石丽媛
- 作品数:75 被引量:206H指数:9
- 供职机构:云南省地方病防治所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金云南省应用基础研究基金云南省科技厅科研基金更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学生物学文化科学更多>>
- SDS-PAGE制备凝胶纯化鼠疫菌Pla蛋白被引量:3
- 2008年
- 目的用制备电泳分离纯化鼠疫菌纤溶酶原激活因子(Plasminogen activator,Pla)。方法用距离测量的方式来定位Pla三条带的位置。结果制备电泳纯化的Pla主要由相对分子质量约31×103、35×103、37×103的三条带组成,未检测到活性。结论Pla经制备电泳分离可以达到基本纯化。
- 石丽媛杨光璨董珊珊于国林
- 关键词:纤溶酶原激活因子
- 2017年云南省剑川县鼠形动物中巴尔通体感染状况调查被引量:3
- 2019年
- 目的调查2017年云南省剑川县鼠形动物中巴尔通体的自然感染情况。方法2017年3-7月在剑川县用笼捕法捕获鼠形动物,无菌采集其股动脉血并提取DNA,应用荧光定量PCR技术进行巴尔通体检测,对检测阳性的血液样本进行巴尔通体分离培养。结果从剑川县沙溪镇石龙村及金华镇西门社区共捕获鼠形动物372只;经荧光定量PCR检测,阳性208份,阳性率为55.91%;11种鼠形动物中有10种检出阳性,其中大绒鼠的阳性率为38.73%,齐氏姬鼠为72.49%,贝氏树鼩为7.14%,中华姬鼠为77.78%,赤腹松鼠、社鼠、褐家鼠为50.00%,大足鼠、巢鼠为100.00%;阳性样本经分离培养后获得19株巴尔通体。结论TaqMan探针荧光PCR技术是巴尔通体感染的快速诊断方法。剑川县鼠形动物中感染较高的为巴尔通体,受感染的鼠种较多,其中以齐氏姬鼠与大绒鼠较高,人群与外环境的鼠类接触存在感染发病的风险。
- 董珊珊李艳苹段存娟郭英石丽媛钟佑宏栗冬梅王鹏
- 关键词:巴尔通体鼠形动物荧光定量PCR
- 分子生物学方法鉴定由自毙鼠分离的细菌
- 2014年
- 目的对1株由自毙鼠分离的细菌(X175菌株)进行属、种及型的鉴定。方法 1采用16S rDNA对X175菌株进行种属鉴定;2应用荧光PCR检测X175菌株是否存在致泻性大肠埃希菌常见毒素基因(stx1/stx2/eae、lt/st、aggR/ipaH)及大肠埃希菌O104、H4基因;3应用PCR检测X175菌株是否存在肠出血性大肠埃希菌(EHEC)O104∶H4的9个毒力基因。结果 1经16S rDNA鉴定,X175菌株与大肠埃希菌埃希菌属的一些菌株相似度达99%,进化树显示X175菌株与大肠埃希菌O104∶H4菌株的亲缘关系较近;2大肠埃希菌O104基因和ipaH基因检测结果均为阳性,stx1/stx2/eae、lt/st、aggR、志贺菌/沙门菌、H4等基因检测结果均为阴性;3肠出血性大肠埃希菌O104∶H4九个毒力因子检测结果均为阴性。结论X175菌株为大肠埃希菌O104弱毒型菌株,H抗原和其他一些特性还需进一步研究。
- 郭英陈双艳石丽媛董珊珊王鹏
- 关键词:大肠埃希菌RDNA毒力基因
- 鼠疫菌纤溶酶原激活因子的分离纯化
- 2009年
- 目的建立从人工培养的鼠疫菌中分离和纯化纤溶酶原激活因子(Plasminogen activator,Pla)的方法。方法分别用超声破碎、尿素提取与硫酸铵盐析相结合的方法(简称超声法、尿素法)提取Pla,并分别用离子交换、凝胶过滤两步层析相结合的高效液相色谱和制备电泳纯化Pla,对提取、纯化的Pla进行纤溶酶原激活剂活性检测。结果鼠疫菌超声破碎上清50%~60%饱和硫酸铵沉淀和尿素浸渍菌粉上清0~10%饱和硫酸铵沉淀,均获得了3条蛋白带[相对分子质量(Mr)约31×10^3、35×10^3、37×10^3]。纤溶酶原激活剂活性检测两种方法获得蛋白的溶圈直径分别为6.5、7.2mm。用高效液相色谱纯化的Pla主要由Mr约31×10^3、35×10^3、37×10^3的3条蛋白带组成,纤溶酶原激活剂活性检测溶圈直径为5.0mm。制备电泳纯化的Pla主要由Mr约31×10^3、35×10^3、37×10^3的3条蛋白带组成,条带所在位置还有其他一些低浓度蛋白存在,纤溶酶原激活剂活性检测无溶圈出现。结论超声法和尿素法可以提取到Pla,后者经高效液相色谱和制备电泳可以达到基本纯化。
- 石丽媛于国林白丽杨光璨董珊珊
- 关键词:耶尔森菌鼠疫纤溶酶原激活剂
- 玉溪市家鼠鼠疫疫源地鼠疫耶尔森菌噬菌体的分离及鉴定
- 2024年
- 目的调查云南省玉溪市家鼠鼠疫疫源地宿主动物中是否携带鼠疫耶尔森菌噬菌体,并进行分离鉴定。方法2018年8月—2019年8月在新平县、峨山县、元江县和红塔区捕鼠。以鼠疫耶尔森菌(简称“鼠疫菌”)EV 76疫苗株为宿主菌,使用双层琼脂平板法进行鼠疫菌噬菌体的分离,对分离而得的部分噬菌体进行初步鉴定。并用PCR法检测鼠疫菌特异基因caf1。结果本次调查共捕获452只鼠类标本,分离到31株鼠疫菌噬菌体,总分离率为6.86%;10株分离自褐家鼠,分离率为5.56%;8株分离自黄胸鼠,分离率为6.61%;6株分离自小家鼠,分离率为10.34%;3株分离自斯氏家鼠,分离率为10.34%;3株分离自大足鼠,分离率为15.79%,1株分离自松鼠,分离率为25.00%。不同宿主动物鼠疫菌噬菌体分离率差异无统计学意义(χ^(2)=10.813,P>0.05)。4个县(区)均分离出鼠疫菌噬菌体,13个采样点中11个采样点分离出鼠疫菌噬菌体,分离率为84.62%。各采样点分离率差异有统计学意义(χ^(2)=27.505,P<0.05)。噬菌体在平板上表现出大(d≥1.8mm)、中(0.8mm≤d<1.8 mm)和小(d<0.8mm)噬菌斑;未检测到caf1基因。结论玉溪市家鼠鼠疫疫源地内存在鼠疫菌噬菌体,噬菌斑呈多态性。3株噬菌体形态符合肌尾噬菌体科特征。
- 彭海燕钟佑宏张海鹏段存娟苏超石丽媛吴鹤松
- 一种生物安全柜实验操作专用垫
- 本实用新型涉及一种生物安全柜实验操作专用垫,其特征在于:包括垫子,所述垫子分三层,最上层是亲水层,中间层是吸水层,底层是防水层。本实用新型的垫子用于生物安全柜实验操作,能够接住生物安全柜中微生物溢出、泼洒有毒有害微生物,...
- 王鹏钟佑宏石丽媛董珊珊段存娟张海鹏
- 文献传递
- 一种高通量筛选噬菌体宿主谱的方法
- 本发明公开一种高通量筛选噬菌体宿主谱的方法,属于噬菌体宿主谱筛选技术领域。本发明所述方法为经纯化后的噬菌体进行复壮,使效价达10<Sup>6</Sup>以上;宿主菌经适宜温度气浴振荡培养至对数生长期备用;在96孔微量培养...
- 钟佑宏王鹏杨丽华石丽媛董珊珊张海鹏谭红丽
- 文献传递
- 鼠疫菌pMT1质粒的序列分析研究进展
- 2019年
- 鼠疫是由鼠疫耶尔森菌(简称鼠疫菌)引起的烈性传染病。鼠疫菌质粒是鼠疫菌染色体外的遗传物质,3种常规质粒中,p MT1质粒序列变化最大,结构组成最复杂,目前对其研究相对较少。应用BLAST和Mauve软件对已有36株菌株的pMT1质粒序列比对,对鼠疫菌pMT1质粒的序列特征、基因及其功能研究分析。结果显示基因模块存在较大重排,模块排列存在较大差异,同一生物型有可能差异较大,不同生物型也有模块相似,但同一生物型较不同生物型差异相对较小;插入序列数及位置不同,部分菌株pMT1质粒序列上的毒力基因存在基因突变;一些菌株的pMT1质粒序列中含有其他菌株没有的特殊基因,以及其他功能尚不清楚的基因。对鼠疫菌pMT1质粒的序列分析研究,可以增进对鼠疫流行的认识,对疫苗开发及制定合理的防治对策具有重要意义。
- 安森玲石丽媛宋志忠
- 关键词:鼠疫菌基因差异
- 云南省边境地区鼠疫基因组流行病学研究
- 2024年
- 目的探索云南边境地区鼠疫的流行病学特征及所分离鼠疫菌株的遗传进化关系,为进一步研究1982-2007年的第2次流行的起因及流行规律提供线索。方法收集1982-2007年鼠疫流行期间边境地区的鼠疫疫情资料进行描述性流行病学分析;并获得262株边境地区鼠疫菌株的全基因组序列,进行系统发育分析。结果云南省有17个边境县(市)发生鼠疫疫情,判定疫点数552个,病例数123例。云南边境地区分离鼠疫菌中存在1.ORI2、1.ORI3、1.IN3、2.ANT和2.MED 5种基因型,其中1.ORI2为优势种群。258株1.ORI2种群的云南鼠疫菌分属于4个亚簇。在整个系统发育关系中,缅甸及越南支系嵌入在云南支系内。结论1982-2007年云南省边境地区鼠疫流行强度大,呈现由西向南、向东发展的趋势;云南与毗邻国家存在鼠疫跨境传播的风险,应加强边境地区鼠疫监测及防控工作。
- 杨丰义杨荣李思儒孔进姣谭红丽张海鹏王鹏钟佑宏石丽媛宋志忠
- 关键词:边境鼠疫菌
- 鼠疫菌纤溶酶原激活因子Pla的提取与纯化方法
- 本发明涉及一种鼠疫菌纤溶酶原激活因子Pla的提取与纯化方法,该方法包括:将鼠疫菌体经溶菌酶处理,然后经超声破碎,再进行硫酸铵盐析,得到粗提Pla蛋白;粗提Pla蛋白采用羟基磷灰石层析柱进行层析纯化,其中在上样缓冲液中加入...
- 宋志忠杜春红石丽媛王鹏杨光璨钟佑宏董珊珊
- 文献传递