标记子囊孢子细胞的细胞核,荧光集中而明亮;带有过氧化物酶体定位信号1(PTS1)的GFP可以有效地标记子囊孢子中的过氧化物酶体,每个细胞中均有数量不等的过氧化物酶体,表明子囊孢子中需要过氧化物酶体参与生化代谢。该文还利用脂肪染色剂尼罗红、BODIPY和细胞壁染色剂卡氏白结合荧光蛋白标记对子囊和子囊孢子进行组合染色。结果显示,尼罗红、BODIPY、卡氏白染色剂互不干扰,可以与不同颜色的荧光蛋白相互组合,从而更加清晰地标记子囊和子囊孢子的结构、细胞器和储藏物质。
- 郭晓宇李玲董波王教瑜柴荣耀张震毛雪琴邱海萍郝中娜王艳丽孙国昌
- 关键词：稻瘟病菌有性世代荧光蛋白BODIPY
- 基于直接正交信号校正的水稻冠层叶瘟光谱诊断被引量：16
- 2010年
- 采用直接正交信号校正-连续投影算法(DOSC-SPA)联用的组合处理方法,实现了应用可见/近红外光谱技术对水稻冠层叶瘟病的快速准确诊断。采集水稻冠层样本共120个,其中健康和染病样本各60个。用DOSC-SPA方法,对水稻冠层光谱数据进行直接正交化处理,然后通过连续投影算法提取有效波长(EW),建立了有效波长(775 nm)与叶瘟诊断判别的直接线性方程:Y=5.283X。应用该方程对预测集样本进行诊断判别,其判别准确率为95.0%,获得了满意的判别精度。结果表明,DOSC-SPA组合处理方法提取水稻冠层叶瘟诊断的特征波长是非常有效的,并且通过直接线性方程能获得满意的判别精度,为后续水稻大田叶瘟病情监测、喷药处理及相应病情监测仪器的开发提供了方法和依据。
- 刘飞冯雷柴荣耀孙光明楼兵干孙测何勇
- 关键词：连续投影算法偏最小二乘法水稻
- 一种防治稻瘟病菌的siRNA核酸农药
- 本发明涉及生物技术领域，主要涉及一种防治稻瘟病菌的siRNA核酸农药。本发明以稻瘟病菌的VAD1基因为靶标设计siRNA分子，分别筛选出了抑制稻瘟病菌附着胞产生、减弱稻瘟病菌致病性的siRNA分子。所筛选的siVAD1‑...
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- 马唐致病菌株Mds0404的生物学特性被引量：6
- 2008年
- 研究了影响马唐生防菌弯孢霉Mds0404菌株营养生长、孢子萌发及孢子形成的因子。结果表明，该菌在PSA培养基上生长最好，在PDA培养基上产孢最多；在10～40℃均可生长，最适生长温度为25～32℃；在20～32℃均可产孢，最适产孢温度为25～28℃；pH为5时生长最快，pH为8时产孢量最大；在以蔗糖为碳源、硝酸钾为氮源的Czapek培养基上生长与产孢均较好；加膜25cm紫光灯12h间隔光照产孢最丰富。分生孢子萌发的温度为10～40℃，最适为25～40℃，失活温度为55℃。黑暗有利于孢子的萌发。16min近距离紫外光照射萌发率仍保持在50％以上。
- 邱海萍柴荣耀张震毛雪琴孙国昌杜新法
- 关键词：马唐生物除草剂生物学特性
- GUS为负标记的稻瘟病菌目标基因替换突变体双筛选体系(英文)被引量：3
- 2009年
- 目标基因替换是基因功能研究的重要方法,在生物工程领域广泛应用。为了提高真菌目标基因替换的效率,以稻瘟病菌为研究对象,建立了一种以gusA基因为负筛选标记的目标基因替换突变体双筛选体系(GUS-DS)。首先,检测了78个真菌菌株的内源GUS活性,发现除3个菌株外均呈阴性。同时,将gusA基因导入稻瘟病菌、镰刀病菌、炭疽病菌后,转化子可获得高的GUS活性。表明gusA可用作真菌中的筛选标记。然后,以gusA为负标记,HPH为正标记,以过氧化物酶体定位信号受体基因MGPEX5与MGPEX7的替换为例,建立稻瘟病菌GUS-DS体系。对潮霉素抗性筛选获得的转化子通过GUS活性检测进一步筛选,呈阴性者为可能突变体。通过PCR与Southern杂交对可能突变体进行验证,以此评估GUS-DS的筛选效率。结果表明GUS-DS将Δmgpex5与Δmgpex7的筛选效率由原来的65.8%和31.2%分别提高到90.6%和82.8%。另外,还建立了一种适合于GUS-DS的多重PCR法(M-PCR)用于突变体的验证。通过扩增目标位点的不同区段,可以有效区分突变体、野生型和随机插入转化子。M-PCR法验证突变体简便、迅速,可信度与Southern杂交相同。GUS-DS及M-PCR为功能基因组学及生物工程的研究提供了有力的工具。
- 王教瑜张震杜新法柴荣耀毛雪琴邱海萍王艳丽孙国昌
- 关键词：GUS活性
- 利用荧光蛋白标记西瓜枯萎病菌的过氧化物酶体及细胞核被引量：2
- 2020年
- 西瓜枯萎病是一种世界范围的西瓜毁灭性病害,其病原菌为尖孢镰刀菌西瓜专化型(Fusarium oxysporum f.sp.niveum,FON)。研究病原菌生长发育和侵染的机制是解决病害的根本途径。利用荧光蛋白对细胞或细胞器进行标记,是病原菌研究中的重要方法。该研究利用绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白对FON的细胞核和过氧化物酶体进行了荧光标记。通过农杆菌介导转化(Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation,AtMT),该文将3种不同的荧光定位载体分别导入FON,获得了细胞核红色荧光标记的转化子(潮霉素抗性,含mCherry-H2B融合蛋白),以及过氧化物酶体绿色(潮霉素抗性,含GFP-PTS1融合蛋白)和红色(潮霉素抗性,含DsRED-PTS1融合蛋白)荧光标记的转化子各1种。在标记细胞核的菌株中,菌丝、孢子都可见明亮、圆形的红色荧光点,荧光点与DAPI染色标记的细胞核区域完全重合。在过氧化物酶体标记的菌株中,菌丝、孢子中可见明亮的红色或绿色荧光成小点状分布,符合过氧化物酶体的分布特征,而且在脂类物质诱导的条件下,荧光点的数量明显增加。此外,该文还利用细胞壁荧光染色剂卡氏白对3种荧光蛋白标记菌株进行染色。结果显示,卡氏白染色产生的蓝色荧光与红、绿荧光蛋白的荧光在FON中互不干扰。转化子继代培养和初步分析表明,其表型与野生型无差异,菌株继代后荧光表达稳定、定位明显。该结果为进一步研究FON细胞器动态、生长发育与致病分子机制提供了方法和工具。
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- 关键词：西瓜枯萎病菌GFPMCHERRYDSRED荧光标记
- 7种药剂防治梨轮纹病、黑星病和黑斑病的效果被引量：3
- 2016年
- 用40%福星乳油、10%世高水分散粒剂、25%阿米西达悬浮剂、50%翠贝干悬浮剂、325 g·L-1阿米妙收悬浮剂、70%甲基托布津可湿性粉剂和50%多菌灵可湿性粉剂7种药剂进行防治梨轮纹病、梨黑星病、梨黑斑病的田间试验。结果表明,前5种药剂对梨轮纹病的果防效为89.3%-95.5%;对梨黑星病的叶防效为93.2%-98.4%,果防效为89.2%-96.1%;对梨黑斑病的叶防效为89.8%-96.5%,果防效为92.9%-95.1%,均优于常规药剂70%甲基托布津可湿性粉剂和50%多菌灵可湿性粉剂,尤以325 g·L-1阿米妙收悬浮剂、10%福星水分散粒剂为佳。
- 叶长飞温莉娜林永红阙祖尚吴丽萍柴荣耀
- 关键词：药剂梨轮纹病梨黑星病梨黑斑病
