郭思佳
- 作品数：5 被引量：15H指数：3
- 供职机构：安徽医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肾小管上皮-间质细胞转分化模型的建立被引量：7
- 2013年
- 目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)在人肾小管上皮细胞转分化中的作用,建立肾小管上皮-间质细胞转分化(TEMT)模型。方法实验分为正常对照组和TGF-β1处理组,利用TGF-β1处理人肾小管上皮细胞(HK-2)24 h,分别应用Western blot和免疫荧光方法检测上皮细胞和间质细胞分子标记的表达变化;应用划痕和Transwell assay方法检测细胞迁移及侵袭能力。结果与正常对照组比较,TGF-β1处理组HK-2细胞呈梭形,上皮细胞标记分子E-cadherin表达减弱,差异有统计学意义(P<0.01),间质细胞标记分子骨架蛋白Vimentin和β-catenin表达增强,差异有统计学意义(P<0.01);细胞的迁移及侵袭能力亦明显增强。结论 TGF-β1刺激后HK-2细胞促进上皮细胞转化为间质细胞。
- 陈芳成芳项倩彤郭思佳查晓军王德光周海胜
- 关键词：肾间质纤维化肾小管上皮细胞转分化转化生长因子Β1
- 雷帕霉素对皮肤鳞癌细胞体外转移潜能的影响被引量：3
- 2014年
- 目的研究雷帕霉素(rapamycin,RAPA)在体外对上皮鳞癌细胞系A431的增殖、迁移以及侵袭能力的影响。方法体外培养人上皮鳞癌细胞A431,通过噻唑蓝(MTT)实验检测不同浓度的RAPA(5、10、20 nmol·L-1)对A431增殖的影响,并筛选出最适浓度。依此浓度分别通过划痕、Transwell试验检测A431的迁移和侵袭能力变化。经RAPA处理后,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测A431中骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的mRNA和蛋白的表达水平的变化。结果 MTT实验结果显示不同浓度RAPA对A431增殖有抑制作用,且表现浓度依赖性。RAPA作用于A431细胞48 h后,划痕实验及Transwell实验显示A431的迁移和侵袭能力受到明显抑制。RT-PCR和Western blot结果都显示RAPA处理的A431细胞中OPN的表达下调。结论 RAPA可降低鳞癌细胞A431的增殖、迁移以及侵袭能力,其机制可能与RAPA抑制OPN的表达有关。
- 郭思佳查晓军周海胜
- 关键词：雷帕霉素骨桥蛋白细胞增殖细胞侵袭
- 雷帕霉素对皮肤鳞癌细胞转移潜能的影响
- 背景和目的：雷帕霉素(Rapamycin,RAPA)是从吸水性链霉菌的发酵液中提取出来的一种新型大环内酯类免疫抑制剂。它可与磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物 RAPA靶体蛋白(PI3K/AKT/mTOR)信号通路下...
- 郭思佳
- 关键词：皮肤鳞癌雷帕霉素细胞转移抗肿瘤效果促凋亡作用
- 文献传递
- 转录因子GRHL3促进皮肤鳞癌细胞迁移和侵袭被引量：3
- 2019年
- 目的研究转录因子果蝇头状因子3(GRHL3)对皮肤鳞癌(SCC)细胞系A431细胞迁移和侵袭的影响。方法利用免疫组织化学检测皮肤癌组织GRHL3表达,分析皮肤鳞状细胞癌中GRHL3表达水平与临床病理分期的关系;利用脂质体介导GRHL3过表达载体转染A431细胞,建立过量表达GRHL3的A431细胞系;通过Transwell检测GRHL3对A431细胞迁移和侵袭能力的影响;利用表达谱芯片技术分析过量表达GRHL3对A431细胞迁移、侵袭等相关基因表达变化;采用染色质免疫共沉淀-测序(ChI P-seq)的方法分析GRHL3调控的靶基因及GRHL3的结合位点;比较基因表达谱芯片和染色质免疫共沉淀-测序的结果,以确定GRHL3参与调控细胞迁移和侵袭相关的靶基因。结果免疫组化结果显示SCC组织及癌旁组织GRHL3表达水平较正常皮肤组织明显增加,且与临床病理分期有关;Western blot结果证实GRHL3在A431细胞过量表达,由此成功建立稳定过量表达GRHL3的A431细胞株;Transwell侵袭和迁移试验显示GRHL3过量表达增强了A431细胞迁移和侵袭能力;表达谱芯片结果显示有128个基因与细胞运动和黏附相关;ChI Pseq结果显示GRHL3结合基因组DNA的主要位置是在基因间区(55. 65%),而只有2. 49%分布于结构基因的启动子区域;表达谱芯片显示差异表达的128个基因和ChI P-seq显示的GRHL3调控149个候选基因,均与细胞迁移和侵袭有关,其中有26个基因具有一致性。提示GRHL3通过调控26个候选基因促进皮肤鳞癌细胞的迁移和侵袭。结论 GRHL3通过调控皮肤鳞癌细胞的与迁移和侵袭相关基因表达,促进细胞迁移和侵袭,有助于后续研究GRHL3调控肿瘤细胞迁移和侵袭的分子机制。
- 邓庆梅周利利郭思佳陈津津郭立钰曾凡军周海胜
- 关键词：皮肤鳞癌A431迁移
- 转录因子GRHL3抑制SNX16表达促进乳腺癌细胞迁移和侵袭被引量：3
- 2019年
- 目的研究转录因子GRHL3参与调控分拣连接蛋白16(SNX16)表达的分子机制及其对乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响。方法免疫组织化学检测乳腺癌组织和癌旁组织中GRHL3和SNX16的表达变化;通过建立过量表达GRHL3的乳腺癌细胞MCF7,Western blot检测GRHL3、SNX16在MCF7细胞中表达变化;利用分子克隆技术构建含有SNX16基因启动子和突变的SNX16基因启动子的荧光素酶报告基因表达载体,通过检测荧光素酶活性变化观察GRHL3对SNX16基因启动子的调控作用;利用Transwell迁移和侵袭实验检测GRHL3过量表达的MCF7细胞迁移和侵袭能力的影响,并通过转染SNX16 cDNA的表达载体回补SNX16表达,观察MCF7细胞的迁移和侵袭能力变化。结果免疫组织化学结果显示:与癌旁组织相比,乳腺癌组织中GRHL3高水平表达,而SNX16的表达水平较低;Western blot结果显示,过量表达GRHL3的MCF7,SNX16的表达水平显著降低(P<0.05);通过分子克隆技术成功构建SNX16基因启动子和突变的SNX16基因启动子的荧光素酶报告基因表达载体;荧光素酶活性检测实验结果显示GRHL3对荧光素酶报告基因SNX16启动子具有显著抑制作用,突变后GRHL3结合位点,GRHL3对SNX16基因启动子的负调控作用消失;Transwell迁移和侵袭实验结果说明过表达GRHL3的MCF7细胞侵袭和迁移能力显著增强,回补SNX16后,MCF7细胞侵袭和迁移能力明显减弱。结论在乳腺癌细胞中,转录因子GRHL3对SNX16的启动子具有负调控作用,GRHL3通过结合SNX16基因启动子抑制SNX16表达,促进细胞的迁移和侵袭。
- 周利利曾凡军涂珍珍涂珍珍郭思佳郭思佳周海胜
- 关键词：乳腺癌迁移
