吕茂民
- 作品数：152 被引量：296H指数：10
- 供职机构：军事医学科学院野战输血研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>
- 凝血因子Ⅶ基因表达载体的构建及在BHK细胞中的表达
- 目的探索重组人凝血因子Ⅷ(rhFⅧ)在哺乳动物细胞表达系统中的表达效果。方法用PCR的方法从质粒pUC-FⅦ中扩增人凝血因子Ⅶ cDNA,并将其定向克隆入真核表达载体pIRLSneo中,构建重组表达载体pIRES-FⅧ,...
- 吕茂民王娜王栋于群章金刚
- 文献传递
- 血液代用品样品中牛白血病病毒的检测被引量：1
- 2008年
- 史利军邵长利吕茂民章金刚
- 关键词：牛白血病病毒血液代用品安全性检测淋巴细胞VIRUS肿瘤性疾病
- 猪内源性反转录病毒感染HEK293细胞模型的建立被引量：10
- 2003年
- 目的 建立猪内源性反转录病毒感染HEK2 93细胞的模型 ,验证PERV在体外对人源细胞的感染性 ,并进一步研究PERV的生物学特性。方法 将G4 18抗性的HEK2 93细胞与猪源PK 15细胞共培养 ,6周后 ,用含有6 0 0 μg mlG4 18的选择性培养基对共培养细胞进行加压筛选 ,用以除去共培养体系中的PK 15细胞 ;然后应用PCR及RT PCR的方法对所制备的感染细胞模型进行系统鉴定。结果 经 6周共培养及 3周加压筛选后 ,细胞的形态、生长速度及折光性均未见明显变化 ;PCR及RT PCR鉴定表明 ,筛选后的共培养体系中已没有PK 15细胞的存在 ;PERV特异性检测方法检测显示 ,该细胞模型的DNA中已有PERV的整合且有PERV特异性mRNA的表达。结论 本实验成功建立了PERV感染HEK2 93细胞的模型 ,证实了PERV在体外对人源细胞具有感染性 ;
- 吕茂民贾莉玮斯日古愣杨文斌杨姝章金刚
- 关键词：细胞模型病毒安全性异种移植
- 人蛋白C cDNA突变体的设计、克隆与序列分析被引量：2
- 2003年
- 目的 通过对人蛋白C cDNA的定点突变,构建人蛋白C突变体cDNA,以期实现从哺乳动物细胞中直接表达出具有生物活性的人蛋白C产物。方法 针对人蛋白C cDNA序列设计引物以引入突变序列,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和重组PCR方法,从人胎肝总RNA中分别钓取人蛋白C的重链和轻链,经重组PCR反应将两者连接,然后将其克隆入pGEM-T载体中,经酶切和PCR鉴定后进行测序。结果 经RT-PCR和重组PCR扩增获得大小为1374 hp的cDNA片段,并成功构建了人蛋白C cDNA突变体的克隆质粒pGEM-T/mhPC,序列分析证实所引入的编码8个氨基酸短肽的核苷酸序列突变位点正确取代了人蛋白C的活性肽,获得人蛋白C突变体cD-NA的克隆。结论 已成功进行了人蛋白C cDNA的突变,获得了人蛋白c cDNA突变体的克隆,为进一步进行人蛋白C突变体cDNA的表达和活性鉴定奠定了基础。
- 贾莉玮吕茂民徐斯日古愣沈永才赵保全章金刚
- 关键词：CDNA突变体克隆定点突变
- 对肿瘤细胞具有抑制作用的融合蛋白及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种对肿瘤细胞具有抑制作用的融合蛋白及其编码基因与应用，其目的是提供一种对肿瘤细胞具有抑制作用的融合蛋白及其编码基因与构建该融合基因的方法以及以该融合蛋白为活性成分的药物。该融合蛋白具有下述氨基酸残基序列之一...
- 吕茂民章金刚姚站馨
- 文献传递
- 西尼罗病毒筛查与血液相关传播
- 2001年以来,美国发生西尼罗病毒(west nile virus, WNV)流行,引起社会公众的极大恐慌。随着WNV输血相关传播感染的证实,对美国的血液供应带来了巨大的威胁。 WNV于1937年首次发现于乌干达的西尼罗...
- 吕茂民章金刚
- 文献传递
- 尼帕病毒基因结构及其产物被引量：4
- 2003年
- 尼帕病毒 (nipah virus,NV)是新近发现的一种新的副粘病毒 ,因导致 1998～ 1999年马来西亚、新加坡等东南亚国家流行性脑炎而倍受关注。本文就尼帕病毒的基因组结构、编码蛋白的特征、分子诊断技术及与其它负链 RNA病毒的关系等方面综述了其研究进展。
- 杨文斌吕茂民章金刚
- 关键词：尼帕病毒基因结构编码蛋白分子诊断
- 五指山猪内源性反转录病毒5’端非编码区的RACE扩增及其结构和调控元件分析
- 目的获得五指山猪内源性反转录病毒5’端非编码区(5’UTR)cDNA,分析其一级结构和调控元件,为进一步研究其在PERV复制、转录中的调控机制奠定基础。方法采用cDNA末端快速扩增技术(RACE)克隆来源于五指山猪的内源...
- 吴健敏阳玉彪吕茂民谢放郭艳茹章金刚
- 关键词：克隆顺式作用元件
- 文献传递
- 人蛋白C转基因小鼠的建立及乳腺表达
- 2005年
- 目的为了获得乳腺定位表达人蛋白C(hPC)的转基因动物。方法采用分步克隆的方法,构建大鼠乳清酸蛋白(WAP)启动子调控的人蛋白C质粒,命名为pWPC。将该质粒系统鉴定后,用PvuⅠ+SmaⅠ双酶切,回收4·6kb的片段(WAP-hPC-PolyA)。通过显微注射技术,将其注入昆明小鼠受精卵雄原核内;共注受精卵810枚,存活640枚,移植给28只假孕母鼠,怀孕的18只母鼠共产仔81只。结果提取鼠尾基因组DNA进行PCR检测,34只阳性,再经Southernblot检测,其中20只整合阳性;将7只整合阳性母鼠传代,产仔7日后收集乳汁,进行ELISA检测,结果均有表达。结论已成功建立了人蛋白C转基因鼠乳腺生物反应器,为hPC乳腺表达研究奠定了基础。
- 赵宝全章金刚董朝辉贾莉玮沈永才吕茂民姚站馨李伟静孙曼霁
- 关键词：转基因小鼠乳腺生物反应器乳清酸蛋白
- 嗜人性PERV感染性克隆感染人源细胞后Stathmin蛋白表达差异分析
- 猪内源性反转录病毒(Porcine endogenous retroviruses,PERV)是猪→人异种移植中倍受关注的病毒。PERV感染人源细胞后虽然没有细胞病变,但这种隐性感染是否会通过潜在的与宿主细胞相互作用引起...
- 颜奇坡马玉媛吕茂民叶小丽郑霖吴健敏田克恭章金刚
