蒋立平
- 作品数：52 被引量：111H指数：6
- 供职机构：中南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学农业科学生物学更多>>
- 一种富含半胱氨酸的蜘蛛多肽基因的克隆和初步表达被引量：1
- 2010年
- 目的克隆编码虎纹捕鸟蛛多肽的基因并表达蜘蛛多肽,为研究其生物学功能奠定基础。方法通过构建和随机测序毒腺cDNA文库,克隆编码毒素多肽的基因;构建真核表达质粒,利用酿酒酵母S78株表达系统分泌表达,表达产物进行Tricine SDS-PAGE鉴定。结果克隆到一种编码富含半胱氨酸的多肽的新基因,命名为HWTX-XIVa2基因;构建的真核表达质粒转化酵母S78后表达6.5ku的多肽。结论构建并筛选毒腺cDNA文库是发现毒素多肽基因的一种有效方法,利用基因工程表达是获得蜘蛛多肽的一种有效手段。
- 蒋立平官剑武舒衡平
- 关键词：虎纹捕鸟蛛基因克隆多肽
- 医学寄生虫学开放式课堂教学的探索与实践被引量：7
- 2016年
- 随着信息技术的发展,开放式的课堂教学越来越受到学生的欢迎,对医学寄生虫学进行了开放式课堂教学的探索与实践,主要内容包括小班上课、微课教学、标本数字化、实验考试改革和讨论课教学,为我国创新医学人才培养模式的探索进行了有益的尝试。
- 蒋立平章洁蔡力汀曾庆仁张祖萍
- 关键词：医学寄生虫学开放式课堂教学改革
- 蜘蛛运输装置
- 本实用新型涉及运输工具技术领域，公开了一种蜘蛛运输装置，包括框架，设于框架内侧多层隔板，以及用于调节每个隔板高度的高度调节机构，其中，相邻的两个隔板之间形成存储空间，每个所述隔板上均设有纱布。本实用新型一方面多层隔板增加...
- 蒋立平
- 文献传递
- 弓形虫新疫苗候选分子编码基因的筛选、质粒构建及保护性研究
- 目的:筛选新的弓形虫病疫苗候选分子,构建弓形虫真核表达质粒pcDNA3/T.g-R1,并观察重组质粒所诱导的保护性免疫应答.方法:1、用感染弓形虫的大鼠血清和正常大鼠血清免疫筛选弓形虫速殖子cDNA文库,对阳性克隆测序并...
- 蒋立平
- 关键词：弓形虫免疫筛选DNA疫苗生物信息学分析
- 文献传递
- 弓形虫新基因表位疫苗免疫效果的观察被引量：5
- 2008年
- 目的观察弓形虫新基因WX、WX2的表位疫苗对小鼠的保护作用。方法将昆明小鼠分成5组,分别用pcDNA3-W2b、pcDNA3-W4a、pcDNA3-W2b4a质粒及pcDNA3和NS,肌注3次,每次间隔2周。免疫完成后ELISA法检测血清抗体水平,取脾细胞用流式细胞仪检测CD4+与CD8+淋巴细胞比值,PCR检测肌肉组织中重组质粒。免疫后第3周,小鼠经腹腔注射弓形虫速殖子500个,观察发病情况和存活时间。30d后仍存活的小鼠,取组织匀浆后进行小鼠盲传。结果免疫后第3周,pcDNA3-W2b组小鼠血清抗体水平显著高于pcDNA3和NS对照组(P<0.05);用PCR法从pcDNA3-W2b、pcDNA3-W4a和pcDNA3-W2b4a质粒组小鼠肌肉组织中成功检测到各表位疫苗质粒,且各组小鼠脾脏CD4+与CD8+T淋巴细胞比值显著低于pcDNA3组和NS组(P<0.05)。pcDNA3-W2b、pcDNA3-W2b4a组小鼠存活时间与pcDNA3组及NS组比较明显延长(P<0.05)。结论弓形虫新基因WX、WX2表位疫苗能够诱导小鼠产生抗弓形虫感染保护性免疫,提示DNA类表位疫苗的研制可作为弓形虫疫苗研究的策略之一。
- 范久波吴翔谭逵谢荣华张琼蒋立平舒衡平
- 关键词：弓形虫DNA表位疫苗质粒
- 编码弓形虫致密颗粒抗原-1(GRA1)质粒DNA免疫小鼠诱导抗弓形虫感染的保护性(英文)被引量：8
- 2005年
- 目的构建真核表达质粒pcGRA1,并观察其免疫小鼠的保护性。方法经PCR从cDNA克隆中扩增出GRA1编码基因,定向克隆入pcDNA3的EcoRⅠ/XhoⅠ位点,从而获得pcGRA1。用限制性内切酶消化、PCR及序列测定对该重组质粒进行鉴定。将100μg质粒于小鼠左后腿DNA肌注,于注射后2周和4周各加强1次;分别观察小鼠体内的特异性抗体滴度、GRA1基因在小鼠体内的分布、GRA1在肌细胞的表达以及免疫小鼠对弓形虫强毒株RH速殖子攻击后的保护性。结果DNA序列测定结果表明,将573bp的GRA1编码阅读框定向克隆到pcDNA3EcoRⅠ/XhoⅠ位点,成功构建了重组质粒pcGRA1;免疫小鼠血清中检测到特异性IgG;不同组织DNA为模板特异地扩增出GRA1编码基因;IFA检测pcGRA1免疫鼠肌细胞呈阳性反应;弓形虫RH株速殖子攻击感染pcGRA1免疫鼠,其存活时间长于对照组。结论重组质粒pcGRA1免疫小鼠可诱导特异性免疫反应,对弓形虫强毒株的攻击感染具有一定的保护性。
- 蔡力汀舒衡平王丹静蒋立平吴翔
- 关键词：弓形虫DNA疫苗
- 细胞培养专用离心管架
- 本实用新型涉及细胞培养技术领域，公开了一种细胞培养专用离心管架，包括操作台、第一支柱、第二支柱、固定台、第一螺杆、升降螺母和第二螺杆，所述操作台上设有离心管放置槽，所述操作台的两端分别安装在第一支柱和第二支柱上，所述第一...
- 蒋立平
- 文献传递
- 大鼠感染血清免疫筛选弓形虫速殖子cDNA文库被引量：6
- 2003年
- 目的为弓形虫病疫苗的研制提供新的抗原分子.方法用弓形虫RH株速殖子感染大鼠,分离其血清作为探针筛选弓形虫cDNA文库,对阳性克隆的插入片段分别进行PCR扩增及DNA序列测定.结果从cDNA文库4×105个噬菌斑中筛选出13个阳性克隆,其插入片段大小分别为0.45～2.4kb.对L1、L2、L4和L5四个克隆进行测序,将所得序列查询基因库,结果,克隆L2与弓形虫P24主要抗原基因序列相同,L4与蔗糖丙酮酸磷酸激酶具有同源性,L1无任何相匹配的序列,为未曾报告过的新基因(GenBank登录号为AY180109),命名为T.g-R1.T.g-R1编码134个氨基酸的非跨膜蛋白.PROSCAN分析显示T.g-R1含有2个蛋白激酶C磷酸化位点,2个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点,1个肉豆酸酰化位点,1个微体细胞C端靶信号.L5为一小片段,无完整编码读框.结论阳性克隆的筛选和鉴定为抗弓形虫病疫苗的研制提供又一途径.
- 蒋立平吴翔蔡力汀王丹静舒衡平
- 关键词：CDNA文库免疫筛选PCR扩增DNA序列测定
- 弓形虫酵母表达质粒pPIC9K-GRA1的构建及鉴定被引量：3
- 2007年
- 目的构建弓形虫致密颗粒抗原-1(GRA1)的酵母表达质粒,为进一步研究GRA1蛋白功能奠定基础。方法PCR扩增编码GRA1目的基因,用EcoRⅠ/NotⅠ分别对扩增产物和酵母表达质粒pPIC9K进行双酶切,将GRA1定向克隆到pPIC9K的EcoRⅠ/NotⅠ位点,对重组质粒进行PCR,双酶切初步鉴定后做序列测定。结果特异扩增出预期的GRA1片段,大小为573 bp,扩增产物经双酶切后成功连接到pPIC9K中,经PCR,双酶切及序列测定证明重组质粒中含有GRA1读框。结论成功构建弓形虫GRA1酵母真核表达质粒。
- 谢荣华吴翔舒衡平蒋立平范久波谭逵张琼
- 关键词：刚地弓形虫
- 弓形虫新基因表位疫苗质粒的构建及鉴定被引量：7
- 2007年
- 目的构建两个弓形虫新基因2B9G1、7C3-C3的表位疫苗质粒,为阐明表位疫苗的保护性奠定基础。方法采用生物信息学方法对新基因2B9G1、7C3-C3进行表位预测,PCR扩增基因中编码3个表位的片段W2b、W2a和W4a,连接入pcDNA3,转入DH5α,挑阳性菌落进行PCR、酶切和测序鉴定;同法将W2a、W4a分别克隆入pcDNA3-W2b载体中W2b片段下游,再将W4a克隆入pcDNA3-W2b2a载体中W2a片段下游。结果经PCR、酶切鉴定及序列测定,W2b、W2a和W4a 3个片段分别插入pcDNA3预期位置;W2a和W4a片段分别插入pcDNA3-W2b预期位置;W4a片段插入pcDNA3-W2b2a预期位置。结论成功构建单表位、双表位、多表位疫苗质粒pcDNA3-W2b、pcDNA3-W2a、pcDNA3-W4a、pcDNA3-W2b2a、pcDNA3-W2b4a、pcDNA3-W2a2b4a。
- 范久波吴翔谭逵谢荣华张琼蒋立平舒衡平
- 关键词：弓形虫新基因表位疫苗
