裴冬生 作品数:93 被引量:192 H指数:8 供职机构: 徐州医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省自然科学基金 江苏省高校自然科学研究项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 化学工程 更多>>
雷帕霉素对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响及其分子机制 2012年 目的观察雷帕霉素对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响及其对缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)基因表达的影响。方法SGC-7901细胞经雷帕霉素处理后,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖情况,逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)检HIF-1α、VEGF基因的表达。结果体外雷帕霉素可抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖,并下调人胃癌SGC-7901细胞HIF—1α、VEGF基因的表达。结论雷帕霉素可抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖,并且可能是通过下调人胃癌SGC-7901细胞HIF-1α、VEGF基因的表达而起到抑制作用的。 孔姝婧 高超 裴冬生 赵晶 朱艳卿 杨欢 李倩关键词:雷帕霉素 胃癌 缺氧诱导因子1Α 血管内皮生长因子 大鼠βB2-晶体蛋白的表达纯化及多克隆抗体的制备 被引量:2 2011年 目的表达并纯化βB2-晶体蛋白,制备其多克隆抗体,用以研究βB2-晶体蛋白聚合的机制。方法用RT-PCR的方法扩增了βB2-晶体蛋白的cDNA并克隆到原核表达载体pMON5473中。用萘啶酮酸诱导recA启动子后,蛋白质在大肠杆菌中得到了高效表达。表达的蛋白质用DEAE纤维素层析和凝胶过滤纯化,SDS-PAGE显示一条带。与佐剂混合后免疫新西兰大白兔。结果纯化了大鼠βB2-晶体蛋白,成功制备了其多克隆抗体。结论制备的多克隆抗体为下阶段的研究提供了重要的实验材料。 胡书群 裴冬生 陆梁 赵惠仁关键词:纯化 抗体 携带IL-24基因的溶瘤腺病毒诱导黑素瘤细胞凋亡 被引量:4 2010年 目的探讨携带IL-24基因的溶瘤腺病毒(ZD55-IL-24)诱导人黑素瘤A375细胞凋亡的作用。方法用PCR方法鉴定ZD55-IL-24,并大量扩增、纯化和病毒滴度测定。将ZD55-IL-24感染人黑素瘤A375细胞。结晶紫染色观察细胞毒性,MTr法测定细胞存活率,Western印迹检测溶瘤腺病毒E1A、IL-24基因蛋白表达。结果PCR鉴定表明ZD55-IL-24包含IL-24基因且没有野生型腺病毒污染;结晶紫染色结果表明ZD55-IL-24对A375细胞有明显的细胞毒性效应。M1Tr法结果显示,ZD55-IL-24对A375细胞的增殖抑制作用呈时间和浓度依赖性效应。Western印迹结果表明ZD55-IL-24能在A375细胞内高效表达E1A、IL-24基因。结论溶瘤腺病毒ZD55-IL-24能携带IL-24基因在黑素瘤A375细胞中高效表达,抑制细胞增殖并诱导其凋亡。 蒋冠 刘彦群 郑骏年 魏志平 毛立军 裴冬生关键词:黑色素瘤 溶瘤病毒 表达白细胞介素-18的结肠癌瘤苗抗肿瘤作用及其机制 2008年 目的观察表达人白细胞介素(hIL)-18的结肠癌移植瘤新生血管生成及肿瘤生长。方法0.1ml单克隆化的人结肠癌sw480细胞、携有绿色荧光蛋白表达质粒的pEGFP—sw480细胞、携有hIL-18基因表达质粒的hIL-18-pEGFP-sw480细胞(1×10^8个/ml)分别注射裸鼠,每组5只。ELASA法检测裸鼠血清IL-18含量;记录成瘤时间及瘤体大小;免疫组织化学法检测移植瘤组织VEGF、MMP-9及微血管密度(CD34表达);TUNEL法检测移植瘤组织凋亡。结果hIL-18-pEGFP—sw480组成瘤时间为(26.2±1.8)d,而pEGFP—sw480、sw480组分别为(14.8±2.8)d和(14.6±1.9)d。注射42d后,hIL-18-pEGFP—sw48组裸鼠血中IL-18含量为(63.58±13.75)ng/L。hIL-18-pEGFP—sw480、pEGFP—sw480、sw480组肿瘤平均体积(mm^3)分别为:336.39±28.50、1029.08±114.84、957.96±91.55。hIL-18-pEGFP-sw480组肿瘤明显小于sw480组和pEGFP-sw480组(P〈0.01)。微血管密度(CD34)分别为(9.08±4.01)、(32.48±8.84)、(33.32±3.39),MMP-9灰度值分别为143.2±6.8、114.6±5.4、110.2±5.9;VEGF灰度值分别为140.8±9.2、108.5±8.7、107.3±4.9,hIL-18-pEGFP-sw480组血管生成及促血管生成因子表达明显减少;hIL-18-pEGFP—sw480组凋亡细胞阳性率(30.32±7.23)%明显高于pEGFP—sw480组(6.32±1.18)%和sw480组(5.80±2.28)%(P〈0.01)。结论IL-18可明显减少裸鼠结肠癌sw480细胞移植瘤的血管生成,促进肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤生长。 徐为 符炜 薛亮 裴锐锋 郭贞 吾木扎克 刘俊杰 韩东 裴冬生 郑骏年关键词:结肠癌 白细胞介素18 基因治疗 多媒体技术在生物化学教学中的实践与探索 目的:介绍多媒体课件,不断完善多媒体教学.
方法:利用网络资源丰富教学内容并制作多媒体课件,使教学直观,易于理解.教学中扬长避短,认真备课,精心组织教学,注重课堂教学,优化教学环节,加强课后辅导.
结... 孙亚峰 裴冬生关键词:生物化学教学 多媒体技术 课堂教学 高等医学教育 文献传递 尿多酸肽对人肺腺癌A549细胞的作用及人肺腺癌A549细胞株E-cadherin基因甲基化的研究 被引量:9 2010年 目的探讨尿多酸肽(CDA-Ⅱ)对人肺腺癌A549细胞的作用及检测人肺腺癌A549细胞株E-cadherin基因甲基化的状况,寻找肺癌治疗的新靶点。方法采用MTT法检测不同浓度尿多酸肽作用下A549细胞的存活率。甲基化特异性PCR(MSP)检测人肺腺癌A549细胞株E-cadherin基因甲基化的状况。结果尿多酸肽显著抑制A549细胞生长,随着剂量的增加其抑制作用增强。A549细胞株存在E-cadherin基因异常甲基化,呈部分甲基化。结论尿多酸肽具有抑制A549细胞生长的作用,A549细胞株存在E-cadherin基因的异常甲基化。 王红兵 王亚丽 刘德生 徐海洋 裴冬生 祖茂衡关键词:尿多酸肽 A549细胞 甲基化特异性PCR 上皮钙黏附素 合成血红素加氧酶-1-shRNA载体的实验研究 2011年 根据Genebank提供的大鼠HO-1(Hmoxl,血红素加氧酶-1)基因序列,参照RNA干扰序列设计原则,设计针对HO-1的4个RNA干扰序列,定向克隆至表达载体pGPU6-GFP-Neo中,最后采用BamH I和Pst I酶切凝胶电泳鉴定。鉴定结果显示成功合成了荷载HO-1-shRNA的表达载体。 宋远见 刘红芝 杨冬芝 张璞 刘志安 裴冬生 宗志敏 魏贤勇关键词:HO-1基因 SHRNA表达质粒 靶向stathmin和mdr1基因逆转卵巢癌细胞紫杉醇耐药的研究 被引量:6 2011年 目的探讨以RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术靶向stathmin和mdr1基因逆转卵巢癌细胞紫杉醇耐药的可行性。方法分别构建靶向stathmin和mdr1基因的质粒:pGU6-GFP-neo-ST-MN1和pGU6-GFP-neo-MDR1;将质粒转染到卵巢癌紫杉醇耐药细胞株SKOV3/TAX。Real-ti me RT-PCR检测stathminm和mdr1的mRNA变化;Western blot检测其蛋白表达变化;荧光显微镜检测细胞凋亡情况;CCK-8法分析细胞对紫杉醇的敏感度。结果 Real-ti me RT-PCR及Western blot显示pGU6-GFP-neo-MDR1质粒对mdr1基因,pGU6-GFP-STMN1-294shRNA质粒对stathmin基因在mR-NA水平和蛋白水平均有明显抑制(P<0.05),荧光显微镜下共转染组细胞凋亡增多,CCK-8示共转染组逆转紫杉醇耐药效果最明显。结论体外RNAi可有效沉默卵巢癌紫杉醇耐药株SKOV3/TAX细胞内stathmin基因和mdr1基因,逆转其紫杉醇耐药。 肖玉洁 王红梅 韩正祥 高向阳 裴冬生 曾令宇 杜秀平关键词:RNAI STATHMIN 紫杉醇耐药 嵌合抗原受体G250-CD8-28BBZ的构建及表达 2013年 目的 构建嵌合抗原受体G250-CD8-28BBZ的慢病毒表达质粒,并研究该嵌合抗原受体在T细胞中的表达.方法 利用常规分子克隆技术将编码Igκ信号肽、抗G250单链抗体及信号结构CD8-28BBZ的编码序列拼接起来,并将得到的融合基因片段插入慢病毒表达载体pLVX-IRES-ZsGreen中,采用酶切及测序鉴定.慢病毒感染T细胞后,通过荧光显微镜、Western blot、流式细胞术检测G250-CD8-28BBZ在T细胞中的表达.结果 双酶切及测序结果显示重组质粒pLVX-G250-CD8-28BBZ构建正确;慢病毒感染后的T细胞能发出绿色荧光;T细胞表达的G250-CD8-28BBZ分子大小正确;慢病毒感染2周后,G250-CD8-28BBZ在T细胞中的阳性表达率为45.2%.结论 成功构建了嵌合抗原受体G250-CD8-28BBZ的慢病毒表达质粒,该嵌合抗原受体能够在T细胞内高效稳定表达. 张青 李彩红 杨洁 李慧忠 裴冬生 郑骏年关键词:肿瘤免疫治疗 G250 慢病毒 短暂性前脑缺血后CaMKⅡ.GluR6.PSD95信号模块在Ca2+/CaM依赖的蛋白激酶Ⅱ介导GluR6丝氨酸磷酸化中的作用 刘志安 许静 裴冬生 徐铁军