阮艳
- 作品数:4 被引量:5H指数:1
- 供职机构:第三军医大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 过表达癌基因Bmi-1促进鼠源胚胎干细胞自我更新
- 胚胎干细胞(embryoluc stem cells ESCs)是具有无限自我更新能力和多向分化潜能的细胞,其既可通过对称分裂保持不分化状态,也可分化形成如淋巴细胞、造血细胞、神经细胞等多种细胞。ES细胞自我更新必定要依...
- 阮艳
- 关键词:癌基因BMI-1基因胚胎干细胞
- 文献传递
- Bmi-1调节干性相关分子转录的初步分析被引量:3
- 2009年
- 目的探讨Bmi-1对肿瘤及胚胎干细胞中干性相关分子转录表达的影响。方法分别构建鼠源和人源Bmi-1过表达载体pCI-GFP-mbmi1和pCI-GFP-hbmi1;瞬时转染鼠ES细胞CCE和人神经胶质瘤细胞U87;半定量RT-PCR检测胚胎干细胞中Oct-4、Nanog、c-Myc、Klf4和Sox2及肿瘤细胞中CD133、Nestin等干性分子的表达;克隆形成实验检测CCE细胞自我更新克隆形成能力。结果瞬时转染Bmi-1过表达载体后,CCE细胞中Nanog的表达上调,Oct-4、Sox2和Klf4的表达无明显变化;U87细胞中Nestin和Oct-4表达上调,CD133、Nanog变化不明显;两者c-Myc的转录表达均显著降低;过表达Bmi-1促进CCE细胞自我更新克隆形成。结论Bmi-1参与了对肿瘤及胚胎干细胞中干性相关分子的转录调节。
- 阮艳蹇锐程小星牛翰婕周恒宇郑宏庭胡福泉
- 关键词:BMI-1干细胞转录调控
- 正常肺上皮细胞致瘤性转化中抑癌基因的全基因组筛选及数据库验证被引量:1
- 2022年
- 目的利用CRISPR/Cas9敲除文库在人正常肺上皮细胞致瘤性转化过程中进行全基因组筛选,以发现新的人肺癌抑癌基因,并利用临床非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)样本数据库进行初步验证。方法构建稳定表达Cas9蛋白的人正常肺上皮BEAS-2B细胞系,在该细胞中感染含有77441个单链向导RNA(sgRNA)、靶向19114个人类基因的Brunello慢病毒文库,于裸鼠皮下移植。提取全瘤体细胞(Tumor)及移植前细胞(Input)的全基因组DNA,扩增sgRNA序列,建库进行深度测序。通过分析Tumor中sgRNA读数占比及Tumor与Input中sgRNA读数差异倍数的改变,筛选功能缺失后诱导BEAS-2B细胞致瘤性转化的抑癌基因,并利用公共数据平台进行初步验证。结果成功在稳定表达Cas9蛋白的BEAS-2B细胞中进行了文库感染及裸鼠皮下成瘤实验。只有感染文库的细胞在部分接种位点成瘤。测序结果显示Tumor中只检测到少数sgRNA,选取sgRNA的读数占总读数的比例>1%或有2个及以上sgRNA被显著富集的38个基因为有效的人肺癌候选抑癌基因,包括NF2、PTEN等已知抑癌基因及未在肺癌中报道过的候选抑癌基因,如AP2M1、PSENEN等。富集分析发现候选抑癌基因在Notch和Hippo信号等参与癌症发生的关键生物学通路中富集。应用临床NSCLC样本数据库证实38个候选抑癌基因在NSCLC样本中均发生了突变,其中突变率>2%的17个基因中有14个与KRAS或TP53发生共突变,3个突变与预后相关;30个基因在NSCLC样本中的表达水平与正常癌旁组织有明显差异,17个基因的表达水平与患者的预后密切相关。结论利用体内全基因组CRISPR/Cas9技术筛选出38个人肺癌候选抑癌基因,并在临床NSCLC样本数据库中得到了初步验证。
- 赵斌瑜张俊磊王加琪阮艳张月刘恋恋蹇锐熊加祥姚忠祥
- 关键词:抑癌基因肺癌
- 磷脂酶C与葡萄糖刺激的胰岛素分泌被引量:1
- 2009年
- 磷脂酶C(phospholipase C,PLC)是磷脂酰肌醇信号通路的关键酶,在体内分布极为广泛。许多细胞外信息分子,如激素、神经递质、免疫球蛋白、细胞因子、生长因子等都可以激活磷脂酰肌醇特异性PLCs。至今已鉴定出15种PLCs亚型。而每种PLCs亚型的特异分布和独特生理作用使得近年来对PLCs亚型的结构、功能、活化机制的研究成为热点。
- 周恒宇邓华聪蹇锐阮艳袁媛郑宏庭
- 关键词:磷脂酶C胰岛素分泌磷脂酰肌醇免疫球蛋白信号通路信息分子