于洋
- 作品数：5 被引量：12H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- A组人轮状病毒NSP3基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：5
- 2007年
- 目的:获得轮状病毒NSP3基因的表达产物及其抗血清。方法:将TB-Chen株轮状病毒NSP3基因插入质粒pETL,构建重组表达质粒pET-NSP3,并转化大肠杆菌BL21(DE3)表达重组蛋白NSP3;用凝胶分离回收的方法纯化该蛋白,免疫豚鼠制备该蛋白的抗血清。结果:构建了重组表达质粒pET-NSP3,并在大肠杆菌中高效表达了重组蛋白NSP3,目的蛋白表达量占菌体总蛋白量的28.6%;有效地纯化了目的蛋白并制备了该蛋白的抗血清,Western印迹表明该抗血清能与重组蛋白NSP3发生特异性免疫反应。结论:通过质粒pETL能高效表达轮状病毒NSP3蛋白,该重组蛋白具有较好的免疫反应性,为进一步研究其结构、功能及免疫学性质奠定了基础。
- 于洋文喻玲赵庆欢曹志亮陈元鼎
- 关键词：轮状病毒克隆
- 免疫荧光法检测原核和真核细胞中表达的轮状病毒外壳蛋白VP4被引量：3
- 2008年
- 目的:用免疫荧光法快速检测原核和真核细胞中表达的轮状病毒(RV)外壳蛋白VP4。方法:以抗VP4的抗体为一抗、FITC标记的羊抗豚鼠IgG为二抗,用免疫荧光方法检测在大肠杆菌BL21(DE3)中重组表达的同源RVVP4;检测SA11或Wa株RV感染MA104细胞后不同时间段病毒VP4的合成及其在感染细胞中的分布情况。结果:用免疫荧光法可直接检测到原核细胞中表达的外源蛋白,也可检测到病毒蛋白在真核细胞中的分布情况。结论:免疫荧光法可特异、方便、快速地检测RVVP4在原核和真核细胞中的表达;来源于RVTB-Chen株的VP4抗体可特异性识别同源病毒VP4,交叉识别SA11或Wa株的VP4。
- 赵庆欢文喻玲于洋陈元鼎
- 关键词：免疫荧光法外壳蛋白VP4
- 轮状病毒Vp6蛋白的免疫荧光检测被引量：10
- 2008年
- 目的检测在大肠杆菌BL21(DE3)中表达的重组轮状病毒(Rotavirus,RV)Vp6蛋白和RV SA11感染的MA104细胞中不同时间表达的Vp6蛋白及其分布规律。方法应用纯化的重组A组人轮状病毒TB-Chen株Vp6(rVp6)蛋白和RVSA11分别免疫豚鼠,制备抗血清,以抗rVp6豚鼠血清作为检测抗体,应用间接免疫荧光技术检测rVp6蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达。分别用抗Vp6和抗RV SA11豚鼠血清检测Vp6蛋白和RV SA11株在感染的MA104细胞中的分布。结果在轮状病毒感染的MA104细胞和大肠杆菌BL21(DE3)中均能检测到轮状病毒Vp6蛋白。以抗RV SA11血清作为一抗检测感染细胞,比用抗rVp6血清检测具有更强的敏感性。结论免疫荧光试验可用于轮状病毒Vp6蛋白的检测。
- 尹兴晓文喻玲赵庆欢于洋陈元鼎
- 关键词：轮状病毒免疫荧光
- 免疫荧光检测轮状病毒Vp6在真核细胞中的合成与分布
- 本研究应用重组表达的A组轮状病毒TB-Chen株Vp6(rVp6)蛋白免疫豚鼠，制备抗rVp6血清抗体作为间接免疫荧光的捕获抗体，检测SA11病毒感染的MA104细胞中表达的病毒Vp6蛋白，观察Vp6在细胞内的复制及其分...
- 尹兴晓文喻玲赵庆欢于洋陈元鼎
- 关键词：轮状病毒免疫荧光荧光检测抗体制备
- 文献传递
- 轮状病毒全基因组及蛋白表达研究
- 陈元鼎曹志亮赵庆欢于洋尹兴晓范耀春李传印文喻玲张艳
- 1、1979-1986年期间系统地开展了云南省轮状病毒流行病学调查，从幼儿临床感染样品中成功分离一株轮状病毒(RV)，命名为TB-Chen株。2、TB-Chen株被鉴定为A组(Ⅱ亚组：短核酸型)，经全基因组测序发现该基因...
- 关键词：
- 关键词：轮状病毒流行病学调查
