目的:探讨氧化铁磁性纳米颗粒介导野生型p53基因(wild type p53,wt-p53)对耐顺铂人肺腺癌细胞A549/DDP增殖抑制和凋亡诱导的作用。方法:氧化铁磁性纳米颗粒介导wt-p53转染肺腺癌细胞A549/DDP作为实验组,以纳米颗粒介导空载体pcDNA3转染作为阴性对照组,脂质体介导wt-p53转染作阳性对照组。MTT法和绘制生长曲线观察基因转染对A549/DDP细胞增殖抑制作用,荧光显微镜、流式细胞术观察其对A549/DDP细胞诱导凋亡作用,RT-PCR检测其对A549/DDP细胞Bax mRNA表达的影响。结果:氧化铁磁性纳米颗粒介导wt-p53对人肺腺癌细胞A549/DDP增殖有持续的抑制作用,而以脂质体介导wt-p53对增殖抑制作用持续时间短暂;纳米颗粒介导wt-p53对人肺腺癌细胞A549/DDP诱导凋亡作用明显强于以脂质体载体;同时介导wt-p53上调Bax mRNA表达水平的作用也明显强于以脂质体载体。结论:氧化铁磁性纳米颗粒介导wt-p53转染对人肺腺癌细胞A549/DDP有持续的增殖抑制和诱导凋亡的作用。
目的：体外评价表面修饰多聚赖氨酸的氧化铁磁性纳米颗粒作为野生型p53基因载体并转染肺癌细胞的可行性。方法：以碱沉淀法制成外包葡聚糖的氧化铁磁性生物纳米颗粒（dextran coated iron oxide nanoparticles，DCIONP），在其表面修饰多聚赖氨酸制成多聚赖氨酸-氧化铁纳米颗粒（dextran coated iron oxide nanoparticles modified with poly L-lysine．pll-DCIONP）。扫描电镜观察其形态特征，用激光粒度检测仪测定其粒度分布和Zeta表面电位；分光光度计及琼脂糖凝胶电泳分析pll-DCIONP与野生型P53基因的结合力及其复合物抵抗DNase-I和血清消化的能力；pll-DCIONP作为野生型p53基因载体转染人肺腺癌细胞A549／CDDP，RT—PCR以及Western印迹法分析细胞内p53基因的表达。结果：pll—DCIONP的直径在60～80nm之间，Zeta电位为＋19．6mV；pll-DCIONP无论在酸性、中性及碱性的条件下，均可与野生型P53基因结合，二者质量比为1：1时结合力最强；pll—DCIONP／wt—p53复合物能抵抗DNase—I和血清对野生型P53基因的消化作用；以pll—DCIONP作为野生型P53基因载体转染人肺腺癌细胞，随着时间延长，细胞内P53基因含量持续增高，而以脂质体作为转染载体时随着时间延长细胞内P53基因含量递减。结论：pll-DCIONP可作为野生型P53基因理想的转染载体，并能持续高效地将外源性P53基因转染入肺癌细胞中。
