赵铁军
- 作品数:7 被引量:19H指数:3
- 供职机构:南开大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金天津市科技发展战略研究计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 间充质干细胞对肿瘤细胞信号传导途径和转录调控的影响
- 赵铁军
- 关键词:间充质干细胞肿瘤细胞WNT途径转录调控因子
- d-尼古丁对血管平滑肌细胞迁移的影响被引量:5
- 2005年
- 为了在分子水平上揭示吸烟导致动脉粥样硬化的机制,探讨了烟草致病的主要成分d-尼古丁对豚鼠大脑基底动脉血管平滑肌细胞GbaSM-4迁移作用的影响。应用Boyden小室实验发现,d-尼古丁具有促进GbaSM-4细胞迁移的作用。免疫荧光染色显示,在d-尼古丁作用下有GbaSM-4细胞伪足内肌动蛋白表达和分布增加的现象。为了进一步阐明d-尼古丁促进平滑肌细胞迁移作用的分子机制,应用RT-PCR方法检测到在GbaSM-4细胞内有α7型烟碱乙酰胆碱受体的表达。应用烟碱乙酰胆碱受体的特异性抑制剂甲基牛扁碱和肌肉收缩的关键酶——肌球蛋白轻链激酶(myosinlightchainkinase,MLCK)抑制剂ML-9作用GbaSM-4细胞后,发现d-尼古丁对GbaSM-4细胞的诱导迁移作用被明显的抑制。采用RNA干扰技术,成功地使GbaSM-4细胞内MLCK的表达水平下调,观察到d-尼古丁对GbaSM-4细胞的诱导迁移作用也被明显的抑制。上述研究结果表明,d-尼古丁以趋化因子的作用促进血管平滑肌细胞迁移,其分子机制可能与α7型烟碱乙酰胆碱受体和MLCK等因素有关,这一发现为揭示吸烟导致动脉粥样硬化提供了实验依据。
- 叶丽虹赵铁军张晓东李胜
- 关键词:血管平滑肌细胞烟碱乙酰胆碱受体肌球蛋白轻链激酶尼古丁乙酰胆碱受体RT-PCR方法
- 平滑肌细胞迁移的肌球蛋白轻链非磷酸化途径被引量:5
- 2005年
- 为了阐明平滑肌细胞迁移存在肌球蛋白轻链非磷酸化调节途径,研究花生四烯酸(arachidonicacid,AA)对肌球蛋白轻链非磷酸化状态下平滑肌细胞迁移的影响及其相关的信号传导途径.经Boyden小室跨膜迁移实验发现,AA对培养的兔血管平滑肌SM3细胞具有明显的诱导迁移作用.然而,当预先用10μmolL肌球蛋白轻链激酶(myosinlightchainkinase,MLCK)特异性抑制剂ML7作用SM3细胞后,发现AA对SM3细胞仍然具有明显的诱导迁移作用,并呈剂量依赖性,这种诱导作用可被细胞外信号调节激酶12(ERK12)的特异性抑制剂PD98059或磷脂酶C(PLC)的特异性抑制剂U73122所拮抗.此外,Ⅱ型肌球蛋白抑制剂blebbistatin(BLB)可部分抑制“非磷酸化”状态下AA的诱导迁移作用.经Western印迹检测显示,10μmolLML7可完全抑制SM3细胞中20kD肌球蛋白轻链(MLC20)磷酸化,并且加入AA后MLC20仍为非磷酸化状态.应用免疫荧光染色法观察肌动蛋白在SM3细胞中分布的变化,发现在AA作用下肌动蛋白呈细胞边缘聚集现象,有伪足形成,细胞形态表现为迁移状态.预先用ML7作用后再加入AA,肌动蛋白的分布与上述结果相同.研究结果初步表明,在平滑肌细胞迁移的作用途径中,在MLC磷酸化调节途径受到抑制时,AA可诱导MLC非磷酸化的平滑肌细胞发生迁移,其分子机理可能与ERK12和PLC信号传导途径有关,非磷酸化的肌球蛋白直接参与了该迁移过程.
- 叶丽虹郭威赵铁军张伟英叶婷婷吴晶辉张晓东
- 关键词:花生四烯酸平滑肌细胞肌球蛋白轻链激酶迁移
- 肌球蛋白轻链激酶对平滑肌细胞功能的基因调控作用
- 叶丽虹张晓东郭威赵铁军张伟英
- 为阐明在培养的平滑肌活细胞内存在“肌球蛋白轻链非链磷酸化”调节途径,研究了花生四烯酸(AA)等因子在肌球蛋白轻链非磷酸化状态下对平滑肌细胞迁移的影响及其相关的信号途径。主要发现当预先用肌球蛋白轻链激酶(MLCK)特异性抑...
- 关键词:
- 关键词:肌球蛋白轻链激酶平滑肌细胞基因调控
- 人肝干细胞对肝癌细胞表型影响的初步研究
- 张晓东叶丽虹徐治立乔玲赵铁军谭旭蔡娜
- 一、体外培养和扩增人干细胞的研究:建立了体外培养和扩增人干细胞的技术平台,已获得胎儿骨髓间充质干细胞(BMMS-03)和脐带血干细胞。在应用流式细胞仪对干细胞标志物进行了生物学鉴定,结果显示,符合间充质干细胞特征;完成了...
- 关键词:
- 关键词:肝癌肝干细胞细胞表型信号途径
- 一种骨髓间充质干细胞的分离及培养方法
- 本发明公开了一种骨髓间充质干细胞的分离及培养方法,与以往的方法相比,本法操作更为简便,同时由于采用了部分换液的方法,从而使培养细胞所需时间缩短,分离得到的间充质干细胞纯度较高,增殖较快。本发明方法所得细胞形态均一,呈长梭...
- 张晓东叶丽虹徐治立赵铁军
- 文献传递
- 人间充质干细胞抑制肝癌细胞增殖的作用及其基因表达谱分析被引量:10
- 2007年
- 干细胞移植治疗肿瘤具有重要的临床价值.应用人间充质干细胞条件培养液作用H7402肝癌细胞,拟探讨间充质干细胞对肿瘤细胞的抑制作用,为今后应用人间充质干细胞进行肿瘤细胞治疗奠定理论基础.应用胎儿真皮来源的Z3间充质干细胞和胎儿骨髓来源的BMMS-03间充质干细胞的条件培养液作用于H7402肝癌细胞,采用软琼脂克隆形成实验、流式细胞仪技术、基因芯片技术和免疫印迹技术观察H7402细胞的克隆形成、增殖和基因表达谱变化.结果显示,H7402细胞在间充质干细胞条件培养液作用下,克隆形成和增殖受到了明显抑制;基因芯片检测结果显示,H7402细胞在间充质干细胞条件培养液作用下有23个基因上调表达,17个基因下调表达,这些差异表达的基因与细胞的转录调控、新陈代谢、信号转导、细胞周期、应激反应和细胞粘附等功能相关.本实验结果表明,人间充质干细胞对H7402肝癌细胞的克隆形成和增殖具有抑制作用,并有多种基因的表达发生改变,这些基因表达的改变可能参与了对上述肿瘤细胞的抑制.
- 乔玲赵铁军山长亮叶丽虹张晓东
- 关键词:间充质干细胞肝癌细胞克隆形成增殖基因表达