华进联
- 作品数：213 被引量：387H指数：10
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 人类胚胎生殖细胞的分离克隆及生物学特性研究
- 华进联
- 关键词：原始生殖细胞胚胎生殖细胞无血清培养
- 文献传递
- 一种山羊雄性生殖干细胞的体外分离及培养方法
- 本发明公开了一种山羊雄性生殖干细胞的体外分离及培养方法，从雄性山羊的睾丸的曲细精管得到精原细胞，山羊雄性生殖干细胞的分离纯化方法采用0.2％明胶和Matrigel差速贴壁结合克隆法，将未贴壁的山羊雄性生殖干细胞与贴壁培养...
- 华进联朱海鲸
- 文献传递
- 两种激活处理促进小鼠孤雌胚胎原核形成被引量：4
- 2010年
- 不同人工处理方法激活哺乳动物卵母细胞的机理相似,但其激活效率存在差异。本研究以昆明(KM)、129/Sv×KM F1和C3H×KM F1雌鼠来源的卵母细胞为对象,利用氯化锶(SrCl2,Sr2+)联合细胞松弛素B(cytochalasin B,CB)(Sr2++CB)和离子霉素(ionomycin,Ion)联合6-二甲胺基嘌呤(6-dimethylaminopurine,6-DMAP)(Ion+6-DMAP)两种激活方法处理下对比分析不同品系小鼠卵母细胞的激活效率,并以卵母细胞原核形成率、原核数量和孤雌胚胎体外发育来评价两种激活剂的激活效率。研究结果表明,Ion+6-DMAP激活卵的1原核比率显著高于2原核(p<0.05),Sr2++CB激活卵的2原核比率显著高于1原核(p<0.05);KM、129/Sv×KM F1和C3H×KM F1各组孤雌胚胎卵裂率和激活率没有显著差异(P>0.05),但129/Sv×KM F1和C3H×KM F1囊胚发育率显著高于KM组(p<0.05)。3种小鼠品系的卵母细胞用Sr2++CB处理的孤雌胚胎发育率显著高于Ion+6-DMAP。结果证明,Sr2++CB处理小鼠卵母细胞的激活效率明显优于Ion+6-DMAP;129/Sv×KM F1和C3H×KM F1的孤雌胚胎体外发育率显著高于KM小鼠,为研究小鼠遗传背景影响孤雌胚胎发育的机理提供参考。
- 严兴荣陈冬梅华进联雷安民杨艳红都慧聪窦忠英
- 关键词：小鼠卵母细胞孤雌激活原核胚胎发育
- 干细胞与心肌细胞替代治疗被引量：2
- 2004年
- 胚胎干细胞及来源于骨髓、骨骼肌、血管、肝脏、皮肤、脂肪等组织器官的成体干细胞均有多向分化潜能。胚胎干细胞可分化为3个胚层的所有组织细胞。成体干细胞具有可塑性和转分化的潜能。在一定条件下,这些干细胞可被诱导分化为心肌细胞。成年心脏可能存在心肌干细胞,具有增殖和分化为包括跳动性心肌细胞的多种细胞的潜能。因此,干细胞可用于心肌细胞替代治疗,以替代死亡的心肌细胞,改善心脏功能,防治心肌梗塞后心衰、减少心肌重构等症状。本文对干细胞治疗心肌梗塞有关进展及问题作一综述。
- 华进联马勇江杨玉艾杨学义窦忠英
- 关键词：胚胎干细胞成体干细胞心肌细胞心肌干细胞心肌梗塞干细胞治疗
- 一种雌性生殖干细胞的体外分离及培养方法
- 本发明公开了一种雌性生殖干细胞的体外分离及培养方法，从雌性哺乳动物的卵巢的生殖上皮得到细胞，雌性生殖干细胞的分离纯化方法采用0.2％明胶和Matrigel差速贴壁结合克隆法，将未贴壁的雌性生殖干细胞与贴壁培养的其他细胞区...
- 华进联胡玥白耀富
- 文献传递
- 携带CD163报告载体的猪诱导多能干细胞株的建立被引量：2
- 2023年
- 猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophage,PAM)是包括猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)在内的多种高致病病毒的受体细胞,是研究病毒与宿主互作机制的重要模型。然而PAM来源有限,难以满足当前需求。利用猪诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)向巨噬细胞定向诱导是解决PAM细胞数量不足的有效方法。CD163是PAM细胞的重要标记,也是PRRSV等病毒的主要受体。建立实时报告CD163激活程度的报告系统对于建立并优化猪iPSCs向PAM的诱导分化体系具有指导意义。本研究利用CRISPR/Cas9介导的基因编辑系统,设计靶向CD163终止密码子的sgRNA并构建相应的打靶载体,将其导入到猪PAM中的检测报告系统。进一步将该报告系统导入猪iPSCs中,通过碱性磷酸酶染色、免疫荧光染色和EDU染色等手段来检测其安全性。将猪内源CD163的报告载体系统转染至原代PAM中,检测到了红色荧光的表达,证明了该载体系统的可靠性;将CD163-reporter系统转染至猪iPSCs中,获得CD163 reporter-iPSCs。结果表明,CD163 reporter-iPSCs可以维持正常的多能性基因的表达,并具有与正常猪iPSCs一致的克隆形态和增殖能力。证实成功构建了CD163的报告载体,并将其转染至猪iPSCs,获得含有CD163报告载体的猪iPSCs系。该报告载体既不影响猪iPSCs的多能性,又能够实时指示CD163的表达,为深入解析猪iPSCs分化为PAM的机制以及解析PRRSV等重大病原与宿主的互作研究奠定了基础。
- 岳威张炬庆吴晓龙杨昕淳沈巧艳于帅祝振硕王承宝张仕强华进联
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒诱导多能干细胞
- 犬睾丸肿瘤组织中肿瘤标志物Lin28a和OCT4及P53的表达被引量：3
- 2017年
- 睾丸肿瘤细胞起源于生殖细胞和非生殖细胞,生殖细胞来源者主要为成熟的畸胎瘤,非生殖细胞瘤主要包括支持细胞瘤和间质细胞瘤。本研究将贵宾犬的睾丸肿瘤样组织制成石蜡切片,通过HE染色以及免疫组化染色的方法,镜检观察睾丸肿瘤组织的细胞形态以及P53、Lin28a和OCT4等肿瘤发生相关蛋白的表达水平。结果,通过病理切片HE染色显示睾丸肿瘤组织细胞异常增生,导致正常的睾丸管腔结构消失;肿瘤免疫组化检测显示在睾丸曲细精管的支持细胞内OCT4、Lin28a以及P53等肿瘤发生相关蛋白表达呈阴性,而在曲细精管内的生精细胞表达均呈阳性。该结果对于临床上辅助诊断犬的睾丸肿瘤具有一定的参考价值。
- 滕鑫王飞吕长荣周宏超华进联
- 关键词：睾丸肿瘤肿瘤标志物
- 禽痢停防治猪腹泻症
- 1997年
- 禽痢停防治猪腹泻症华进联孙昌伟（西北农业大学秦巴中心陕西杨陵７１２１００）潼关县太要镇某猪场于１９９５年８月先后从市场购进断奶仔猪８０５头，用正大饲料育肥。由于饲养管理不善，腹泻时有发生。连续２个多月发生腹泻３８０头，先后用诺氟沙星、痢菌净、庆大霉素...
- 华进联孙昌伟
- 关键词：猪病腹泻症中药
- 抗猪繁殖与呼吸障碍综合征基因编辑猪研究进展被引量：2
- 2023年
- 猪繁殖与呼吸障碍综合征是由猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的一种病毒性传染病。该病是影响我国生猪产业健康发展的最重要的三大疫病之一。目前对于该病的防控主要依赖于养殖场内外部生物安全体系,采取合理措施降低病毒的污染,切断病毒传播途径。从保护易感动物的角度而言,抗病育种也是疫病防控的重大策略之一。近年来,随着基因编辑技术的发展和成熟,分子育种作为猪抗病育种的核心技术,已显示出其独特的优势。国内外多个研究团队已利用分子育种技术在抗PRRS育种方面取得很多突破性进展。本文以PRRSV受体为切入点,综述当前猪抗PRRS育种的研究现状,以期为PRRS的防控和猪的抗病育种研究提供参考和线索。
- 李双喜华进联
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征抗病育种
- Stella基因真核表达载体的构建及其对小鼠胚胎干细胞多能性的影响
- 2014年
- 构建Stella基因真核表达质粒,转染小鼠胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESC)并初步探讨Stella对减数分裂起始相关基因(Stra8)及胚胎干细胞多能性的影响。通过RT-PCR扩增目的基因,并连接至真核表达载体pEGFP-C1,利用重组质粒转染小鼠胚胎干细胞。对转染细胞进行荧光检测,确认Stella的表达,并利用免疫荧光及PCR检测转染细胞基因表达情况。酶切鉴定及测序分析表明成功构建含Stella基因的重组真核表达质粒,过表达Stella对ES细胞的增殖和形态学特征、进入减数分裂阶段的相关基因及其多能性基因的表达影响并不显著。故此得出结论:Stella在小鼠胚胎干细胞中能够正确表达,但对ES细胞的分化、Stra8基因的表达及其多能性基因的表达并无显著影响。
- 白耀富刘维帅华进联
- 关键词：胚胎干细胞减数分裂多能性
