包世俊 作品数:94 被引量:232 H指数:8 供职机构: 甘肃农业大学动物医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 甘肃省自然科学基金 甘肃省高等学校基本科研业务费项目 更多>> 相关领域: 农业科学 文化科学 医药卫生 生物学 更多>>
一种新型犬猫用输液外套 本实用新型涉及宠物用品技术领域,且公开了一种新型犬猫用输液外套,包括背襟,所述背襟的顶部固定连接有第一固定片,所述背襟的顶部固定连接有第二固定片,所述第二固定片的背面固定连接有母魔术贴,所述背襟的一侧固定连接有第三固定片... 魏衍全 杨孝朴 马永华 包世俊 孙晓林文献传递 用于牛支原体检测的特异性引物对、检测试剂盒及其使用方法和应用 本发明提供用于牛支原体检测的特异性引物对,所述引物对为:上游引物P48-F:CGAACCTAAAAAGGGTGAATTAGCATCTT;下游引物P48-R:ATTACTGAGTTAATAGCAGCAACTGCAACG。本... 包世俊 胡国明 邢小勇 胡永浩 薛慧文 伏小平 温峰琴文献传递 肉仔鸡腹水综合征诊治报告 2006年 包世俊 项光华 胡永浩 姚学萍关键词:艾维茵肉仔鸡 腹水综合征 诊治报告 抗生素治疗 庆大霉素 滑液支原体WVU1853株免疫相关膜蛋白的初步分析 被引量:14 2017年 膜蛋白是病原菌膜结构的主要组分,其不仅在病原菌的生命活动中具有重要的生理功能,且部分膜蛋白还与病原菌的感染及免疫应答密切相关。因此,本研究旨在应用免疫蛋白质组学方法分离、筛选并鉴定出滑液支原体免疫相关膜蛋白,以期为滑液支原体感染和免疫机制的研究及相关疾病诊断和防治方法措施的建立奠定基础。笔者应用培养至对数生长中后期的滑液支原体(Mycoplasma synoviae,MS)WVU1853株全菌分别免疫鸡和新西兰兔,制备滑液支原体鸡多抗和兔多抗。提取滑液支原体WVU1853株的膜蛋白,应用二维电泳技术对其进行分离,继而应用所制多抗进行Western blot,筛选出免疫原性膜蛋白,并通过质谱分析进行鉴定。结果表明,在筛选的8个蛋白质点中,3个蛋白质点为延伸因子EF-Tu,其余蛋白质点分别是丙酮酸脱羧酶α亚基、β亚基、NADH氧化酶、组氨酰-tRNA合成酶和二氢硫辛酰胺脱氢酶。其中组氨酰-tRNA合成酶的质谱分析得分太低,尚需进一步验证,而丙酮酸脱羧酶α、β亚基与作为滑液支原体的免疫相关膜蛋白首次被证实。本研究筛选并初步鉴定出滑液支原体7种免疫相关膜蛋白,为深入研究目标蛋白质的生物学特性及新型亚单位疫苗和诊断试剂的研发奠定了基础。 包世俊 丁小琴 邢小勇 伏小平 薛慧文 温峰琴关键词:滑液支原体 膜蛋白 牛支原体武威株脂蛋白P48基因的克隆、原核表达及亚细胞定位 被引量:8 2016年 【目的】验证牛支原体P48蛋白在细胞中的位置,并为后续功能的研究奠定基础.【方法】运用Overlap PCR扩增获得点突变后的牛支原体武威分离株P48基因,并将其克隆至pGEM-T Easy,将测序正确的质粒克隆至表达载体pET-28a中,构建原核表达质粒pET-P48,表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),并在IPTG诱导下成功获得融合蛋白表达产物rMbP48,大小约为51ku.重组蛋白纯化后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体.在分离牛支原体膜蛋白的基础上应用Western-blot及间接ELISA对P48蛋白在细胞中的分布进行分析.【结果】P48蛋白主要存在于牛支原体的膜分离相.全菌免疫荧光试验进一步证实脂蛋白P48位于牛支原体的膜表面.【结论】牛支原体P48蛋白是存在于牛支原体表面的一种具有免疫原性的脂蛋白.本研究为进一步研究P48蛋白的生物学特性及建立高效的牛支原体诊断方法奠定了基础. 胡国明 邢小勇 李娜 苏炜德 温峰琴 项海涛 胡永浩 包世俊关键词:牛支原体 基因克隆 原核表达 亚细胞定位 牛支原体P48蛋白诱导EBL细胞增殖和凋亡的研究 被引量:2 2020年 试验旨在研究牛支原体P48蛋白对胎牛肺(embryonic bovine lung,EBL)细胞增殖和凋亡的影响。收集不同时间段、不同浓度P48蛋白与EBL细胞共孵育的样品,通过MTT法检测细胞增殖率;DAPI染核法观察EBL细胞核形态变化;流式细胞技术检测该蛋白诱导EBL细胞的凋亡率;实时荧光定量PCR检测凋亡标志物的mRNA相对表达变化;Western blotting方法检测Bax和Beclin-1蛋白表达水平。结果显示:当作用时间为72 h,P48蛋白浓度在10μg/mL时,对EBL细胞增殖有极显著的抑制作用(P<0.01),在0.1和0.5μg/mL时对EBL细胞的增殖的抑制作用不显著(P>0.05);经蛋白诱导12 h细胞核形态未有明显变化,24 h细胞核形态发生皱缩和凝聚,48和72 h细胞核发生碎裂;凋亡标志基因mRNA表达在2和12 h没有明显提高,在24、48、72 h有显著提高,与作用时间呈正相关,同时凋亡相关蛋白Bax和Beclin-1的表达随之显著提高。流式细胞技术结果显示P48蛋白诱导EBL细胞凋亡率为48.44%。综上表明,牛支原体P48重组蛋白能够抑制EBL细胞的增殖,促进细胞凋亡,为进一步揭示牛支原体的致病机制提供参考依据。 张生英 武小椿 邢小勇 刘佳 岳亚辉 张阳阳 贺健 温峰琴 包世俊关键词:牛支原体 细胞增殖 狂犬病病毒糖蛋白基因重组逆转录病毒的构建及其免疫效果 被引量:3 2010年 目的构建狂犬病病毒SRV9株糖蛋白(GP)基因的重组逆转录病毒,并检测其对小鼠的免疫效果。方法酶切含狂犬病病毒SRV9株GP基因的质粒pVAX-G,将其克隆至逆转录病毒载体,构建重组质粒pLNCX-G,以脂质体介导转染包装细胞系PA317,筛选阳性细胞克隆并扩大培养。将病毒颗粒感染BHK细胞,采用PCR和RT-PCR法检测GP基因在细胞中的整合及转录,在NIH3T3细胞上测定病毒滴度。以重组逆转录病毒免疫昆明小鼠,通过荧光抗体病毒中和试验(FAVN)法检测小鼠血清抗狂犬病病毒中和抗体效价。结果所构建的重组质粒pLNCX-G经酶切鉴定正确;狂犬病病毒GP基因已整合至BHK细胞基因组中并能正常转录;病毒滴度最高可达1.2×104CFU/ml;肌肉和腹腔注射均可使部分小鼠产生抗狂犬病病毒中和抗体,其阳转率分别为6.7%和86.7%,有效保护率分别为0和76.9%。结论已成功构建了狂犬病病毒SRV9株GP基因的重组逆转录病毒,并可诱导小鼠产生一定的中和抗体,为进一步研究奠定了基础。 赵娜 张守峰 胡永浩 包世俊 王颖 张菲 刘晔 扈荣良关键词:狂犬病病毒 糖蛋白 逆转录病毒 免疫效果 犬细小病毒临床分离株VP2基因进化分析 被引量:1 2019年 为了对犬细小病毒临床分离株的VP2基因进行遗传变异分析,了解本地区犬细小病毒流行的优势型别及病毒变异情况。采集2例患犬细小病毒病的动物粪便,提取病毒基因组,设计特异性引物,PCR扩增VP2基因,对扩增产物测序,对序列结果与同属其他毒株VP2基因序列用MEGA 7和MegAlign进行同源性分析和遗传进化分析。同时比较其氨基酸变异情况。结果显示,PCR扩增出VP2基因,测序结果显示大小为1755 bp,2株病毒VP2基因NCBI序列登录号分别为MH155192和MH155193,MH155192与MF467233.1和JQ743891.1的核苷酸同源性为99.9%,MH155193与KY937651.1、KP260509.1、KY937641.1核苷酸同源性为99.8%。MH155192主要位点氨基酸分别为为267Y,324I,370Q,426D,440A。MH155193主要位点氨基酸分别为267Y,324I,370R,426E,440T。且2株病毒297位均为A。表明分离到的2株病毒分别为新CPV-2b和CPV-2c型。 温峰琴 项海涛 郝宝成 邢小勇 包世俊 胡永浩关键词:犬细小病毒 VP2基因 牛支原体脂蛋白P48单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:1 2016年 为制备牛支原体表面脂蛋白P48的单克隆抗体,应用纯化的牛支原体武威株脂蛋白P48基因的原核表达产物免疫BALB/c小鼠,继而取免疫小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,经克隆和筛选,获得2株能分泌抗牛支原体脂蛋白P48抗体的杂交瘤细胞融合株,并分别命名为C7及E5。ELISA和W estern-blot检测结果表明,2株单克隆抗体均可与牛支原体特异性地结合,而与牛的其他常见病原菌无任何反应。亚类鉴定结果表明,2株单克隆抗体重链均为Ig G 1,轻链均为λ型。稳定性试验结果表明,2株杂交瘤细胞均可稳定分泌单克隆抗体。本研究结果为建立牛支原体有效的检测方法和深入研究脂蛋白P48的生物学功能奠定了基础。 包世俊 胡国明 邢小勇 郝宝成 薛惠文 伏小平 温峰琴 胡永浩 项海涛关键词:牛支原体 单克隆抗体 杂交瘤 中美兽医专业实践教学的比较与分析 被引量:1 2021年 随着动物在人们生活中扮演角色的变换,社会对兽医的能力也提出新的要求。兽医专业的显著特点是较强的实践性,提高学生实践能力对促进大学生就业和培养应用型兽医人才具有重要意义。我国传统的兽医教学中存在重理论,轻实践的现象。从教学设置、教学内容、考核方式、社会宣传等方面介绍了美国密西西比州立大学在兽医实践教学中的一些经验。另外,客观分析了我国目前在兽医实践教学中的现状,两国进行比较后,在课程比例、教学方法、队伍建设等方面提出一些相关措施,以期为我国兽医专业的实践教学改革提供思路。 苟惠天 包世俊 薛慧文 孙晓林 魏衍全关键词:兽医 实践教学