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L-山梨糖提高木霉纤维素酶合成速率机制的研究被引量：17: 1995年; 在0.5％葡萄糖-Mandels盐培养液中添加终浓度为0.5％的L-山梨糖,可使里斯木霉(Trichoderma reesei C 30)和拟康氏木霉(Trichoderma pseudokoningii S38)的内切和外切β-1,4葡聚糖酶合成速率在培养的2天内提高4倍。与此同时β-葡萄糖苷酶的合成没有明显变化。L-山梨糖能明显抑制菌丝生长,但对葡萄糖的吸收没有影响,对菌丝分泌纤维素酶的机制影响不大。其对酶合成的促进可能主要是通过降低了菌丝体的生长速率。; 王冬曲音波高培基; 关键词：木霉纤维素酶 L-山梨糖

由拟康氏木霉Trichoderma Pseudokoningii S—38菌株中分离得到的一个新的外切葡聚糖纤维二糖水解酶(CBH): 1993年; 对拟康氏木霉 Trichoderma Pseudokoningii S—38菌株在玉米秸粉上生长后得到的粗酶液进行了全组分纯化分离。得到了一个物化和酶学性质与已有的外切葡聚糖纤维二糖水解酶(EC 3.2.1.91)CBH(cellobiohydrolase)Ⅰ和Ⅱ性质不同的一个可酶解天然纤维素的组分——CBHX。它不水解 CMC(carboxymethy cellulose)、HEC(hydroxyethyl cellulose)、PNPG(P—nitrophyglucoside)和水杨素,但能水解 Avicel 和磷酸膨胀纤维素,在有内切葡聚糖酶存在时则能水解棉花。与 CBHI 在水解 Avicel 或棉花时无协同作用。相对分子质量为340000,等电点7.0。用微热量计测试表明,它可单独作用于棉纤维的结晶区,但检测不出水解产物。; 薛伯忠王冬高培基; 关键词：纤维素酶

用细菌噬菌体T7RNA聚合酶高效表达天蚕蛾菌素(CecropinA)基因: 1997年; 将经聚合酶链反应 (PCR)扩增的 156 bp Cecropin A基因 Ce克隆于载体 p Bluescript(PBS) II KS(+ )上 ,得到重组质粒 p BCe。将该质粒转入 E.coli LE392 .2 3菌株中 ,以含有 T7RNA聚合酶 Gene 1克隆的噬菌体 DE2进行感染表达已克隆的 p BCe基因。提取基因表达产物后进行Western blot分析 ,并进行产物的抗 E.coli JM10 1菌株生长活性试验。结果表明 ,在菌体合成的总蛋白中有 Cecropin A成分存在 ,其含量约占菌体总蛋白的 10 % 。; 王冬高培基; 关键词：基因表达细菌噬菌体

丝状真菌纤维素酶合成机制的研究被引量：6: 1993年; 丝状真菌产生的纤维素酶被认为是最有应用前景的,但就目前酶生产效率来看,离实际应用还有很大的差距,需要对酶的合成调节机制有更为全面和深刻的了解。纤维素酶的生物合成受诱导和阻遏双重控制,酶的生产既有赖于低廉的保持一定浓度诱导物的存在,又必须清除分解代谢产物对酶合成的阻遏,其中的详细机制有待进一步的阐明。真菌纤维素酶的分泌也是相当复杂的,在酶的分泌过程中,酶会发生例如糖基化等一系列变化。提高纤维素酶的活力测定方法的准确性,使其进一步规范化,是研究纤维素酶工作的另外一个重要的领域。随着现代生物学朝着分子水平的不断发展,分子生物学的许多方法也越来越多地被应用于纤维素酶的研究中,并取得了重要进展。对真菌纤维素酶合成调节机制的深入研究,将为提高纤维素酶产量,推动应用工作的发展打下理论基础。; 王冬曲音波高培基; 关键词：真菌纤维素酶生物合成

芽孢杆菌074碱性纤维素酶的研究——Ⅰ.菌种的分离、筛选及发酵条件被引量：29: 1995年; 从碱性土样中,分离到产碱性纤维素酶的细菌134株。经摇瓶初筛、复筛后,得到一株芽孢杆菌074,在pH9条件下能产生具有较高活性的纤维素酶。该菌株的最适生长pH为中性,最适生长温度为32℃。NaC1对酶的产生影响较大。羧甲基纤维素钠(CMC-Na)对酶的产生有一定促进作用,但不是唯一碳源。用最佳培养基和培养条件,48小时酶活性最高可达6u/ml。; 宋桂经王冬孙彩云高培基; 关键词：碱性纤维素酶芽孢杆菌菌种发酵

腺苷三磷酸和环腺苷单磷酸对丝状真菌纤维素酶合成的调节被引量：14: 1996年; 以虫荧光素酶法检验了四株丝状真菌在葡萄糖—无机盐液体培养过程中的胞内ATP含量。结果表明,只有当胞内ATP浓度低于10^(-S)mg/ml时,真菌才开始合成胞外纤维素酶(FPA)。以不同浓度的各种碳源培养时,菌体胞内ATP含量只要超过10^(-1)mg/ml,FPA的合成即发生阻遏。菌体胞内ATP含量与FPA合成呈显著负相关。以高效液相色谱(HPLC)法检测了菌体培养液中的cAMP含量。在非阻遏条件下,外源cAMP可以提高FPA的合成水平。但外源cAMP不能解除已经发生的酶合成阻遏。菌体ATP和cAMP水平是调节真菌纤维素酶合成的重要因子。; 王冬曲音波高培基; 关键词：丝状真菌纤维素酶腺苷三磷酸

芽孢杆菌O74碱性纤维素酶的纯化和性质研究被引量：10: 1994年; 对芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）Ｏ７４菌株产生的纤维素酶经过ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００，ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－２５和疏水相互作用Ａｇａｒｏｓｅ４Ｂ三种层析方法，分离纯化到一个仅具有内切β－葡聚糖酶（ＣＭＣ酶）活性的纯组分．提纯后酶的比活力提高了２７．９倍，总回收率为４０％．分子量和等电位点分别为５２５００和４．１．酶在ｐＨ４—１２范围内均具有较高活性．其最适反应温度为５０℃，最适反应ｐＨ为７．０，属于反应ｐＨ范围较广泛的耐碱性纤维素酶．除Ｈｇ￣＋，Ａｇ￣＋，Ｚｎ￣（２＋）和Ｃｕ￣（２＋）等少数离子及少数表面活性剂、助剂对酶活性有一定影响外，酶活性相当稳定，符合洗涤剂用酶的条件．; 王冬宋桂经高培基; 关键词：纤维素酶碱性芽孢杆菌提纯

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王冬