卢茜
- 作品数：3 被引量：12H指数：1
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 姜黄素对N2a/APP695细胞载脂蛋白E表达的影响被引量：1
- 2014年
- 目的探讨姜黄素对N2a/APP695细胞载脂蛋白E(apolipoprotein E,ApoE)的影响及其可能机制。方法体外培养野生型的N2a细胞与阿尔茨海默病模型细胞,即N2a/APP695细胞;以MTT比色法检测不同浓度姜黄素对N2a/APP695细胞存活率的影响;应用5、10、20μmol/L姜黄素处理细胞48 h后,通过RT-PCR、Western blot分别检测ApoE、低密度脂蛋白受体(low density lipoprotein receptor,LDLR)的mRNA、蛋白水平的变化,采用免疫细胞化学检测ApoE分布情况及表达变化。结果 MTT检测结果显示,姜黄素对N2a/APP695细胞具有明显的保护作用,其中,20μmol/L时保护作用最显著(P<0.05)。RT-PCR、Western blot检测结果显示,与对照组相比,N2a/APP695细胞ApoE的mRNA及蛋白水平显著增加(P<0.01),而LDLR水平明显减少(P<0.01);姜黄素处理N2a/APP695细胞后,ApoE的mRNA及蛋白水平显著减少,LDLR的mRNA及蛋白水平明显增加,均呈剂量依赖性(P<0.05)。免疫细胞化学检测结果显示ApoE主要分布在胞质、胞膜;与对照组相比,N2a/APP695细胞ApoE阳性染色数增多并浓染;经姜黄素处理后,ApoE阳性染色数减少并浅染(P<0.01)。结论姜黄素可显著地抑制体外培养神经元中ApoE的产生,其机制可能与促进ApoE受体LDLR的表达有关。
- 卢茜邓钰双刘莉张玉平郭秀明余刚
- 关键词：阿尔茨海默病载脂蛋白E低密度脂蛋白受体姜黄素
- 黄芩苷增强N2a/APPswe细胞的抗氧化能力并促进核因子E2相关因子2(Nrf2)的核转位被引量：10
- 2015年
- 目的探讨黄芩苷对阿尔茨海默病(AD)转基因N2a/APPswe细胞的保护作用及可能机制。方法应用(0.1、0.5、1、5、10、20)μmol/L黄芩苷处理N2a/APPswe细胞,MTT法检测黄芩苷对细胞存活率的影响。用(1、5、10)μmol/L黄芩苷处理细胞48 h,通过黄嘌呤氧化酶法检测各组细胞超氧化物歧化酶(SOD)的活性,硫代巴比妥酸法检测各组细胞培养上清液的丙二醛(MDA)的含量。荧光实时定量PCR测定核因子E2相关因子2(Nrf2)的mRNA表达,Western blot法检测细胞总Nrf2、核内Nrf2和核因子κB(NF-κB)的蛋白水平。免疫荧光染色观察Nrf2在细胞内的分布。结果 MTT试验结果显示,黄芩苷能促进N2a/APPswe细胞增殖。与对照组相比,模型组SOD活性明显降低,MDA含量明显增多,而黄芩苷能提高SOD活性,抑制MDA的生成,尤其以高剂量组最为明显。黄芩苷处理组与模型组相比Nrf2 mRNA和总蛋白表达均无明显差异,但黄芩苷处理后能显著增加细胞核内Nrf2的含量,下调细胞核内NF-κB的水平。免疫荧光染色结果也证明,黄芩苷能促进Nrf2的核转位。结论黄芩苷增强N2a/APPswe细胞的抗氧化能力并促进Nrf2的核转位。
- 曹惠敏谌贝贝邓钰双卢茜余刚
- 关键词：阿尔茨海默病黄芩苷核因子E2相关因子2
- 小鼠神经母细胞瘤N2a细胞脑啡肽酶基因的表达与启动子区甲基化和组蛋白修饰相关被引量：1
- 2014年
- 目的研究小鼠神经母细胞瘤Neuro-2a(N2a)细胞中脑啡肽酶(NEP)基因表达的表观调控机制,探讨DNA甲基化与组蛋白乙酰化之间的相互作用。方法体外培养N2a细胞,以3μmol/L、5μmol/L DNA甲基化酶抑制5-氮杂脱氧胞苷(5-Aza-dc)及(300、500、700)nmol/L组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)分别处理N2a细胞48 h和24 h。采用逆转录PCR(RT-PCR)、Western blot法分别检测NEP的mRNA、蛋白表达;亚硫酸氢盐测序聚合酶链反应(BSP)法检测NEP基因启动子区DNA的甲基化水平;染色质免疫共沉淀(ChIP)法检测NEP基因启动子区组蛋白H3的乙酰化水平。结果 5-Aza-dc和TSA均能剂量依赖地提高NEP基因的表达(P<0.01);5-Aza-dc可诱导NEP基因去甲基化(P<0.01);TSA可增高NEP组蛋白H3乙酰化水平(P<0.05),但不能明显改变NEP基因DNA的甲基化水平(P>0.05)。结论在小鼠神经母细胞瘤N2a细胞中NEP基因的表达受DNA甲基化及组蛋白乙酰化的调控,组蛋白乙酰化水平并不影响DNA甲基化状态。
- 邓钰双卢茜刘莉李涛张玉平郭秀明余刚
- 关键词：脑啡肽酶组蛋白乙酰化
