许磊
- 作品数：10 被引量：18H指数：3
- 供职机构：南京农业大学草业学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划新疆维吾尔自治区自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 新牧1号苜蓿两种抗逆相关启动子的功能分析被引量：3
- 2017年
- 前期已成功克隆了新牧1号苜蓿MvP5CS与MvNHX1基因和二者的启动子序列。在此基础上,本试验分别构建了含有Mvp5cs和Mvnhx1启动子的调控GUS报告基因的植物表达载体,并通过农杆菌介导法得到了含有Mvnhx1与Mvp5cs启动子的转基因烟草植株。PCR检测证明了两种启动子已稳定的整合到烟草基因组中;GUS组织染色证明两种启动子均具有启动基因表达的功能。通过测量GUS活性来探究两种不同的诱导型启动子在4种非生物胁迫下(干旱、盐、脱落酸、赤霉素)的表达活性。结果表明,1)Mvnhx1与Mvp5cs启动子均响应盐、脱落酸、赤霉素、干旱胁迫,与CaMV35S启动子相比,差异显著。2)Mvnhx1启动子在盐胁迫、脱落酸胁迫下所起诱导作用要优于Mvp5cs启动子。在48h100mmol/L、150mmol/L NaCl胁迫处理时,Mvnhx1启动子GUS活性分别是Mvp5cs启动子的2.03和3.23倍,差异显著。在25μmol/L、50μmol/L ABA处理下,Mvnhx1启动子的活性整体高于另两种启动子,差异显著。3)Mvp5cs启动子在干旱胁迫、赤霉素胁迫所起诱导作用优于Mvnhx1启动子。干旱胁迫时,Mvp5cs启动子的GUS活性在36h是同时间Mvnhx1启动子的2.22倍。70μmol/L GA处理时,Mvp5cs启动子在36h达到最大值,是同时间段Mvnhx1启动子的1.79倍。
- 晁朝霞任燕萍钱进姚正培许磊张桦
- 关键词：启动子非生物胁迫GUS活性
- 鹰嘴豆的RAPD品种鉴定和聚类分析被引量：5
- 2008年
- 用CTAB法提取了6种鹰嘴豆品种总DNA，使用RAPD技术对其进行了品种鉴定。从113种随机引物中筛选出7种扩增较稳定的引物。来扩增6种嘴豆品种总DNA，共扩增出29条带，每种引物扩增出3-7条带；多态性条带共16条，多态性比例为55.17％。利用DPS软件所做的统计分析和聚类分析结果表明6个品种间的相似系数在0.4286-0.8462，平均相似系数为0.6416；可聚成2类：165号、阿克苏号、阿瓦提号可聚为A类；88-1号、176号、185号可聚为B类，同一类品种间体现了一定的相关性。
- 许磊王希东张桦石庆华
- 关键词：鹰嘴豆RAPD聚类分析
- 骆驼蓬总RNA的4种提取方法比较被引量：3
- 2010年
- 以骆驼蓬(Peganum harmala L.)为材料,采用植物总RNA提取试剂盒法(TIANGEN)、TRIZOL试剂盒法(TIANGEN)、SDS-异丙醇法、CTAB-LiCl法提取总RNA,比较4种方法提取总RNA的得率和纯度。结果表明:CTAB-LiCl法效果最好,电泳条带清晰,RNA完整性好,28S条带亮度约是18S的2倍,所提RNA的OD260/OD280的值在1.80～2.0之间。经RT-PCR获得了600bp大小的特异条带,说明利用改良的CTAB-LiCl法从骆驼蓬中提取到的RNA质量高、完整性好,完全适合于进一步的分子生物学研究。
- 石庆华代培红许磊
- 关键词：骆驼蓬总RNA提取
- 新牧1号苜蓿MvDREB基因的克隆和序列分析
- 2014年
- 以新牧1号苜蓿为研究材料,采用RT-PCR方法,设计特异引物,从新牧1号苜蓿中克隆获得MvDREB基因cDNA,测序结果该片段全长为651 bp,Genbank登录号为GU073286.生物信息学分析结果表明,该基因序列与紫花苜蓿核苷酸序列相似度达99%,编码216个氨基酸,MvDREB蛋白氨基酸序列分析比对显示该蛋白属于AP2/ERF家族的亲水性核蛋白,蛋白质分子量为24873.1,理论等电点pI为5.90,不稳定参数为45.07.
- 帕尔哈提.阿布都克日木许磊朱超努尔凯麦尔.木拉提张桦
- 半定量RT-PCR方法检测NaCl胁迫下杂花苜蓿mvNHX基因表达及体系优化
- 2010年
- 【目的】优化半定量RT-PCR反应体系,并用优化体系检测杂花苜蓿mvNHX基因的表达情况。【方法】提取用150 mmol/L盐浓度、处理不同时间的苜蓿叶片组织总RNA;反转录得到cDNA;利用优化半定量RT-PCR法检测。【结果】检测到mvNHX基因随胁迫时间基因表达量总体上逐渐升高。【结论】通过半定量RT-PCR法检测基因在胁迫条件的表达量的变化。同时对该方法进行优化,为进一步研究该基因克隆及其功能验证奠定了一定的实验基础。
- 许磊石庆华代培红杨云尧王永超张桦
- 关键词：半定量RT-PCR盐胁迫
- 鹰嘴豆Na+/H+逆向转运蛋白CarNHX1基因克隆与提高烟草耐盐性的研究
- 鹰嘴豆（Cicer arietinum Linn.）为豆科草本植物,起源于亚洲西部和近东地区。是世界上栽培面积较大的豆类,其营养价值丰富。同时有极耐旱、耐盐碱的特点,对于我国西北、西南和其他广大干旱、半干旱地区的开发有重...
- 许磊
- 关键词：鹰嘴豆转基因
- 文献传递
- 刺山柑(Capparis spinosa L.)基因组DNA提取方法的比较被引量：2
- 2010年
- 【目的】为获得野生刺山柑DNA提取的最佳方法。【方法】以野生刺山柑叶片为材料,采用CTAB法、SDS-CTAB法、SDS法和尿素法提取了3个不同地方采集的野生刺山柑DNA。【结果】通过A260/A280、琼脂糖电泳法对所提取的DNA质量进行检验,将其纯度、完整性、得率及耗时等方面进行比较。【结论】4种方法提取DNA结果比较显示,CTAB法是野生刺山柑DNA提取的最佳方法。
- 石庆华代培红许磊石书兵
- 关键词：刺山柑DNACTAB法SDS法尿素法
- 黄花苜蓿MfNHX基因和MfP5 CS基因的克隆和序列分析被引量：2
- 2010年
- 【目的】获得黄花苜蓿(Medicago falcata L.)的MfNHX基因和MfP5CS基因,并对这两个基因进行序列分析。【方法】利用Trizol总RNA提取试剂盒提取了新疆野生黄花苜蓿的总RNA,并用特异引物对其进行RT-PCR扩增,将得到的cDNA片段连接到pMD19-T载体上,最后将该载体转化大肠杆菌DH5α,并对阳性克隆进行了序列分析。【结果】MfNHX基因全长1 626 bp,Genbank登录号为GU265772;MfP5CS基因全长2 148 bp,Genbank登录号为GU180149。它们与紫花苜蓿核苷酸序列的同源性分别为99.63%和97.63%,与新牧1号杂花苜蓿核苷酸序列的同源性分别为99.45%和98.84%。【结论】研究已经获得MfNHX基因和MfP5CS基因,为进一步进行苜蓿抗逆境胁迫的研究奠定了基础。
- 曾光石庆华张博许磊陈全家张桦
- 关键词：黄花苜蓿克隆
- 一种干旱和盐诱导特异性启动子及其应用
- 本发明公开了一种干旱和盐诱导特异性启动子及其应用，涉及基因工程领域。本发明提供的干旱和盐诱导特异性启动子是具有如下所述任一序列的DNA分子：(1)序列表中序列1-1429位核苷酸所示的DNA分子；(2)在严格条件下与(1...
- 张桦钱进任燕萍曲延英许磊
- 文献传递
- 4种提取鹰嘴豆基因组DNA方法的比较被引量：3
- 2009年
- 采用CTAB法、SDS-CTAB法、SDS法、尿素法4种方法对鹰嘴豆DNA进行提取,并从电泳结果、纯度、得率等方面对其进行比较研究,从而确定鹰嘴豆DNA提取适用流程。所提DNA纯度为:CTAB法>SDS-CTAB法>SDS法>尿素法;所提DNA的浓度(μg/mL)为:SDS-CTAB法>CTAB法>SDS法>尿素法。综合分析,CTAB法是提取鹰嘴豆DNA的最佳方法。
- 石庆华姚正培张桦许磊代培红
- 关键词：鹰嘴豆CTAB法SDS法尿素法
