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小麦愈伤组织再生相关基因TaTCP-1A的克隆及功能鉴定被引量：2: 2014年; 为深入探讨小麦再生分子机制、给建立高效的小麦遗传转化受体系统奠定基础,通过电子拼接、RT-PCR及RACE等方法在小麦品种郑麦7698中分离到一个与小麦愈伤组织再生相关的候选基因TaTCP-1A。序列分析表明,该基因的cDNA序列全长为2 163bp,其中包含了一个1 623bp的开放阅读框,编码540个氨基酸。qRT-PCR结果表明,该基因具有组织表达特异性,在愈伤组织中表达量最高;在愈伤组织形成阶段,随诱导时间的延长,其表达量逐渐上升,当诱导11d时表达量达到峰值,随后呈下降趋势;此外,TaTCP-1A基因在胚性愈伤组织中的表达量高于非胚性愈伤组织。基因沉默结果表明,转TaTCP-1A RNAi小麦植株的再生率比对照降低了85.09%,这一结果初步证明该基因对小麦愈伤组织再生有一定的促进作用。; 黎飞飞李波乔梦闵东红张小红; 关键词：小麦愈伤组织 RNAI QRT-PCR

玉米内复制相关基因ZmSMR4和ZmSMR7的克隆及功能鉴定: 玉米是重要的粮食作物,也是遗传研究的主要对象。玉米胚乳细胞在双受精后会依次经历非动力学有丝分裂、有丝分裂及内复制等细胞周期活动,它是有丝分裂向内复制转换研究的一个模式系统。内复制是指细胞进行正常的DNA复制,却没有经历有...; 黎飞飞; 关键词：玉米 CKI

小麦愈伤组织再生相关基因TaTCP-1的克隆及功能鉴定: 随着生物技术的迅猛发展,通过遗传转化创制优异种质,并结合常规育种开展小麦新品种培育已成为小麦育种的新途径。然而,由于小麦愈伤组织再生率普遍偏低,严重影响着转基因技术在小麦遗传改良中的应用。长期以来,关于提高小麦愈伤组织再...; 黎飞飞; 关键词：小麦原核表达亚细胞定位 QRT-PCR RNAI; 文献传递

小麦成熟胚离体培养及植株再生技术优化被引量：8: 2013年; 本实验利用冬小麦品种周麦27成熟胚进行了愈伤组织诱导和植株再生技术的优化,以提高小麦成熟胚离体再生频率,为以成熟胚进行遗传转化奠定基础。探讨了外植体不同接种方法、Dicamba浓度和细胞分裂素种类、转分化时间和愈伤组织干燥处理等因素对小麦成熟胚愈伤组织诱导和分化的影响。结果表明,1)小麦成熟胚十字形切割法接种愈伤组织分化率较高,达到66.7%,分别是刮胚法和整胚接种的2.1和4.3倍;2)附加2,4-D和Dicam-ba均可以高频率诱导成熟胚愈伤组织的形成,但Dicamba诱导形成的愈伤组织分化率高于2,4-D的达4倍之多,在Dicamba浓度为2.0～4.0mg/L时愈伤组织诱导和分化效果较好;3)愈伤组织在附加2.0mg/L 6-BA的分化培养基上分化率最高为45.8%,其次为在不含激素或含KT 2.0mg/L时分化率分别达到38.5%和37.0%,而在附加TDZ和ZT时分化率较低;4)成熟胚外植体在诱导培养2～3周后进行分化培养,绿苗分化率最高;5)愈伤组织分化前干燥处理6h愈伤组织分化率略有提高,但与未干燥处理的相比差异不显著,而干燥12h后分化率却明显降低。; 张小红赵雪晶李波黎飞飞闵东红; 关键词：小麦成熟胚愈伤组织诱导

小麦花粉电穿孔转化因素优化和转基因植株获得及鉴定被引量：3: 2013年; 【目的】通过优化电穿孔转化技术主要参数,得到候选转基因植株,探索普通小麦(Triticumaestivum L.)电穿孔遗传转化体系。【方法】以冬小麦品种济麦19为受体,GUS为外源基因,将扬花期成熟花粉以最适电场强度和操作温度进行电穿孔处理后,人工授粉济麦19,最终收获种子;利用PCR技术、Southern技术、化学染色方法对T1、T2植株进行鉴定。【结果】电穿孔转化以电场强度6 kV.cm-1、冰上处理花粉,花粉密度为5×106个/mL,以及去雄后第5天授粉为最佳参数;Southern杂交检测结果表明,T2阳性植株的2个株系检测到杂交信号,同时其幼根、叶片等组织经GUS表达活性的组织化学染色检测,呈现蓝色反应。【结论】利用小麦花粉电穿孔转化法可以成功将外源基因整合到小麦基因组中并稳定遗传至T2,且外源基因GUS能够得到表达。; 张小红赵雪晶李波黎飞飞刘沛璇闵东红; 关键词：小麦花粉参数优化

一种小麦花粉细胞电击法转化体系的优化方法及其应用: 本发明公开了一种小麦花粉细胞电击法转化体系的优化方法及其应用，以小麦成熟花粉细胞为转化受体，通过对电击液、萌发液电击条件的筛选和优化，以提高小麦成熟花粉细胞的活力和体外萌发率，利用电击转化法对与干旱、高盐和低温的诱导表达...; 张小红闵东红邵景侠黎飞飞赵雪晶邓艳芳胡晓薇田原付金梅乔梦王晓东普正菲; 文献传递

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黎飞飞