解美娜
- 作品数：1 被引量：5H指数：1
- 供职机构：烟台毓璜顶医院更多>>
- 发文基金：山东省科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重组人附睾特异表达蛋白ESC42及其生物学鉴定被引量：5
- 2005年
- 目的:利用基因工程技术合成出人附睾特异表达基因ESC42重组蛋白,为其功能研究提供材料。 方法: 从人附睾cDNA文库扩增出ESC42基因片段,构建原核表达载体,进行克隆、表达、蛋白质纯化及单克隆抗体制备; Western印迹鉴定纯化产物及其单克隆抗体的特异性;基质辅助激光解吸电离 飞行时间质谱(MALDI TOF MS)鉴 定ESC42蛋白相对分子质量(Mr)和肽质量指纹,用MS Fit软件查询NCBI数据库。 结果:获得rhESC42融合蛋 白纯度为99%;Mr为11978.12,制备出抗rhESC42单克隆抗体;质谱分析的数据覆盖了所预测氨基酸序列的48%, 且符合率为100%。在Expasy数据库中进行结构域扫描,发现ESC42属于β defensin家族,具有抗菌活性。 结 论:获得了高纯度且具有生物效应的rhESC42重组蛋白质,并从蛋白质水平对预测氨基酸序列进行了证实,为以后 的功能研究奠定基础。
- 沈肖方李建远王海燕薛江南曹奇志连培文陈辉解美娜
- 关键词：附睾大肠埃希菌生物学鉴定
