丁春艳
- 作品数:21 被引量:55H指数:5
- 供职机构:河北医科大学第四医院更多>>
- 发文基金:河北省自然科学基金国家自然科学基金河北省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- Polo样激酶3针对P73蛋白的磷酸化位点分析被引量:1
- 2010年
- 目的:探讨P73蛋白上存在的能够被polo样激酶3(polo-like kinases 3,Plk3)磷酸化的结构域或位点,并分析Plk3对P73介导肿瘤细胞凋亡的影响。方法:免疫共沉淀法检测COS-7细胞中Plk3与P73蛋白之间的相互作用,荧光免疫染色法检测Plk3与P73蛋白在细胞中的定位。制备不同的P73缺失突变体GST融合蛋白,体外点突变法构建GST-P73(1~130)点突变的P73(T86A)(第86位苏氨酸点突变为丙氨酸)质粒,体外磷酸化实验分析P73中被Plk3磷酸化的结构域或位点。通过检测PARP蛋白的裂解分析Plk3对P73介导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响。结果:Plk3与P73蛋白之间存在相互作用,Plk3与P73蛋白共定位于COS-7细胞核中。制备获得不同的P73缺失突变体GST融合蛋白,Plk3在P73蛋白N端第63~113位氨基酸残基之间磷酸化P73蛋白。GST-P73(1~130)融合蛋白第86位苏氨酸点突变为丙氨酸(T86A)之后,不影响GST-P73(1~130)蛋白的磷酸化状态。Plk3可抑制P73介导的HeLa细胞凋亡。结论:Plk3通过与P73蛋白结合,诱导P73蛋白N端第63~113位氨基酸磷酸化,但第86位苏氨酸并非Plk3的特异作用位点;此外Plk3抑制P73介导的HeLa细胞凋亡。
- 桑梅香刘丽华丁春艳孟君单保恩
- 关键词:P73磷酸化位点凋亡宫颈癌细胞
- Syk在不同组织来源的人腺上皮恶性肿瘤中的表达被引量:4
- 2006年
- 目的:探讨不同组织来源的人腺上皮恶性肿瘤细胞中Syk的表达,分析其临床意义。方法:应用免疫组织化学染色法分别检测7种人腺上皮恶性肿瘤细胞株、30例人乳腺癌组织及其35例人胰腺癌组织中Syk的表达。结果:人乳腺癌细胞株MCF-7中Syk表达阳性,MDA-MB-231则表达阴性;人胰腺癌细胞株PANC-1、SW1990和Canpan-2,人肺腺癌细胞株GLC-82和肝癌细胞株SMMC-7721中Syk均表达阳性。30例乳腺癌组织及其癌旁正常组织中Syk表达阳性率分别为60% (18/30)和90%(27/30),两者之间有显著性差异(P<0.01)。22例胰腺癌组织及其癌旁正常组织中Syk表达阳性率分别54.5%(12/22)和86.3%(19/22),两者之间有显著性差异(P<0.01);13例经术前化疗的胰腺癌组织及其癌旁正常组织中Syk表达阳性率分别为69.2%(9/13)和92.3%(12/13),两者之间有显著性差异(P<0.01)。结论:Syk在所检测的不同组织来源的人腺上皮恶性肿瘤细胞株中绝大部分(6/7)呈阳性表达;Syk蛋白在乳腺、胰腺正常组织中高表达,在相应肿瘤组织中低表达或不表达的特性,Syk有可能成为乳腺癌患者的预后判定、治疗计划的制定等较为特异性指标。
- 史健单保恩周艳宋小珍丁春艳鲁壮平杜恩起
- 关键词:蛋白质酪氨酸激酶免疫组织化学
- 乳腺癌组织中黑素瘤抗原-A11的表达及其促进乳腺癌细胞的增殖被引量:5
- 2011年
- 目的:探讨黑素瘤抗原(melanoma antigen,MAGE)-A11在乳腺癌组织及相应癌旁组织中的表达,以及MAGE-A11对乳腺癌细胞增殖的影响。方法:应用免疫组织化学法检测60例乳腺癌组织及其相应癌旁组织中MAGE-A11蛋白的表达,分析其与乳腺癌患者临床病理学特征之间的关系。将pCMV-AC-MAGE-A11-GFP表达质粒转染人乳腺癌MCF-7细胞后,应用MTT法及集落形成实验检测MAGE-A11对乳腺癌细胞增殖的影响。结果:60例乳腺癌组织中有31例MAGE-A11蛋白阳性表达,阳性率为51.7%,相应的癌旁组织中均未发现MAGE-A11蛋白的表达;MAGE-A11蛋白的表达与乳腺癌患者的年龄、病理类型、组织学分级、临床分期、肿瘤大小、淋巴转移、雌激素受体(estrogen receptor,ER)-α、孕激素受体(progestrogen receptor,PR)及乳腺癌扩增因子1(ampli?ed in breast cancer1,AIB-1)的表达均无明显关系(P>0.05),与人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor2,HER-2)/C-erbB2和ER-β的表达有关(P<0.05)。转染pCMV-AC-MAGE-A11-GFP表达质粒后,MCF-7细胞的增殖率和集落形成数均有明显增加(P<0.05)。结论:乳腺癌组织中MAGE-A11蛋白的表达与C-erbB2和ER-β的表达有关,且MAGE-A11可促进人乳腺癌MCF-7细胞的增殖。
- 连易水桑梅香周欣亮丁春艳单保恩
- 关键词:乳腺肿瘤抗原肿瘤基因表达MCF-7
- H1299细胞中Plk3对p73转录活性的影响被引量:1
- 2010年
- 背景与目的:研究表明蛋白激酶Plk3可以增加肿瘤抑制因子p53的转录活性,但对p73转录活性的影响尚不清楚,因此本实验旨在研究蛋白激酶Plk3对p73转录活性的影响。方法:选用p53缺失型人类肺癌细胞系H1299,采用荧光素酶报告剂分析、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)及克隆形成实验的方法研究蛋白激酶Plk3及激酶活性缺失的Plk3(K52R)对p73转录活性的影响。结果:荧光素酶报告剂分析结果显示,单独转染p73基因可以增加p21WAF1和Bax启动子介导的荧光素酶的表达(P<0.05);共转染p73基因和Plk3基因,p21WAF1和Bax启动子介导的荧光素酶的表达与单独转染p73基因组相比显著降低(P<0.05),且呈浓度依赖性;而激酶活性缺失的Plk3(K52R)对p21WAF1和Bax启动子介导的荧光素酶的表达没有显著影响(P>0.05)。RT-PCR检测结果也显示,p73诱导p21WAF1和Bax的mRNA表达(P<0.05),Plk3降低了p73诱导的p21WAF1和Bax的mRNA表达水平(P<0.05);而激酶活性缺失的Plk3(K52R)对p73诱导的p21WAF1和Bax的mRNA表达水平无显著影响(P>0.05)。克隆形成实验结果显示,p73抑制了H1299细胞克隆的形成(P<0.05),Plk3降低了p73对H1299细胞克隆形成的抑制(P<0.05),而激酶活性缺失的Plk3(K52R)对p73抑制H1299细胞克隆形成无显著影响(P>0.05)。结论:Plk3可以抑制p73的转录活性,而激酶活性缺失的Plk3(K52R)对p73的转录活性无明显影响。
- 桑梅香刘丽华丁春艳孟君单保恩
- 关键词:P73
- 肿瘤抗原MAGE-A10和MAGE-A11在乳腺癌组织中的表达及意义
- 目的:黑色素瘤抗原A(MAGE-A)家族是一组具有明显特征的癌睾丸抗原,它们具有高度的肿瘤特异性,并表达于多种肿瘤组织。但是,MAGE-A10和MAGE-A11在乳腺癌患者体内的表达情况尚不清楚。我们的研究旨在探究乳腺癌...
- 桑梅香连易水丁春艳周欣亮范晓杰单保恩
- 关键词:乳腺癌
- 文献传递
- 靶向沉默p65基因对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖及凋亡的影响被引量:12
- 2011年
- 目的利用miRNA靶向沉默p65基因,观察其对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖及凋亡的影响。方法以脂质体LipofectamineTM2000为载体,将针对特异靶点p65基因的miRNA转染入MDA-MB-231细胞。RT-PCR和Western blot法检测p65 mRNA和蛋白表达的变化;MTT法检测细胞增殖;流式细胞技术(FCM)检测细胞凋亡;Western blot法检测凋亡相关因子表达的变化。结果 RT-PCR和Western blot检测结果显示,p65miRNA转染组p65 mRNA及蛋白表达量较对照组显著下降(P<0.05);MTT检测结果显示,沉默p65基因后,细胞出现了生长抑制现象;FCM检测结果发现,p65miRNA转染组细胞凋亡率显著增加(P<0.05)。Western blot进一步检测发现,转染组细胞中caspase-3的前体蛋白条带变细,裂解片段条带加深;PARP蛋白出现裂解片段。结论 miRNA靶向沉默p65基因可抑制人乳腺癌细胞增殖,促进细胞凋亡,推测p65基因可能成为乳腺癌基因治疗的一个新靶点。
- 王玲单保恩桑梅香连易水王彬丁春艳
- 关键词:乳腺癌基因沉默MIRNAP65
- SYK在不同组织来源的人腺上皮恶性肿瘤中的表达
- 目的:探讨不同组织来源的人腺上皮恶性肿瘤细胞中SYK的表达,分析其临床意义。方法:应用免疫组织化学染色法分别检测7种人腺上皮恶性肿瘤细胞、30例临床手术乳腺癌组织、35例人胰腺癌组织中SYK的表达。结果: 人乳腺癌细胞株...
- 史健周艳宋小珍单保恩丁春艳鲁壮平杜恩起
- 关键词:SYK恶性肿瘤组织组织特异性
- 文献传递
- MAGE-A9结构域缺失突变体对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响
- 目的人类黑色素瘤相关抗原(melanoma antigen gene,MAGE)是癌/睾丸抗原(CTA)家族中一组很典型的成员,除睾丸外几乎在正常成年组织中均不表达,但在很多种肿瘤组织中高表达,因此被认为是一种肿瘤特异性...
- 周欣亮桑梅香单保恩连易水丁春艳刘贤德陈文雪
- 肿瘤抗原MAGE-A10和MAGE-A11在乳腺癌组织中的表达及意义
- 目的:黑色素瘤抗原A (MAGE-A)家族是一组具有明显特征的癌睾丸抗原,它们具有高度的肿瘤特异性,并表达于多种肿瘤组织.但是,MAGE-A10和MAGE-A11在乳腺癌患者体内的表达情况尚不清楚.我们的研究旨在探究乳腺...
- SANG Meixiang桑梅香LIAN Yishui连易水DING Chunyan丁春艳ZHOU Xinliang周欣亮FAN Xiaojie范晓杰SHAN Baoen单保恩
- 关键词:乳腺癌黑色素瘤抗原预后因素病理机制
- 环保透明剂在常规组织制片中的应用被引量:7
- 2014年
- 常规组织石蜡制片技术中组织透明、切片脱蜡、透明、封固剂制备都离不开透明剂的使用.二甲苯由于价格便宜、透明效果好、作用时间短而被广泛采用,但其刺激性强,对人的神经系统、呼吸系统、造血系统、免疫系统及生殖系统具有毒害作用,是致癌物质,长期接触不利身体健康.若在无专用处理管道的单位,其废液直接进入下水道,对环境及人体造成极大危害.其在使用过程中时间掌握不当易使组织收缩、变脆.环保透明剂作为新开发的替代剂,不仅具有与二甲苯同等的功效,且性质温和,无味、无毒、无害、无污染,符合实验室环保要求.我们应用环保透明剂替代二甲苯进行组织透明、切片脱蜡均得到了满意的效果,现报告如下.
- 王永军王肖肖吕菲丁春艳杨会钗王珩
- 关键词:二甲苯脱水