陈克铨
- 作品数：20 被引量：80H指数：5
- 供职机构：北京协和医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金“九五”国家攀登计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学经济管理更多>>
- 红细胞分化去核因子:哺乳类红细胞终末分化/肿瘤抑制的调节因子家族及其相关基因的克隆被引量：4
- 2000年
- 本文报道哺乳类红细胞终末分化去核因子 (EDDF)调控恶性骨髓瘤细胞的分化以及与 EDDF相关的基因克隆的系列研究结果。以不同分化期哺乳类红细胞为研究对象 ,观察红细胞自然排核前后的细胞形态变化和与之互为对应的物质代谢的改变 ,分析 EDDF与终末分化、核浓缩及自然排核的可能关系 ;用自建的红细胞胞质体杂交模型 ,分别对红白血病和非红系的骨髓瘤细胞进行同种和异种的细胞杂交实验以验证 EDDF的作用规律。结果表明 ,哺乳类红细胞在终末分化不同阶段存在时相相关的分化去核因子家族。这些因子可调控不同分化阶段相关基因的活动 ,且呈时序性出现 ,与血红蛋白表达、细胞核停止分裂转向分化、核偏位、核浓 (固 )缩和自然去核等终末分化特征呈现明显的因果关系。 EDDF活性蛋白可逆转体外培养的肿瘤细胞系 (MEL,K5 6 2 )的恶性生长及诱导终末分化。在上述基础上分别采用不同的分离、提纯及基因克隆路线 ,从人和小鼠红细胞中连续克隆到 5种分化相关基因家族 (MEDDF,HEDDF- 1,HEDRF- 1,HEDRF- 2 ,HCNBP- 1)及其全长序列 ,并经 Gen Bank证实 ,它们均为无同源的新基因序列。
- 薛社普刘友华张世馥马文丽王鑫费仁仁杜权章正琰章静波陈克铨周建平马静韩代书
- 关键词：终末分化基因克隆
- 人白血病突变株红细胞胞质杂交体的建立及在恶性调控研究中的应用
- 1990年
- 细胞分化、基因表达和恶性表型的调控是当代细胞与分子生物学领域中的重大研究课题。近几年来中国医学科学院基础医学研究所细胞生物学室利用天然无核的小鼠或兔的网织红细胞与小鼠骨髓瘤细胞系(BW-5147,NS-1,Sp2/0和p388)或人骨髓瘤细胞系(HL-60-AR,HMY)融合,建立了7株可传代和可逆转恶性表型的红细胞胞质杂交模型,以及1个以大鼠成红细胞与小鼠Sp2/0细胞融合的杂交瘤。这些胞质杂交体,包括遗传型相同的小鼠-小鼠同种间的胞质杂交系(BW-R,
- 薛社普刘友华李宝莲章静波陈克铨
- 关键词：恶性表型小鼠骨髓瘤细胞网织红细胞突变株
- 雄激素受体和卵泡刺激素受体在成年大鼠睾丸中的期依赖性表达被引量：16
- 2001年
- 目的 确定雄激素受体 (AR)和卵泡刺激素受体 (FSHR)在大鼠睾丸中的细胞定位和表达变化。 方法 利用地高辛标记的cRNA探针 ,在成年大鼠睾丸冰冻切片上进行原位杂交 ;同时利用透光显微切割技术将成年大鼠曲细精管分为Ⅱ～Ⅵ、Ⅶ～Ⅷ、Ⅸ～Ⅻ、ⅩⅢ～Ⅰ 4个阶段 ,提取总RNA ,用α 32 P标记的cDNA探针进行斑点杂交 ,观察AR和FSHRmRNA表达的细胞定位和期依赖性变化。利用图像分析系统 ,对阳性杂交信号单位面积平均辉度进行定量分析。 结果 ARmRNA阳性杂交信号位于支持细胞和间质细胞 ,于Ⅶ～Ⅷ期最强 ,Ⅸ～Ⅰ期最弱 ;FSHRmRNA阳性杂交信号位于支持细胞 ,于ⅩⅢ～Ⅰ期最强 ,Ⅶ～Ⅷ期最弱。各阶段之间具有非常显著性差异 (P<0 0 1)。 结论 AR和FSHR期依赖性表达的不同规律提示T(睾酮 )和FSH(卵泡刺激素 )作用于精子发生的不同阶段 ,说明睾酮和卵泡刺激素协同作用调节成年大鼠的精子发生。
- 陈雪雁陈实平金淑敏程凯董红燕陈克铨
- 关键词：雄激素受体卵泡刺激素受体分子杂交成年大鼠睾丸精子发生
- 在甲基纤维素半固体培养基上制备抗人黄体生成素McAb被引量：11
- 1992年
- 自Khler和Milstein创建单克隆抗体(McAb)技术以来.该技术不断发展完善,其应用亦日益广泛。人黄体生成素(hLH)是脑垂体前叶促性腺细胞分泌的一种糖蛋白激素,是调节男女生殖机能的重要物质。目前,国外一些实验室已建成了hLH的单克隆抗体细胞株,并应用于临床诊断,但国内尚未见报道。本研究旨在建立自己的hLH McAb细胞株,以满足国内临床和计划生育科研工作的需要。
- 王保君陈实平陈克铨董红燕程凯宫锋杨育州陈啸梅
- 关键词：甲基纤维素抗体
- 黄体生成素和卵泡刺激素在大鼠垂体前叶的细胞共定位研究被引量：18
- 1997年
- 为探讨卵泡刺激（ＦＳＨ）与黄体生成生素（ＬＨ）分泌及基因表达与调控用抗人ＬＨ－β亚单位单克隆抗体和抗人ＦＳＨ－β亚单位单克隆抗体进行免疫细胞化学定位的研究。通过连续切片免疫酶技术，免疫细胞化学双标记及电镜免疫金双标记技术，在大鼠垂体前叶进行ＦＳＨ和ＬＨ的免疫细胞化学共定位研究。结果表明：存在着棕（ＤＡＢ显色示ＦＳＨ）、蓝（ＣＮ显色示ＬＨ）及棕蓝混合染色细胞；电镜免疫金双标记发现分别被１５ｎｍ金粒（示ＦＳＨ）、１０ｎｍ（示ＬＨ）及被１５ｎｍ、１０ｎｍ金粒同时标记的３种细胞（另文报道）；光镜连续切片染色亦发现ＦＳＨ阳性、ＬＨ阳性及ＦＳＨ－ＬＨ双阳性３种细胞。因此可以确定垂体前叶存在３种促性腺激素（ＧＴＨ）细胞，即ＦＳＨ细胞（只含ＦＳＨ）、ＬＨ细胞（只含ＬＨ）和ＦＳＨ－ＬＨ细胞（既含ＦＳＨ又含ＬＨ）。
- 郝建明刘平张平陈实平王莎丽阎月敏董红燕陈克铨
- 关键词：黄体生成素卵泡刺激素垂体前叶
- 网织红细胞胞质因子调控肿瘤细胞基因表达的核酸杂交分析 Ⅰ.β-珠蛋白基因的表达被引量：4
- 1987年
- 本实验采用核酸杂交技术,以小鼠和人β-珠蛋白基因为探针,分析了同种和异种细胞的胞质体杂交细胞中β-珠蛋白基因的表达状态。结果发现小鼠β-珠蛋白基因转录物不但在同种杂交(小鼠网织红细胞RM×小鼠骨髓瘤BW)的胞质体杂交细胞(BW-RM)中出现,而且在兔网织红细胞与小鼠骨髓瘤的异种杂交细胞(Bw-RR)中亦有表达。同样在小鼠网织红细胞与人浆细胞瘤(HMy)的异种胞质杂交细胞(HMy-RM)中出现人β-珠蛋白基因产物。说明网织红细胞胞质因子可激活原来处于不活动状态的肿瘤细胞β-珠蛋白基因并使之表达.兔和小鼠的胞质因子有同样的调节基因表达的作用而似无种属特异性。对网织红细胞胞质因子调控基因表达和肿瘤细胞恶性逆转的机理和分子生物学基础进行了讨论。
- 汪兆琦章静波陈克铨张世馥沈岩张乐英袁菊薛社普
- 关键词：核酸杂交
- 红细胞分化去核因子在诱导小鼠红白血病细胞分化以及恶性逆转中的作用被引量：2
- 2001年
- 研究小鼠红细胞分化去核分化因子 (MEDDF)在红细胞终末分化中的功能。方法构建在真核细胞中表达的重组质粒 pcDNA- MEDDF，用其转染小鼠红白血病细胞系 (MEL)。通过分析细胞的生长曲线、分裂指数及在半固体培养基中的集落形成率比较细胞的生长特性，采用 RT- PCR检测 c- myc及β-珠蛋白 (β- globin)基因的表达。结果转染 pcDNA- MEDDF与转染空载体 (pcDNA3.1)的细胞相比较，细胞的增殖率减慢、分裂指数降低、在半固体培养基中形成集落的数量减少。转染细胞的联苯胺阳性率达 32.8％。用 RT- PCR检测发现，转染细胞β-珠蛋白的表达量上升了 3.43倍， c- myc表达量下降了 66.3％。结论 MEDDF能使小鼠红白血病细胞分化并抑制其恶性变。
- 赵青葛晔华周建平马静陈克铨薛社普韩代书
- 关键词：小鼠红细胞分化红白血病
- 雷公藤对雄性大鼠脑垂体前叶黄体生成细胞的影响被引量：3
- 1992年
- 利用抗β-黄体生成素(β-LH)单克隆抗体,采用免疫组织化学方法,并结合电镜超微结构,观察雷公藤总甙(GTW)和单体T_4对雄性大鼠脑垂体前叶黄体生成细胞(LH细胞)的影响。结果表明,LH细胞出现一些形态改变。随着雷公藤剂量的增加,LH细胞胞浆内免疫酶反应增强,胞浆内出现空泡。超微结构也显示,LH细胞胞核皱缩,胞浆内高尔基复合体和内质网肿胀,在总甙组和T_4大剂量组,LH细胞类似“阉割细胞”样变。提示雷公藤的抗生育作用类似去性腺效应.
- 王保君程凯沈晓明邹宇宏陈实平宫锋肖玉芳陈克铨陈啸梅
- 关键词：雷公藤单克隆抗体免疫组织化学
- 公立医院应该去市场化
- 2014年
- 医改30年，仍困深水区。如今是，三级甲等医院越办越大，二级医院勉强维持，基层医疗卫生机构软件硬件都落后；病人对基层不信任，小病大病直奔县城、省府、上海和北京，因病致贫、因病返贫的群体数量下不来；医生拿回扣、收红包绝不是少数，医患矛盾已经是社会失和谐的突出表现之一。公立医院属公益性质，公益性的卫生事业不应按照市场经济运作。据了解，我国公立医院经费来源中，95％以上靠自己创收，国家财政拨款不足5％是不合适的。现在看一次感冒，200元常常是最低的花费。不仅增加了患者的负担，更严重地浪费了我国的医疗卫生资源。公立医院去市场化必须由中央确定，制定出新的深化医改方案，从现在开始，逐步而又尽快地执行。
- 陈克铨
- 关键词：市场化基层医疗卫生机构医疗卫生资源公益性质医改方案
- 小鼠骨髓瘤细胞与同种和异种网织红细胞杂交后的杂种子代的细胞遗传学分析
- 1987年
- 本研究用小鼠骨髓瘤BW胸腺淋巴肉瘤,分别与富含血红素和珠蛋白mRNA的正常兔网织红细胞或小鼠网织红细胞杂交,分别取子代杂种细胞第1、2、4、5、6、7、9、16、20代,进行染色体数目和结构畸变的分析。亲代BW计数206个中期细胞,各代杂种共计数1592个中期细胞。结果发现,杂种1、2、4代细胞染色体数目,包括标记染色体明显减少,亚众数含40~49条染色体的细胞明显增多,有10%细胞甚至降至20~29条。但以后各代细胞的染色体数目又趋于回升,并接近亲代染色体数量水平。数量在20~29范围内的细胞已极少存活。杂交细胞各代均保留有特大标记染色体,但染色体畸变率则明显低于亲代细胞,有显著的统计学差异(P<0.001)。上述染色体数量和畸变率的明显改变,与杂交细胞呈现的恶性生长受到抑制互为一致,表明胞质因子对杂交细胞的分裂活动及分裂过程中的染色体形成产生了影响,并进一步为胞质因子可引致染色体改变和丢失提供了证据。
- 蔡有余李黎静章静波陈克铨张乐英袁菊唐瑾薛社普
- 关键词：核型分析染色体畸变
