陈义辉
- 作品数：9 被引量：8H指数：2
- 供职机构：四川大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省国际科技合作与交流研究计划项目国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 沉默猪白细胞介素10基因对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染的影响
- 研究藏猪免疫细胞中IL-10 基因表达抑制后对RNA 病毒感染及其免疫应答的影响,本实验构建和筛选了抑制猪IL-10 基因表达的shRNA 干扰分子及其表达载体,并以新型的壳聚糖接枝聚乙二醇和聚乙烯亚胺修饰分子(CS-N...
- 田永帅陈义辉刘珺万小平杨鑫王红宁高荣
- 关键词：基因猪繁殖与呼吸综合症病毒免疫细胞
- 藏猪和约克夏猪免疫相关组织中免疫基因表达水平的比较
- 引言/目的细胞因子在免疫应答和抗病遗传中起着十分关键性的重要作用。为了系统比较中国特有高原地方猪种(藏猪)与外来猪种(约克夏猪)的免疫机能和应答反应特征,探讨它们之间的差异性及其特点,为确定和利用藏猪高抗病力和耐逆性的遗...
- 程驰孙文魁陈义辉王晔高荣
- 关键词：细胞因子荧光定量PCR转录水平
- pBD-1和PR-39基因在藏猪与约克夏猪免疫组织中的表达水平的比较研究被引量：3
- 2014年
- β-防御素1和抗菌肽PR-39在动物固有免疫中起重要作用。本实验采用实时荧光定量PCR对6周、12周和24周龄的藏猪和约克夏猪的胸腺、血液、脾脏、扁桃体、肺门淋巴结和肠系膜淋巴结中的p BD-1和PR-39 mRNA表达规律及水平进行比较。结果表明:在两种猪的所有组织中均能检测出p BD-1与PR-39 mRNA,且p BD-1与PR-39mRNA水平呈先升高后略降的时序表达模式;在不同组织中,p BD-1mRNA在两种猪的扁桃体中高表达,而PR-39mRNA在肠系膜淋巴结中高表达,二者在脾脏中低表达;与约克夏猪相比,藏猪血液、扁桃体和肠系膜淋巴结中的p BD-1和PR-39 mRNA表达量高(P<0.05),在12周和24周龄肺门淋巴结中p BD-1mRNA低(P<0.05),在胸腺和脾脏中无显著性差异(P>0.05)。说明p BD-1和PR-39mRNA在猪的免疫组织器官中均能表达并且其表达量具有组织偏好性、时序性和品种差异;与约克夏猪相比,藏猪多个免疫组织中p BD-1和PR-39mRNA高表达(P<0.05)可能与藏猪较强的抗病力和耐逆性有关。
- 程驰孙文魁陈义辉王晔李江凌刘锐高荣
- 关键词：荧光定量PCR转录
- shRNA沉默猪白细胞介素-10及其受体基因对PRRSV复制和免疫应答的影响
- 引言猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是动脉病毒属的一种高致病性单链RNA病毒,给全球的养猪产业带来了巨大的损失。研究表明PRRSV诱导白细胞介素-10(IL-10)增加而抑制机体抗病毒免疫应答,是它感染致病的重要机理...
- 王晔陈义辉汪伟万小平肖永乐高荣
- 关键词：藏猪短发夹RNA
- 共表达猪IL-2与融合抗菌肽重组质粒的构建及其小鼠免疫效应研究被引量：1
- 2018年
- 为研制新型高效安全的动物免疫调节剂,本实验采用In-fusion克隆技术、2Aself-cleavage技术构建pVAX1融合抗菌肽与白细胞介素2基因真核共表达载体:CAM PS-2A-IL2(VAP2)。构建的重组质粒用壳聚糖包裹并转染HEK293细胞,通过猪外周血淋巴细胞刺激实验检测表达上清活性。将包裹的重组质粒纳米颗粒腹腔注射接种4周龄的雌性昆明小鼠作体内生物学活性研究。并于28d后用大肠杆菌(Amp、Kana高耐受)和金黄色葡萄球菌(Amp、Kana高耐受)进行攻毒试验,观察每组小鼠的发病率和死亡率。实验结果表明VAP、VAP2两实验组CD^(4+)、CD^(8+)细胞,IgG,IgG1,IgG2a含量以及TLR s,IFN-r等免疫相关因子的表达水平均明显高于对照组pVAX1(P<0.05)。而且两实验组相比较,VAP2组明显高于VAP组(P<0.05)。以上实验结果表明,CS包裹的VAP,VAP2能有效防止病原微生物感染小鼠,增强机体的体液免疫和细胞免疫能力,并且VAP2的作用要明显优于单一抗菌肽融合基因,表明抗菌肽融合基因与白细胞介素2的共表达对动物有更好的保护效应,这为研究新型有效的免疫分子以增强机体对感染的抵抗力奠定了基础,具有重要的学术价值和应用。
- 熊泰特万小平陈建林肖永乐陈义辉熊旗李江淩吕学斌王泽洲高荣
- 关键词：抗菌肽白介素2共表达小鼠
- shRNA沉默转化生长因子-β1及其受体对猪繁殖与呼吸综合征病毒在体外的复制及免疫应答的影响
- 引言猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是动脉病毒属的单链RNA病毒,它能利用免疫抑制因子扰乱宿主对病原的应答。研究表明TGF-β在PRRSV建立感染并致病的过程中起着重要作用。有研究成功地将RNA干扰技术(RNAi)应...
- 陈义辉王晔汪伟万小平高荣
- 关键词：藏猪转化生长因子猪繁殖与呼吸综合征病毒
- 猪白细胞介素2与融合白细胞介素4/6基因共表达的免疫效应研究被引量：2
- 2014年
- 目的构建猪融合白细胞介素4/6与猪白细胞介素2基因的共表达载体,研究其共表达对小鼠免疫的协同效应。方法以2A自剪接技术首次构建猪融合白细胞介素4/6与白细胞介素2基因的共表达重组质粒,以壳聚糖纳米材料包裹制成纳米颗粒,进行体外转染HEK293细胞,提取总RNA进行RT-PCR分析,最后肌肉注射小鼠进行体内实验并分析。结果成功构建了重组共表达质粒VRIL4/6-2;壳聚糖包裹后转染HEK293细胞,48 h后收集细胞,RT-PCR检测显示目的基因能够在HEK293细胞中高效地转录与表达。小鼠接种实验结果表明,实验组血清中的IgG和IgG2a的含量比对照组显著增加,并且VRIL4/6-2-CS接种组的小鼠体液免疫水平明显增高(P<0.05);VRIL4/6-2实验组的CD4+淋巴细胞显著多于其它实验组(P<0.05);实验组IL-2、IL-4、IL-6、IL-23基因的表达水平明显高于对照组(P<0.05),实验组小鼠外周血白细胞、血小板和血红蛋白的含量均显著高于对照组(P<0.05)。结论 VRIL4/6-2共表达质粒能够更好的增强动物体液免疫和细胞免疫机能,可作为提高动物体液免疫和细胞免疫的经济高效安全新型免疫调节剂,具有潜在的重要应用前景。
- 杨璐一肖永乐万小平罗公明王晔陈义辉孙文魁高荣
- 关键词：共表达免疫
- 沉默猪白细胞介素10基因对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染的影响
- 为了研究藏猪免疫细胞中IL-10基因表达抑制后对RNA病毒感染及其免疫应答的影响,本实验构建和筛选了抑制猪IL-10基因表达的shRNA干扰分子及其表达载体,并以新型的壳聚糖接枝聚乙二醇和聚乙烯亚胺修饰分子(CS-N-P...
- 田永帅陈义辉刘珺万小平杨鑫王红宁高荣
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合症病毒免疫细胞
- 文献传递
- 沉默白细胞介素10基因对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染的影响被引量：2
- 2012年
- 为了研究藏猪免疫细胞中IL-10基因表达抑制后对RNA病毒感染及其免疫应答的影响,本实验构建和筛选了抑制猪IL-10基因表达的shRNA干扰分子及其表达载体,并以新型的壳聚糖接枝聚乙二醇和聚乙烯亚胺修饰分子(CS-N-PEI-PEG)通过离子交联法进行分子包装,制备DNA-壳聚糖纳米分子,体外转染藏猪免疫细胞,观察猪繁殖和呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)诱导免疫细胞IL-10基因的表达及其增殖感染水平.实验结果表明:与未转染纳米分子或者纳米分子不表达shRNA的空白对照组相比较,shRNA实验组的IL-10基因表达在24～72h内明显抑制(P<0.05),免疫细胞中PRRSV的增殖水平显著下降(P<0.05);同时IL-2、IL-4、IL-6和IFN-γ基因的mRNA水平明显升高(P<0.05).这些提示IL-10的shRNA转染能使免疫细胞的抗感染能力显著增强,甚至可完全抑制PRRSV的复制.
- 田永帅陈义辉刘珺万小平杨鑫王红宁高荣
- 关键词：RNA干扰猪繁殖与呼吸综合征病毒免疫细胞
