洪文艳
- 作品数：49 被引量：82H指数：5
- 供职机构：广州军区疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家科技重大专项广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 登革2型病毒特异性抗原片段的筛选及验证
- 2012年
- 目的筛选、鉴定登革2型病毒特异性抗原,为进一步研究其生物学功能奠定基础,并利用纯化抗原建立检测登革2型病毒抗体的ELISA方法。方法分别利用DNAStar及ANTHEPROT软件对登革病毒1-4型、流行性乙型脑炎及黄热病毒M、E蛋白进行分析,分析登革2型病毒型特异性抗原表位,并参考GenBank中的序列信息进行比对,分析其在不同登革2型病毒株中的保守性。然后选择预测得分值较高的表位,利用pET32a原核表达系统进行原核表达,Western blotting验证其免疫学反应特异性,特异性片段经亲和层析纯化后,包被ELISA微孔板,并对ELISA反应条件进行系统优化。结果经系统的生物信息学分析,初步预测获得登革2型病毒特异性抗原表位8个,并对其中得分值较高的6段进行了高效表达,经Western blotting分析,获得登革2型病毒特异性抗原片段1段。经纯化后作为检测用抗原,建立了检测登革2型病毒抗体的ELISA方法。初步应用表明,所建立方法具备良好的特异性,可检测1～200倍稀释的患者血清,S/N比值均在10以上。结论获得登革2型病毒特异性抗原片段1段,并建立检测登革2型病毒抗体的ELISA方法。
- 任瑞文唐博恒张培胡文龙洪文艳刘建伟
- 关键词：登革2型病毒抗原表位原核表达ELISA
- 微孔杂交快速检测黄热病及乙型脑炎病毒方法的建立被引量：6
- 2004年
- 任瑞文方美玉洪文艳刘建伟田小东程刚锋林立辉
- 关键词：乙脑病毒黄热病病毒流行性乙型脑炎病毒PCR-ELISA
- 大青叶提取物抗登革病毒Ⅱ型的体外实验研究被引量：4
- 2010年
- 为检测大青叶提取物体外抗登革病毒Ⅱ型(DENV-Ⅱ)的作用。本实验以白纹伊蚊C6/36细胞为宿主细胞,阿昔洛韦为阳性对照药物,通过观察细胞病变效应(CPE)和改良MTT法来测定药物的细胞毒性、药物对DENV-Ⅱ的直接灭活作用、以及药物抗DENV-Ⅱ对细胞的吸附和对DENV-Ⅱ在细胞内复制增殖的抑制,并算出药物抗DENV-Ⅱ的治疗指数。结果显示该提取物在体外对DENV-Ⅱ无直接灭活作用,也无抗DENV-Ⅱ吸附细胞的作用;但能抑制DENV-Ⅱ在细胞内的复制增殖,其治疗指数达1.57。说明该药物在体外有一定的抗DENV-Ⅱ感染效果,主要是通过抑制病毒在细胞内的复制增殖而发挥作用。
- 洪文艳唐博恒刘金华刘建伟方美玉
- 关键词：大青叶抗病毒作用体外实验
- UPT十通道免疫层析试纸盘检测技术平台的建立及其在鼠疫菌抗体谱筛查中的应用
- 一．以新型光学材料上转换发光颗粒(Up-Converting Phospher,UCP)为标记物，制备双抗原夹心模式的上转换发光免疫层析(Up-converting PhosphlorTechnology based L...
- 洪文艳
- 关键词：免疫层析技术鼠疫菌
- 生命泉膏滋抗实验小鼠阴道单纯疱疹病毒2型感染的研究被引量：3
- 2001年
- 目的 :研究中药生命泉膏滋 (FESOL)抗小鼠阴道 HSV- 2感染的药效学作用。方法 :以不同剂量 FESOL作用于阴道感染 HSV- 2实验小鼠 ,观察用药后动物的发病率、死亡率和病变发展速度及程度。结果 :FESOL 高、中剂量组 ,[8.33、1.6 7、0 .34 g/ (kg.d) ]能显著降低感染鼠的发病率、死亡率 ,同时显著减轻病变程度 ,减慢病变发展速度。结论 :中药 FESOL能有效抗小鼠阴道 HSV- 2感染。
- 魏芸林雨霖周峰洪文艳张蔚英刘军
- 关键词：单纯疱疹病毒2型小鼠抗病毒作用
- 基孔肯雅病毒特异性抗原片段的筛选及ELISA方法的研究
- 目的:基孔肯雅病毒为重要的虫媒传播性传染病病原,其流行频率及流行范围在全球有日益扩大的趋势,2010年9月底,更是在我国东莞市首次暴发。为研制基孔肯雅病毒的快检试剂,本研究开展了基孔肯雅病毒特异性抗原片段的筛选验证工作,...
- 任瑞文张培于徳宪洪文艳方美玉
- 关键词：基孔肯雅病毒原核表达ELISA
- 文献传递
- TaqMan荧光定量PCR检测1型登革热病毒及临床应用被引量：1
- 2010年
- 目的建立登革热1型病毒(DV1)TaqMan荧光定量PCR快速检测方法及应用于临床诊断。方法根据DV15′端非编码区基因保守序列,设计一套特异性引物和TaqMan探针。用4个血清型DV标准毒株为对照,收集40份DV1临床血清为检测标本。通过对DV1标准毒株RT-PCR后,采用体外转录方式获得RNA模板作为阳性对照,检测所建立TaqMan荧光定量PCR方法的特异性。取DV-IgM/IgG用ELISA检测患者血清,将TaqMan荧光定量PCR和DV-IgM/Ig GELISA进行敏感性比较。结果所建立方法的最低检测限约为每反应10个基因拷贝。发病后不同时间采集的登革热患者血清标本检测结果为:发病1～3d的患者RT-PCR阳性检出率最高(81.25%);4～6dELISA-IgM检出率最高(85.00%);7d后ELISA-IgG检出率最高(75.00%)。结论在登革热的早期诊断中建立的RT-PCR具有较高的敏感性、特异性和重复性,可作为DV1的快速诊断方法。
- 白志军刘建伟洪文艳任瑞文陈万山卢业成张复春方美玉林立辉
- 关键词：荧光定量RT-PCRTAQMAN探针
- RT-PCR法快速鉴定几种甲病毒感染被引量：1
- 2005年
- 目的简单、快速地鉴定几种临床症状相似的甲病毒及黄病毒感染,并将它们加以简单的区分。方法从病毒培养细胞上清提取病毒总RNA,并用甲病毒特异性引物进行RT-PCR扩增,把扩增产物进行凝胶电泳。结果通过凝胶电泳,观察到甲病毒科的辛德毕斯病毒扩增片段大小为1420bp,孔肯雅病毒为1630bp,罗斯河病毒病为1650bp,而属于黄病毒的西尼罗病毒和登革病毒无条带出现。结论RT-PCR法可简单、快速地初步鉴定及区分这几株临床症状相似的病毒感染。
- 王军军洪文艳程刚锋
- 关键词：甲病毒RT-PCR
- 黄热病毒单克隆抗体的制备及免疫反应特性鉴定被引量：2
- 2012年
- 目的制备黄热病毒单克隆抗体并对其生物特性进行鉴定。方法通过动物免疫、细胞融合、阳性克隆筛选等方法制备黄热病毒单克隆抗体,免疫Balb/c小鼠收集腹水,得到扩大制备的单抗,辛酸-饱和硫酸铵法纯化腹水。IFA法检测单抗与黄热病毒(YFV)、乙脑病毒(JEV)、登革病毒1-4型(DENV1-4)、西尼罗病毒(WNV)和基孔肯雅病毒(CHIKV)的特异性反应,并对纯化前后的腹水进行效价分析;ELISA方法进行单抗的亚型分类。结果获得8株黄热病毒的单克隆抗体,均与YFV有特异性反应,1株与JEV有交叉反应,余7株与其它4种虫媒病毒无交叉反应。抗体分型大部分为IgG;纯化后单抗蛋白含量大多在30mg/ml以上。纯化后的4株单抗效价在1∶25600,3株在1∶12800,仅1株效价较低。结论本研究目前获得了几株特异性好、效价高的黄热病毒单克隆抗体,为建立黄热病毒快速检测系统奠定了基础。
- 张培任瑞文刘建伟洪文艳于德宪李曦唐博恒
- 关键词：黄热病毒单克隆抗体特异性
- 16S rRNA测序鉴定1株条件致病性人苍白杆菌被引量：1
- 2014年
- 目的探索一种基于16SrRNA基因的细菌快速鉴定方法,为临床未知病原菌的诊断及治疗提供科学依据。方法对临床患者的痰标本分离培养纯菌落,直接以菌液为模板,以通用引物PCR扩增未知菌的16SrRNA基因片段,产物直接测序。将测序结果进行BLAST比对,根据序列同源性鉴定病原细菌。结果未知病原菌经本实验鉴定为人苍白杆菌,经ABI细菌快速鉴定板条检测,确认结果一致。结论该研究简化了临床标本未知病原菌分离培养鉴定的步骤,建立了一种利用16SrRNA基因扩增快速鉴定病原菌的简便方法。
- 洪文艳李曦刘建伟于德宪谢晓波刘金华唐博恒
- 关键词：病原检测细菌鉴定RRNA
