章美云
- 作品数：7 被引量：24H指数：2
- 供职机构：中国科学院遗传与发育生物学研究所更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- CEA单抗轻重链可变区基因的克隆和序列分析被引量：1
- 1995年
- 从分泌具有高亲和力和特异性的小鼠抗癌胚抗原(CEA)的单抗杂交瘤细胞株C50中提取总RNA,通过RTPCR扩增并克隆了抗体的轻、重链可变区基因。核苷酸序列分析表明所克隆基因分别为抗体轻、重链可变区基因。
- 章美云孔健杨宁黄华梁
- 关键词：癌胚抗原单克隆抗体可变区基因克隆
- PCR－RFLP用于Ⅰ型脊髓灰质炎病毒野毒株与疫苗相关株的鉴别
- 1996年
- 利用互补于Ⅰ型脊髓灰质炎病毒ＶＰ１区的一对引物，扩增病毒核酸中约２６８ｂｐ的片段。产物经ＨａｅⅢ、ＲｓａⅠ、ＸｂａⅠ三种限制性内切酶切割后，用２％琼脂糖凝胶电泳检测，观察各分离株与ＳａｂｉｎⅠ型株酶切图谱的异同。在所检测的１３株病毒分离株中，只有１株的酶切图谱与ＳａｂｉｎⅠ型株的相同，为疫苗相关株，其它的１２株均为野毒株。本实验的结果表明从不同地区、不同年份所得的Ⅰ型脊髓灰质炎病毒分离株的碱基组成是有差异的。
- 孔健章美云
- 关键词：脊髓灰质炎病毒PCR野毒株
- 原核分泌型表达载体的构建及癌胚抗原单链抗体的表达被引量：2
- 1998年
- 目的构建分泌型载体并表达癌胚抗原单链抗体。方法以ｐＧＥＭ－１１ｚｆ（＋）为基础，插入化学合成的１４个寡核苷酸片段（共１７６ｂｐ），构建成含核糖体结合位点（ＲＢＳ）、翻译起始点（ＡＴＧ）、果胶酶信号肽基因（ｐｅｌＢ）和翻译终止点（ＴＡＡ）的分泌型表达载体（ＲＰＹ）。化学合成带有抗体重、轻链可变区基因插入位点和惰性连接序列的８２ｂｐ片段，并克隆到ＲＰＹｐｅｌＢ信号肽的下游，构建成抗体分泌型表达载体ＲＰＹＡ。将ＣＥＡ单抗重、轻链可变区基因（ＶＨ、ＶＬ）插入到ＲＰＹＡ的相应位点，转化大肠杆菌ＨＢ２１５１，ＩＰＴＧ诱导表达。结果序列测定表明ＲＰＹＡ的序列与原设计序列一致，免疫印迹实验表明表达产物具有ＣＥＡ结合活性，分子量为２．６×１０３，胞浆内结合有ｐｅｌＢ信号肽的表达产物分子量为３２×１０３。
- 章美云杨青赵莉孔健
- 关键词：癌胚抗原单链抗体基因表达寡核苷酸
- 烟草薄层培养器官发生的控制及细胞学观察被引量：2
- 1989年
- 普通烟草(Nicotiana tabacum)花梗表皮薄层组织在不同生长素和细胞分裂素配比的MS培养基上及不同的培养条件下,可分别诱导,得到直接发生的营养芽和花芽,以及根和不发生器官分化的愈伤组织。组织间的相互联系,影响器官发育潜能的发挥。细胞学观察发现,直接发生的营养芽和花芽起源于薄层组织的亚表皮细胞层。
- 章美云韩碧文
- 关键词：薄层培养器官发生烟草
- 人癌胚抗原单链抗体基因的构建和筛选被引量：7
- 1996年
- 从分泌抗癌胚抗原（ｃａｒｃｉｎｏｅｍｂｒｙｏｎｉａｎｔｉｇｅｎ，ＣＥＡ）单抗的杂交瘤细胞株Ｃ５０中提取总ＲＮＡ，逆转录成ｃＤＮＡ，ＰＣＲ扩增分别得到抗体轻、重链可变区基因，再利用两对ＰＣＲ引物合成和扩增得到全单链抗体基因．将含轻、重链可变区序列的ＤＮＡ片段克隆于含噬菌体基因Ⅲ的噬菌粒ｐＣＡＮＴＡＢ５．重组克隆在噬菌体表面表达基因Ⅲ与单链抗体的融合蛋白．表达具抗原结合活性的单链抗体的重组噬菌体可以通过亲和筛选的方法筛选得到并富集．利用该方法我们可以从许多分泌不同抗体的杂交瘤细胞ＲＮＡ中快速克隆和筛选功能性抗体可变区基因．
- 章美云孔健
- 关键词：癌胚抗原抗体基因
- 烟草薄层培养的花芽诱导和开花梯度的研究被引量：12
- 1992年
- 普通烟草(Nicotina tabacum L.c.v.Samsun)营养生长植株和开花植株表皮薄层在生长素和细胞分裂素配比下,可诱导花原基和成花。不同部位茎表皮薄层外植体的生化分析表明;α-淀粉酶活性向顶递增,而过氧化物酶活性及其同工酶水平向顶递减。在营养生长植株中内源游离 IAA 含量变化不显著,而在开花植株中,花梗表皮薄层游离 IAA 含量为主茎的两倍。这些生化梯度与外植体的体外花芽分化能力相联系。
- 章美云韩碧文
- 关键词：烟草
- 逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）用于鉴别脊髓灰质炎病毒和其它肠道病毒被引量：1
- 1996年
- 用一对选自脊髓灰质炎病毒及一对由Ｈｙｙｐｉａ所设计的细小ＲＮＡ病毒核酸５’端非编码区的引物，逆转录并扩增脊髓灰质炎病毒及其它肠道病毒的核酸，从而把脊髓灰质炎病毒和其它非脊髓灰质炎肠道病毒进行鉴别。１０５份被血清中和试验定型为脊髓灰质炎病毒的标本，逆转录一聚合酶链反应（ＲＴ─ＰＣＲ）的结果亦定为脊髓灰质炎病毒，灵敏度为１ｍ％；１３３份被血清中和试验定为非脊髓灰质炎肠道病毒的标本，均被判定为非脊髓灰质炎病毒，特异度为１００％。该方法可用于脊髓灰质炎病毒的检测及脊髓灰质炎病毒与其它非脊髓灰质炎肠道病毒的鉴别。
- 孔健李宇静章美云徐爱强迮文远
- 关键词：病毒RT-PCR肠道病毒
