于树娜
- 作品数:58 被引量:85H指数:5
- 供职机构:潍坊医学院更多>>
- 发文基金:山东省“泰山学者”建设工程项目山东省自然科学基金山东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学生物学更多>>
- 第3~5周人胚肝的细胞特征和生长因子及其受体表达(英文)被引量:1
- 2006年
- 背景:早期肝的发育与横隔间充质和原始心脏的发育在时间和空间上存在密切关系,来自原始心脏和横隔间充质的信号分子可诱导前肠内胚层细胞向肝细胞的特化,横隔间充质为肝芽的形成提供了一个适宜的环境,并可促进其生长和分化。但这一诱导过程的分子机制尚不清楚。目的:利用发育第3~5周人胚标本,选择甲胎蛋白、细胞角蛋白19、c-Met作为肝干细胞的标记物,观察早期人胚胎的发育及肝干细胞的形态特征,以明确肝干细胞的特征和影响其增殖、分化的因素,为肝干细胞的基础研究和临床应用提供实验依据。设计:开放性实验。单位:潍坊医学院人体解剖学教研室。材料:实验于2004-09/2005-01在成都医学院科研中心完成。选择2个月内流产的新鲜人胚胎标本20例,20min内用40g/L多聚甲醛固定,常规石蜡包埋、连续切片,苏木精-伊红染色,显微镜下观察,参照Jirasek的人胚发育分期标准,根据胚胎的长度、体节的数目及器官发育状况确定胚龄。方法:选择胚龄第3~5周的标本,SABC法进行免疫组织化学染色。多克隆抗肝细胞生长因子、c-Met、胰岛素样生长因子I及其受体、转化生长因子β1、转化生长因子β受体1、转化生长因子β受体2抗体,单克隆抗增殖细胞核抗原、甲胎蛋白和细胞角蛋白19抗体,4℃孵育过夜,羊抗兔或羊抗鼠IgG及SABC液室温下分别孵育2h,二氨基联苯胺显色。以磷酸盐缓冲液代替一抗作阴性对照。光学显微镜下观察、拍照。主要观察指标:第3~5周人胚肝干细胞的形态特征及标记物的免疫组织化学染色,肝细胞生长因子、转化生长因子β1、胰岛素样生长因子I及其受体在第3~5周人胚肝、原始心脏及横隔间充质细胞中的表达。结果:①第3~5周人胚肝干细胞的形态特征及标记物的免疫组织化学染色观察:第3周末肝芽形成,第4周肝芽的细胞伸入横隔间充质内形
- 蒋吉英李爱冬姜红心羊惠君魏志新李磊王箐于树娜
- 关键词:干细胞胚胎肝细胞生长因子
- HepG2及其克隆形成细胞端粒酶活性的异质性研究
- 2012年
- 目的研究端粒酶在肝癌细胞株HepG2及其克隆形成细胞中的表达,探讨不同增殖能力的肝癌细胞中端粒酶活性的异质性,为肝癌的诊断以及治疗提供新的思路。方法利用软琼脂克隆形成实验富集分离人肝癌HepG2细胞的克隆形成细胞;常规培养HepG2及其克隆形成细胞,利用免疫细胞化学、Western blotting和RT-PCR检测hTERT蛋白和mRNA在HepG2细胞及其克隆形成细胞中表达的异质性。结果①HE染色显示,克隆形成细胞的胞核较HepG2细胞大,核仁明显;细胞伸出较多的细长突起,并连接形成网状。②免疫细胞化学染色显示,hTERT在HepG2细胞的表达以细胞质为主,克隆形成细胞则以细胞核为主。③Western blotting和RT-PCR结果显示,克隆形成细胞中hTERT蛋白质和mRNA的表达均高于HepG2细胞。结论①hTERT在HepG2细胞及其克隆形成细胞中的表达存在异质性,且在克隆形成细胞中表达较高。②hTERT在HepG2细胞及其克隆形成细胞中的表达模式提示克隆形成细胞具有肝癌干细胞的特征。
- 于树娜王宝松姜红心史才兴郑洁蒋吉英
- 关键词:肝癌HTERT肿瘤干细胞
- 血管内皮生长因子及其受体和angiopoietin及其受体在人胚胎造血过程中的作用(英文)
- 2006年
- 背景:血管内皮生长因子家族及其受体在血管生成和新血管形成过程中具有重要作用。近来,有关血管内皮生长因子家族对血液发生的作用受到广泛关注。目的:观察血管内皮生长因子A、血管内皮生长因子C及其受体和an-giopoietin-1(ang-1)、angiopoietin-2(ang-2)及其受体在发育第3~12周人胚胎卵黄囊血岛、主动脉-生殖腺-中肾区的表达,以了解血管内皮生长因子和angiopoietin家族在血液发生过程中的作用。设计:单一样本观察。单位:潍坊医学院,形态实验中心和解剖学教研室。对象:实验于2002-02/2004-08在潍坊医学院进行,收集流产的47例孕妇的受精龄第3~12周人胚胎标本,孕妇知情同意。方法:标本连续切片,每隔10张抽出2张切片,分别做苏木精-伊红染色和免疫组织化学染色。多克隆抗血管内皮生长因子C,fms样酪氨酸激酶,flt-4,ang-1,ang-2,Tie-2抗体以及单克隆抗血管内皮生长因子A,胎肝激酶1抗体4℃孵育过夜,羊抗鼠IgG及SABC液室温下分别孵育2h,DAB显色。分别以正常兔或鼠血清代替一抗作阴性对照。光学显微镜下观察、拍照。主要观察指标:①血管内皮生长因子A和血管内皮生长因子C及其受体在发育第3~12周人胚胎卵黄囊血岛、主动脉-生殖腺-中肾区的时空表达。②ang-1和ang-2及其受体在发育第3~12周人胚胎卵黄囊血岛、主动脉-生殖腺-中肾区的时空表达。结果:①第21~25天人胚卵黄囊血岛血管内皮细胞和造血细胞强表达血管内皮生长因子A及其受体fms样酪氨酸激酶和胎肝激酶1、血管内皮生长因子C及其受体胎肝激酶4、ang-2及其受体Tie-2蛋白,弱表达ang-1蛋白。②背主动脉和中肾于发育第4周开始表达上述各种因子及其受体,免疫阳性反应物集中在大而圆、有核的造血细胞。阳性细胞的数量到第7周到达高峰。8周以后,阳性细胞数量显著减少,到12周,几乎所有的血细胞为免疫阴性
- 姜红心张杰李磊王箐于树娜蒋吉英
- 关键词:卵黄囊内皮生长因子受体血管内皮生长因子
- NEP1-40对视网膜缺血-再灌注损伤过程中视网膜细胞的保护作用被引量:1
- 2014年
- 背景 视网膜缺血-再灌注损伤(RIRI)可导致细胞凋亡,凋亡是一个复杂的过程,与许多基因有关,探讨药物对RIRI后视细胞凋亡的保护作用具有重要意义. 目的 探讨Nogo-A在大鼠RIRI模型中的表达及其与细胞凋亡的关系,研究Nogo受体竞争性拮抗剂NEP1-40对视网膜细胞的保护作用. 方法 将78只SD大鼠按随机数字表法随机分为正常组、RIRI组和NEP1-40组,RIRI组及NEP1-40组大鼠分别用前房升高眼压的方法升高眼压至大鼠视网膜苍白,持续60 min,然后恢复眼压至视网膜色泽恢复,制作RIRI大鼠模型.术后6h、12 h及1、2、3、7d用过量的水合氯醛处死大鼠,制备视网膜标本.透射电子显微镜下观察各时间点各组大鼠视网膜的超微结构,采用TUNEL法检测视网膜细胞的凋亡情况,并计算细胞凋亡指数(AI).采用免疫组织化学法检测视网膜组织中Nogo-A蛋白的表达,并采用逆转录PCR(RT-PCR)法半定量检测Nogo-A mRNA在视网膜中的表达. 结果 正常组大鼠视网膜各层结构正常;RIRI组大鼠视网膜再灌注12h后可见少量视网膜细胞器的线粒体嵴异常及空泡化,再灌注后1 ~2d可见凋亡小体;NEP1-40组视网膜的视细胞外节膜盘略疏松,部分线粒体嵴短小,空泡化,未见凋亡小体,视网膜细胞超微结构损害明显轻于RIRI组.TUNEL检测显示细胞凋亡出现于再灌注后6h,并逐渐递增,再灌注后1d凋亡细胞数目达高峰,2d后开始下降,但再灌注后3d仍可见TUNEL阳性细胞.NEP1-40组各时间点间凋亡细胞数目较RIRI组明显减少.正常组、RIRI组和NEP1-40组大鼠在不同时间点细胞AI的差异均有统计学意义(F分组=100.850,P=0.000;F时间=34.309,P=0.000),其中RIRI组和NEP1-40组大鼠视网膜细胞AI明显高于正常组,而NEP1-40组AI明显低于RIRI组,差异均有统计学意义(均P<0.05).Nogo-A蛋白及其mRNA主要表达于RIRI后的视网膜,再灌注后6h大鼠视网膜中Nogo-A蛋白及其mRNA均开始�
- 刘索新鞠学红于树娜王浩
- 关键词:NEP1-40视网膜缺血-再灌注损伤NOGO-A
- N-乙酰-L-色氨酸减轻H_2O_2诱导小鼠海马神经元细胞凋亡被引量:1
- 2013年
- 目的探讨N-乙酰-L-色氨酸(L-NAT)对海马神经元(PHN)缺血低氧损伤的影响。方法用600μmol/L H2O2诱导PHN制备海马神经元细胞凋亡模型,采用免疫荧光染色检测caspase-3的表达,Rhodamine 123染色检测线粒体膜势能(ΔΨm)的改变,锥虫蓝染色检测细胞存活率,比色法检测caspase-3、乳酸脱氢酶(LDH)的活性,Westernblot检测caspase-3及凋亡诱导因子(AIF)和细胞色素C(CytC)等线粒体促凋亡因子在胞质蛋白和线粒体蛋白中的表达。结果 L-NAT可减轻H2O2所引起的细胞形态的死亡、存活率的降低、LDH的释放、caspase-3的激活、线粒体膜势能的丧失及AIF和CytC等线粒体促凋亡因子的释放。结论 L-NAT能通过抑制caspase依赖性和非依赖性的细胞凋亡途径,减轻H2O2诱导的小鼠海马神经元的细胞损伤。
- 于树娜王志芳杜晓东姜红心李进史才兴蒋吉英
- 关键词:神经元细胞凋亡细胞模型
- N-乙酰-L-色氨酸对新生鼠脑缺血缺氧纹状体损伤的保护作用被引量:2
- 2016年
- 目的探讨N-乙酰-L-色氨酸(L-NAT)对新生鼠脑缺血缺氧纹状体损伤的保护作用。方法用出生第7天的SD大鼠制备新生鼠脑缺血缺氧模型,HE染色观察纹状体的形态学变化;免疫荧光染色观察Caspase3、Bcl-2和Bax的表达情况。结果与Sham组相比,HIE组纹状体中神经细胞排列紊乱,且数量明显减少,Caspase-3、Bcl-2、Bax的表达升高;HIE+L-NAT组纹状体细胞的损伤程度减轻,Bax、Caspase-3表达下降,Bcl-2的表达进一步升高。结论 L-NAT可能通过调节Bcl-2家族蛋白的表达减轻纹状体细胞的损伤程度,从而保护新生鼠脑缺血缺氧损伤。
- 赵纳杰王聚信李晓双高香红于海刘清华张明于树娜蒋吉英
- 关键词:缺血缺氧损伤纹状体
- HepG2细胞在不同琼脂糖浓度下克隆形成能力的比较被引量:5
- 2009年
- 目的:探讨分离细胞克隆的最佳细胞密度和最适琼脂浓度,为肿瘤干细胞的筛选提供更广阔的思路.方法:将HepG2单细胞悬液与10g/L的琼脂糖相混合,在2g/L(A组)和3g/L(B组)琼脂中接种不同密度的HepG2细胞,14d后观察克隆形成.结果:100-1000个/孔的各个实验组中,A组细胞的克隆数高于B组,差异有统计学意义(t=4.36,P<0.05);在细胞密度为100-500个/孔时,A、B组细胞克隆形成率随着细胞密度的增加逐渐增加;600-1000个/孔,A、B组均随着细胞密度的逐渐加大,克隆形成率呈现下降趋势.结论:在进行软琼脂克隆形成实验时,可以采用2g/L的上层琼脂浓度,并采用10g/L的琼脂糖凝胶作为储备胶,HepG2细胞在500个/孔时的克隆形成率最高.
- 丁洁魏德全蒋吉英王宝松姜栋栋于树娜王晓萃
- 关键词:HEPG2细胞克隆形成率
- 人体解剖学研究生创新素质培养的探讨被引量:1
- 2015年
- 研究生的创新素质是指研究生的创新意识、创新思维、创新能力等,这是决定着研究生培养质量的关键。人体解剖学作为一门基础医学课程,其研究生的创新素质培养现状却并不理想。究其原因,除了相对滞后的教育方法和教学内容之外,还包括导师的作用,以及研究生的自身素质等方面的影响。因此,在适当的政策倾斜以及加强导师作用的前提下,建立健全科学的课程体系及评价机制,推进各学科间的交叉和融合,将有助于解剖学研究生创新素质的培养。
- 梁翠宏蒋吉英于树娜王晓萃刘清华张明于丽
- 关键词:人体解剖学研究生教育创新素质培养
- 褪黑素对新生鼠脑缺血缺氧损伤中细胞凋亡的影响
- 蒋吉英于海王聚信刘清华张明于树娜
- Wnt信号通路在人肝癌HepG2细胞及其克隆形成细胞中表达的异质性研究
- 于树娜王宝松姜栋栋赵金岭蒋吉英