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王青青: 作品数：193 被引量：557H指数：12; 供职机构：浙江大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划浙江省自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生一般工业技术文化科学生物学更多>>

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E3泛素酶FBXW7促进巨噬细胞产生趋化因子CCL2/7加剧肠道炎症: 目的炎症性肠病(Inflammatory bowel diseases,IBD)是一种由免疫介导的,慢性易复发的肠道炎症性疾病,其发病机制以及调控因素仍不清楚。肠道内存在CX3CR1high居住型巨噬细胞(Residen...; 何佳宋寅敬李高鹏来利华王青青

双光子显微镜在免疫学研究中的应用: 2012年; 双光子显微镜是一种对活体组织进行荧光成像的新技术。它由于具有对细胞损伤小、成像深度大和可用于活细胞长时间观察等优点而逐渐被应用于细胞生物学、神经生物学、免疫学等研究领域。近些年来双光子显微镜在免疫学研究中的应用很广，主要是用于免疫细胞发育、分化、迁移和功能研究等方面。; 陈罗泉王青青; 关键词：免疫学活体成像

聚乙烯亚胺载体介导的基因转移被引量：9: 2004年; 目的 :探讨以聚乙烯亚胺为骨架的非病毒载体在基因转染中的影响因素。方法 :利用聚乙烯亚胺分别结合含β半乳糖甙酶报告基因的 p SVβ表达质粒 ,含绿色荧光蛋白报告基因的 p EGFP质粒转染 Cos- 7细胞 ,通过组织化学法测定细胞抽提产物中βgal的表达量和流式细胞仪法测定绿色荧光蛋白阳性细胞的表达比例 ,来测定影响转基因效率的各种参数。结果 :在培养液中 ,6 mg/ L聚乙烯亚胺作用 NIH 3T3细胞 2 4 h,细胞生存率为 6 4.2 % ,7mg/ L时细胞生存率为 5 4.4 %。聚乙烯亚胺在 N/ P比 3.0以上方可完全结合 DNA。溶酶体抑制剂氯喹可增加聚乙烯亚胺的转染效率 ;培养液中的白蛋白、血清可降低转染效率。作为配制聚乙烯亚胺 / DNA复合物的溶媒 ,HEPES缓冲液和生理盐水优于 2 78mmol/ L葡萄糖。在配制聚乙烯亚胺 / DNA复合物的溶媒中加入 Mg2 +可降低转染效率。结论 :通过体外细胞试验证明。; 李经忠王青青余海沈芬平李达郑轶; 关键词：聚乙烯亚胺转染

调节性T细胞foxp3基因表达的表观遗传学调控被引量：8: 2010年; 郭庆明王青青; 关键词：TREG细胞 FOXP3 表观遗传学

腺病毒介导的LIGHT联合IL-12治疗小鼠转移性乳腺癌及其机制: 【目的】研究腺病毒介导的 LIGHT 联合 IL-12的抗肿瘤作用及其免疫机理探讨, 观察其对小鼠4T1乳癌和转移的治疗作用以及长期免疫保护作用。【方法】收集对数生长期的4T1细胞,注射至 BALB/c 小鼠右腹部皮下,...; 赵德矿王青青沈芬平洪学军胡桂莉曹雪涛; 文献传递

CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞在HDCP外周血中水平变化及其意义被引量：10: 2015年; 目的:探讨妊娠期高血压疾病患者(HDCP)外周血中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞水平变化及其意义。方法:选取2013年1月至2014年8月在我院治疗的妊娠期高血压疾病(HDCP)患者46例,其中轻度子痫前期22例,重度子痫前期24例,同时选取同期正常孕妇25例,采用流式细胞术检测各组患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞。结果:重度子痫前期组CD4+CD25+T细胞比例为(5.01±1.04)%,低于轻度子痫前期组的(7.38±1.26)%和正常孕妇组的(12.59±2.48)%,差异有统计学意义(P<0.05);轻度子痫前期组和重度子痫前期组CD4+CD25+Foxp3+T细胞绝对数分别为(0.96±0.11)×107和(0.63±0.12)×107,CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T分别为(2.58±0.93)%和(1.84±0.85)%,均低于正常孕妇组的(1.85±0.17)×107和(5.11±0.99)%,差异有统计学意义(P<0.05);轻度子痫前期组和重度子痫前期组血清雌三醇分别为(6.16±2.17)mg/L和(3.27±1.15)mg/L,明显低于正常孕妇组的(11.34±2.4)mg/L,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:妊娠高血压疾病患者CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞明显减少,同时血清雌三醇也有所降低,这些可能与妊娠期高血压疾病的发病机制以及免疫耐受有关。; 张义东王青青; 关键词：CD4^+CD25^+调节性T细胞 FOXP3 妊娠期高血压疾病

TAT短肽修饰的聚乙烯亚胺-β-环糊精基因载体被引量：5: 2009年; 目的:将HIV-1的转录反式激活蛋白(trans-activator of transcription protein,TAT)中的片段短肽(RKKRRQRRR)偶联于聚乙烯亚胺-β-环糊精(polyethylenimine-β-cyclodextrin,PEI-β-CyD)聚合物,构建出低毒性、高转染率的新型基因载体。方法:β-环糊精(β-CyD)和低分子量树枝状聚乙烯亚胺(PEI600)通过羰基二咪唑(1,1’-carbonyldiim idazole,CDI)聚合形成骨架结构,通过琥珀酰亚胺-3-(2-嘧啶二硫)丙酸酯[N-succinimidy-3-(2-pyridyldithio)propionate,SPDP]将TAT短肽偶联于PEI-β-CyD,构成新的聚合物TAT-PEI-β-CyD。采用1H-NMR和FT-IR对聚合物进行化学结构表征;凝胶电泳阻滞实验、粒径测定和透射电镜观察TAT-PEI-β-CyD对DNA的浓缩能力,以及浓缩质粒DNA后颗粒形态和粒径大小;MTT法测定载体在A293和B16细胞上的毒性,并对A293和B16细胞进行体外细胞转染实验,以PEI25kDa作为对照。结果:1H-NMR和FT-IR结果显示,TAT短肽已成功偶联到PEI-β-CyD。凝胶电泳阻滞试验显示,TAT-PEI-β-CyD在N/P为4∶1时可以完全阻滞DNA的迁移。粒径测定结果和透射电镜图像表明,TAT-PEI-β-CyD/pDNA(N/P=30∶1)复合物粒径在100nm左右。细胞毒性实验表明,在B16和A293两种不同细胞中,聚合物毒性低于PEI25kDa。体外转染结果表明,在N/P为30∶1时,聚合物在A293、B16和B16BL6细胞中的基因转染效率最高;TAT短肽的偶联能提高PEI-β-CyD在B16、B16BL6细胞上的基因转染效率。结论:实验成功构建了TAT短肽修饰的PEI-β-CyD新型基因载体。该载体毒性低,基因转染效率高。; 来利华姜启英陈丹虎义平余海王青青汤谷平; 关键词：聚乙烯亚胺基因产物 TAT

以聚乙烯亚胺-β-环糊精为骨架偶联短肽CY11的转基因载体被引量：2: 2009年; 目的:以聚乙烯亚胺-β-环糊精(PEI-β-CyD)作为载体骨架,用靶向于肿瘤表面成纤维细胞生长因子受体(FGFR)的短肽CY11(CGMQLPLATWY)偶联于载体材料上,研究该载体材料的基因转染效率。方法:用琥珀酰亚胺-3-(2-嘧啶二硫)丙酸酯[N-succinimidy-3-(2-pyridyldithio)propionate,SPDP]将CY11偶联到PEI-β-CyD上,合成CY11-PEI-β-CyD。核磁共振氢谱(1H-NMR)、热重分析(TGA)对载体材料进行化学表征,凝胶电泳阻滞实验研究载体材料对质粒DNA的浓缩能力,MTT法测定载体材料的细胞毒性,在COS-7、Hela和B16细胞株上进行体外转染实验。结果:成功合成材料CY11-PEI-β-CyD,在N/P为4时能够有效地浓缩质粒DNA。在B16细胞上,材料CY11-PEI-β-CyD达到160μg/ml时,细胞存活率仍高于80%。在CY11-PEI-β-CyD/DNA复合物在N/P为20∶1时,转染效率是对照组PEI-β-CyD的17倍。结论:CY11-PEI-β-CyD是具有低毒性、高转染且有FGFR靶向性的新型非病毒转基因载体。; 虎义平姜启英陈丹赵丹军陆晓余海王青青周峻胡秀荣汤谷平; 关键词：聚乙烯亚胺肽类成纤维细胞生长因子

三羧氨基喹啉对人口腔癌裸鼠移植瘤的抗血管生成作用与其调节巨噬细胞分泌细胞因子的关系被引量：5: 2002年; 目的 :观察三羧氨基喹啉 ( Linom ide)对人口腔癌裸鼠移植瘤的治疗作用 ,探讨其抗血管生成作用与调节巨噬细胞分泌细胞因子的关系。方法 :建立人舌癌裸鼠移植瘤模型 ,观察 Linom ide对肿瘤生长的抑制作用 ,采用免疫组化染色检测 L inomide治疗组和对照组荷瘤裸鼠的肿瘤微血管密度 ( MV D)的变化 ,采用 ELISA方法检测Linom ide对巨噬细胞分泌促血管因子 TN F- α及血管抑制因子 G M- CSF功能的影响。结果 :10 0 m g/ kg· d- 1、50mg/ kg· d- 1Linom ide腹腔注射组、对照组裸鼠瘤重分别为 ( 0 .4 7± 0 .2 5) g、( 0 .92± 0 .30 ) g、( 1.75± 0 .38) g,治疗组瘤重明显降低 ( P<0 .0 1)。治疗组瘤组织 M VD明显减低 ,与对照组相比 ,50 m g/ kg· d- 1和 10 0 m g/ kg· d- 1Linom ide治疗组的 MV D分别减少了 38.2 %和 57.8%。 Linom ide治疗组腹腔巨噬细胞分泌 TN F-α的水平与对照组比较 ,受到明显抑制 ( P<0 .0 5)。 L inom ide体外处理小鼠巨噬细胞系 RA W 2 6 4.7也可明显抑制其分泌 TN F-α的水平 ( P <0 .0 5) ,并存在剂量效应关系。结论 :Linom ide可有效抑制人舌鳞状细胞癌裸鼠移植瘤的生长 ,降低肿瘤微血管密度 ,抑制巨噬细胞分泌 T NF-α可能是其一个重要的抗血管生成机制。; 傅其宏余海王青青吴求亮; 关键词：口腔癌裸鼠移植瘤抗血管生成作用新生血管化肿瘤坏死因子

糖基磷脂酰肌醇锚定型小鼠B7.1融合蛋白的制备及抗肿瘤作用研究被引量：5: 2004年; 目的制备糖基磷脂酰肌醇锚定型小鼠B7.1融合蛋白(mB7.1GPI),研究该蛋白制备的肿瘤疫苗的抗肿瘤作用。方法用已构建的重组糖基磷脂酰肌醇锚定型小鼠B7.1的表达载体pcDNA3.1(+)mB7.1GPI,转染到CHO细胞中,表达和纯化mB7.1GPI。采用流式细胞术和免疫荧光激光共聚焦显微镜观察其对细胞膜的锚定作用。建立C57BL6小鼠的淋巴瘤模型,观察用mB7.1GPI融合蛋白制备的肿瘤疫苗对荷瘤小鼠的免疫治疗作用。结果mB7.1GPI融合蛋白能够锚定在肿瘤细胞膜上,能有效刺激小鼠脾细胞增殖和分泌IL2与IFNγ。融合蛋白制备的肿瘤疫苗能够显著抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长,并延长其生存期。结论糖基磷脂酰肌醇锚定型小鼠B7.1制备的肿瘤疫苗具有较强的抗肿瘤作用,有可能作为一种有效的新型疫苗用于肿瘤的治疗和预防。; 易平勇余海王青青黄常新李经忠马文学; 关键词：B7.1 小鼠 GPI 融合蛋白磷脂酰肌醇 PCDNA3

王青青

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