王文华
- 作品数：8 被引量：19H指数：3
- 供职机构：华南农业大学兽医学院农业部兽用疫苗创制重点实验室更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金广州市科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- H1N1亚型SIV的生物学特性及油乳剂灭活苗研究
- 猪流感(SwineInfluenza，SI)是由正粘病毒科A型流感病毒(SwineInfluenzaVirus，SIV)引起的猪的一种急性、高度接触传染性呼吸道疾病。为了做好H1N1亚型SI的免疫防制工作，本研究旨在对从...
- 王文华
- 关键词：猪流感病毒H1N1亚型生物学特性灭活疫苗SIV
- 文献传递
- Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1基因串联表达载体的构建
- 2011年
- 为了构建Ⅰ型鸭肝炎病毒双拷贝VP1基因的原核表达质粒,试验采用RT-PCR技术扩增鸭肝炎病毒VP1基因,将其连接到克隆载体pGEM-T Easy中得到重组克隆质粒pGEM-T-VP1,阳性克隆质粒经鉴定正确后,分别用BamHⅠ、XholⅠ、BglⅡ进行酶切,重组后得到pGEM-T-2VP1,然后将双拷贝VP1基因亚克隆入原核表达载体pET-30a(+)中,得到重组质粒pET-30a(+)-2VP1。结果表明:得到了含有目的基因的阳性克隆。说明Ⅰ型鸭肝炎病毒双拷贝VP1基因原核表达质粒构建成功。
- 李日顺于淼黄昌力曹宗喜王文华张超佚张桂红
- 关键词：I型鸭肝炎病毒
- 广东地区猪源戊型肝炎病毒的检测和核苷酸序列分析被引量：2
- 2011年
- 为了检测广东地区部分猪场猪群中的猪源戊型肝炎病毒(HEV)RNA,试验利用反转录巢式聚合酶链式反应(RT-nPCR)并应用生物学软件将经扩增和测序得到的猪源HEV核苷酸序列与GenBank上的各个基因型HEV进行相似性比较分析。结果表明:5个样品中检测到HEV RNA,它们的相似性为85.1%～96.3%,与GenBank上基因Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型和Ⅳ型HEV序列的相似性分别为76.1%～80.5%、76.5%～79.4%、76.4%～80.2%、82.1%～97.7%。说明广东地区存在的猪源HEV可能属于在国内猪群中流行的基因Ⅳ型。
- 刘志刚曹宗喜张得玉秦宏阳张亮权孔维立吴欣伟于俊勇王文华于淼张桂红
- 关键词：基因亚型
- 球安对人工感染球虫的岭南黄鸡保护效能试验
- 2008年
- 选择柔嫩艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫和堆型艾美耳球虫人工混合感染岭南黄鸡,采用笼养和平养的方法,比较球安(Avatec)与甲基盐霉素、盐霉素、马杜霉素和球虫康对鸡球虫感染的保护效能。笼养试验结果显示,球安按110mg/kg添加到饲料中,对3种球虫超高剂量(15万个孢子化卵囊)的混合感染具有很强的抑杀作用,其抗球虫指数和饲料报酬分别为181.5和1.77。平养试验显示,在球虫持续感染的情况下,从增重方面看,与阳性对照相比,球安组、甲基盐霉素和球虫康组在20、30、40和50日龄段体重始终差异极显著。除了盐霉素和马杜霉素以外,各试验组屠宰率与阳性对照相比差异不显著;与阴性对照相比差异不显著。在胸肌率方面,无论是与阴性对照还是与阳性对照相比,均为差异不显著。
- 邓志坚刘霞王文华林政文张德敏谢静文李育豪梁祥解杨建伟李国清
- 关键词：球虫黄鸡
- H3亚型猪流感病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：6
- 2012年
- 为建立一种快捷、可行的检测H3亚型猪流感病毒(SIV)的方法,本研究根据GenBank中登录的H3亚型SIV HA基因的保守序列,设计合成一对特异性引物,建立了一种检测H3亚型SIV的SYBR GreenⅠ荧光定量检测方法,并进行灵敏度、稳定性和特异性试验,与普通PCR进行比较。研究结果表明,标准曲线的循环阈值与模板浓度呈现良好的线性关系,R2为0.994,CV在0.17%～1.41%之间,具有良好稳定性。除H3亚型SIV外,对H1、H4、H6、H9亚型SIV以及猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、口蹄疫病毒和猪圆环病毒2型的检测均为阴性,与普通PCR相比更灵敏。该方法特异性好,准确率高,适于临床分离鉴别H3亚型SIV。
- 郭泗虎王文华张亮权齐海涛曹楠闫明菲黄昌力张超轶张桂红
- 关键词：猪流感H3亚型
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒广州株的分离鉴定与全基因序列分析被引量：3
- 2011年
- 为了给研制基因工程疫苗选取毒株奠定基础,研究在2008年采集广东省某猪场疑似猪高热症病料1份,通过RT-PCR检测、Marc-145细胞传代,证实分离到1株猪繁殖与呼吸综合征病毒,命名为PRRSV-GZ株,经过扩增基因序列并测序,绘制遗传进化树,结果表明:PRRSV-GZ株属于美洲缺失型毒株。
- 王文华秦宏阳曹宗喜于俊勇吴欣伟于淼孔维力刘志刚张桂红
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒
- 广东地区猪源戊型肝炎病毒的检测和核苷酸序列分析
- 本研究利用反转录巢式聚合酶链式反应(RT-nPCR)检测了广东地区部分猪场猪群中的猪源戊型肝炎病毒(HEV)RNA,并应用生物学软件将经扩增和测序得到的猪源HEV核苷酸序列与GenBank上的各个基因型HEV进行相似性比...
- 刘志刚曹宗喜张得玉秦宏阳张亮权孔维立吴欣伟于俊勇王文华于淼张桂红
- 关键词：基因亚型
- 文献传递
- 检测猪戊型肝炎病毒的荧光定量PCR方法的建立被引量：4
- 2011年
- 根据GenBank中猪戊型肝炎病毒的ORF2核苷酸序列的保守区域设计合成一对特异性引物,建立了一套SYBRGreenⅠ荧光定量PCR检测猪源戊型肝炎病毒(swHEV)的方法,并评价了该方法的灵敏度、稳定性和特异性,同时与常规的RT-nPCR进行对比分析。结果表明,建立标准曲线的相关系数为0.998,斜率为-3.039,Ct值变异系数(CV)在0.17%～1.41%之间,有良好的稳定性。同时在检测猪群常见病中显示出很好的特异性,并且比RT-nPCR更灵敏,适合于swHEV的检测。
- 张亮权欧阳昀刘志刚曹宗喜闫明菲王文华郭泗虎张桂红
- 关键词：猪戊型肝炎病毒荧光定量PCR
