周长城
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
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- 神经管畸形胎鼠中神经干细胞增殖分化及H3K27me3表达的变化被引量：1
- 2016年
- 目的建立全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)诱导神经管畸形(neural tube defects,NTDs)鼠神经干细胞无血清培养法,了解神经管发育过程中神经干细胞的变化规律及叶酸的干预作用,并观察H3K27me3在NTDs中表达的变化。方法分别取妊娠第15.5天的正常、实验及叶酸干预后的胎鼠神经管分离培养神经干细胞,采用免疫细胞化学鉴定;用神经球计数、直径测量及MTT法检测各组神经干细胞生长情况,免疫细胞化学法分析各组细胞分化情况,Western blot法测定H3K27me3在各组细胞中的表达情况。结果正常组、实验组和叶酸干预组,200倍镜下取5个视野计数神经球数,其平均值分别为(29.4±2.07)、(17.8±2.17)和(23.4±1.52)个,3组间差异有统计学意义(P<0.05);正常组、实验组和叶酸干预组神经干细胞直径的平均值分别为(140.2±4.82)、(106.6±3.85)和(121.8±4.09)μm,3组间差异有统计学意义(P<0.05);正常组、实验组和叶酸干预组神经干细胞诱导分化后Nestin表达量分别为(6±0.9)%、(32±3)%、(21±4)%(P<0.05);实验组中H3K27me3明显高表达。结论 ATRA致NTDs的发生与神经干细胞的数目减少、增殖分化抑制及H3K27me3的高表达密切相关。
- 鲁峰刚杜勇周长城翟思凡
- 关键词：神经管畸形神经干细胞叶酸干预细胞分化
- 叶酸干预对神经管畸形鼠神经管发育的影响研究被引量：2
- 2015年
- 目的构建全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)诱导的神经管畸形鼠模型,探讨叶酸干预对神经管畸形(neural tube defects,NTDs)的预防作用,明确这一过程中Pax3基因表达的变化情况,为神经管畸形的早期防治提供可靠的理论依据。方法将18只性成熟健康雌性SD大鼠随机均分为3组:正常组、畸形组、叶酸干预组。其中,叶酸干预组于孕前2周喂食叶酸添加饲料(60μg·kg-1),直至终止妊娠;畸形组、叶酸干预组于妊娠第10天时给予ATRA(100mg·kg-1)一次性灌胃,正常组给予相同剂量橄榄油。妊娠第15天剖宫取胎,统计伴发畸形率并测定孕鼠血清叶酸、同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)含量及胎鼠Pax3基因表达量。结果 (1)畸形组畸形率(98.61%)高于叶酸干预组(35.09%)(P<0.01),正常组胎鼠未见畸形;(2)病理学观察发现正常组胎鼠发育正常,畸形组以显性脊柱裂为主,胎鼠背侧皮肤及皮下组织出现卵圆形缺损,神经管裸露或者膨出,叶酸干预组脊柱裂位置较畸形组低,缺损面积小,损害程度低;(3)叶酸干预组血清叶酸含量高于正常组与畸形组(P<0.05),畸形组Hcy含量高于正常组和叶酸干预组(P<0.05);(4)畸形组胎鼠Pax3基因表达量较正常组降低,叶酸干预组Pax3基因表达量较畸形组高(P<0.05)。结论叶酸干预可促进神经管正常发育,有效降低NTDs发生率。
- 周长城杜勇赵明佐邢欣然鲁峰刚强小鑫
- 关键词：神经管畸形叶酸
- 胎鼠脊髓神经干细胞分离培养及诱导分化
- 2014年
- 目的探讨机械分离法与酶消化法在脊髓源性神经干细胞(NSCs)体外培养的优劣,并观察脊髓源性NSCs体外培养时增殖和分化的特点。方法取妊娠第15天(E15 d)的胎鼠神经管组织,分别采用酶消化法和机械吹打分离法离散细胞,进行无血清培养,并以上述两种方法传代培养。借助免疫细胞化学法对NSCs及分化结果进行鉴定,细胞球计数法检测成球率,测量神经球直径分析细胞增殖能力,MTT法监测细胞生长情况。结果①培养的细胞具有增殖成球生长的特性并且抗巢蛋白免疫荧光阳性、血清可诱导分化出胶质细胞酸性蛋白(GFAP)、神经元特异性希醇化酶(NSE)阳性表达的细胞。②细胞直径:酶消化组(137.74±11.62)μm,机械分离组(143.69±12.20)μm(P>0.05)。③生长曲线结果显示酶消化组NSCs综合生长增殖能力较高,OD值:酶消化组(0.39±0.15),机械分离组为(0.36±0.13)。结论胎鼠脊髓组织中存在具有自我增殖和多分化潜能的NSCs,原代无血清成球培养时采用酶消化法更有利于获得较多NSCs。
- 赵明佐杜勇刘海阳周长城强晓鑫简鹏
- 关键词：神经干细胞无血清培养诱导分化
- 叶酸干预对神经管畸形鼠Pax3基因及H3K27me3的作用研究
- 目的：构建全反式维甲酸（all-trans retinoic acid，ATRA)诱导的神经管畸形鼠模型，了解神经管畸形(neural tube defects，NTDs)形成过程中Pax3基因表达及H3K27三甲基化状...
- 周长城
- 关键词：叶酸干预神经管畸形早期诊疗动物模型基因表达
- 文献传递
