刘公平 作品数:11 被引量:54 H指数:4 供职机构: 华南农业大学动物医学系 更多>> 发文基金: 国家教育部博士点基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
A亚群禽白血病病毒囊膜基因gp85片段在大肠杆菌中的表达 被引量:2 2001年 将RAV 1囊膜基因gp85片段亚克隆到表达质粒pET 2 1d(+)中得到重组表达质粒pET 2 1d RAV 1env(BglII /SalI) ,序列分析表明该插入片段的核苷酸序列和阅读框都与RAV 1囊膜基因相应序列相同。用其转化大肠杆菌BL2 1(DE3)并经IPTG诱导 ,SDS PAGE分析表明RAV 1囊膜基因融合蛋白表达产物约 2 0kD ,与理论值相符 ;IPTG诱导起始时间比诱导持续时间对表达量的影响更大。 刘公平 赵振芬 刘福安关键词:禽白血病病毒 亚克隆 原核表达 大肠杆菌 禽白血病病毒囊膜基因gp85片段的克隆与鉴定 被引量:14 2001年 用PCR从禽白血病病毒 (AvianLeukosisVirus ,ALV)RAV_1,RAV_2感染或未感染的SPF鸡胚成纤维细胞 (CEF)分别扩增出 1.2kb囊膜基因片段。分别将上述PCR产物的KpnⅠ /SaⅡ酶切片段克隆到质粒pGEM_3zf(+ )中得到 3个重组子即pGEM_3zf_RAV_1env、pGEM_3zf_RAV_2env和pGEM_3zf_Eenv。酶切分析和序列测定结果表明克隆的PCR片段分别来自ALVRAV_1,RAV_2和内源性E亚群病毒 。 刘公平 赵振芬 刘福安关键词:禽白血病病毒 囊膜基因 克隆 PCR/RFLP鉴别禽白血病病毒 被引量:22 2001年 用 PCR方法从禽白血病病毒 ( avian leukosis virus,ALV)亚群毒株 RAV-1、RAV-2感染或未感染的SPF鸡胚成纤维细胞 ( CEF)分别扩增出 1 .2 kb基因片段。 RAV-1囊膜基因可被 Bgl 分为 2条相近的 60 0bp片段 ,RAV-2囊膜基因被 Bam H 分为 2条约 60 0 bp片段 ,对照组基因片段 (内源性病毒 )不被 Bgl 和Bam H 切割。结果显示 ,ALV囊膜基因的 PCR/RFLP可用于诊断禽白血病和鉴别不同的 ALV毒株。 刘公平 赵振芬 刘福安关键词:禽白血病病毒 囊膜基因 PCR/RFLP pIBVD-(41)质粒转化致病性大肠埃希氏菌的研究 1999年 外源DNA被受体菌吸收而发生的基因转移现象称为转化,其转化技术是基因工程技术中的关键步骤,常用的受体菌或细胞也从原核生物如非致病性大肠埃希氏菌(Escherichiacoli)DH5α和JM109等扩大到真核生物如酵母菌、动物细胞和植物细胞等(阎隆飞... 赵振芬 刘公平 王林川关键词:大肠杆菌 埃希氏菌 基因转移 鸡痘胚体弱毒苗免疫性能的研究 被引量:1 1997年 鸡痘胚体弱毒苗免疫性能的研究赵振芬刘公平1)齐铁英2)唐桂芬(郑州牧业工程高等专科学校450045)鸡痘是由鸡痘病毒(FPV)引起的一种接触性传染病,常见的有皮肤型和粘膜型两种。本病广泛分布于世界各国,特别是大型鸡场中流行更严重。鸡痘可使病禽生长迟缓... 赵振芬 刘公平 齐铁英 唐桂芬关键词:鸡痘 疫苗 免疫性能 禽白血病病毒研究进展 被引量:11 2000年 刘公平 赵振芬 刘福安关键词:禽白血病病毒 囊膜基因 病毒受体 巢式PCR快速鉴定鸡传染性支气管炎病毒的研究 被引量:9 1999年 鸡传染性支气管炎病毒(IBV)经鸡胚增殖后,直接用尿囊液提取RNA后反转录成cDNA,用IBV基因3’端的UTR1-/UTR2+和UTR3-/UTR4+两对引物进行巢式PCR,所检测的4个IBV标准参考株和16个IBV野毒株均得到了预期的174bp大小的片段,而鸡新城疫病毒(NDV),鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)及正常鸡胚尿囊液经同样处理没有可见片段出现。本试验不需纯化册毒只需05ml病毒尿囊液即可在24小时内得到准确的试验结果。这表明与其它IBV鉴定方法相比,该法具有快速、灵敏、特异的优点。 赵振芬 王林川 刘公平 刘公平 边传周 刑钊 夏平安关键词:巢式PCR 支气管炎病毒 IBV ALV囊膜基因及p19基因片段的克隆与原核表达 利用多胚混合消化法制备的普通品系SPF鸡胚成纤维胞(CEF)成功地增殖出了A、B亚群禽白血病毒(ALV)实验室标准株RAV-1和RAV-2.分别针对ALV基因组中单一的限制性内切酶KpnI位点上游的保守序列和囊膜原因gp... 刘公平关键词:禽白血病病毒 囊膜基因 原核表达 兔绿脓杆菌病的诊断 1994年 1993年4月某兔场发生以出血性肺炎和肠炎为主的疫病,经综合鉴定为绿脓杆菌感染所致.1 发病情况 河南新乡某兔场有共1320只兔,仔兔断奶后均接种过兔瘟、巴氏杆菌、魏氏梭菌三联苗.1993年4月12日该场1~3月龄仔兔开始发病,每天死亡30~40只,用青、链霉素及横胺药治疗效果不理想,10d共死亡286只,死亡率达21.7%. 赵桢芬 杨龙骐 刘公平关键词:绿脓杆菌病 兔瘟 三联苗 绿脓杆菌感染 磺胺药 生化试验 鸡传染性支气管炎病毒H株纤突蛋白基因的RT-PCR/RFLP分型 被引量:1 2000年 A 1.66 kb expected S1 gene fragment of avian infectious brochitis virus (IBV) H strain was amplified by RT PCR. Its PCR/RFLP pattern was similar to IBV D 41 strain and M 41 strain when digested using BstYI, HaeⅢ and EcoRI respectively. IBV H strain was thought as Massachusetts serotype. 赵振芬 黄亚东 王林川 刘公平 辛朝安关键词:IBV RT-PCR FLP