宋学雄
- 作品数：47 被引量：81H指数：6
- 供职机构：青岛农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学医药卫生更多>>
- 牛卵母细胞体外培养成熟前后及体外受精卵SDH的电镜细胞化学研究
- 1990年
- 本文用Kerple-Fronius和Hajos的电镜细胞化学方法,对牛卵巢2-5mm卵泡中的卵母细胞及体外培养成熟卵和体外受精卵,进行了琥珀酸酶(SDH)定位及活性变化的研究.观察结果培养前的卵母细胞酶活性较明显,主要定位于线粒体膜上,内脊上也有少量的定位.体外培养成熟卵线粒体上的酶活性明显减弱.而体外受精卵在线粒体的膜及内脊上都有很强的酶活性定位.结果表明,牛卵母细胞的SDH活性随卵母细胞的成熟过程减弱,随受精过程增强. 本文还从超微结构角度上。
- 宋学雄秦鹏春杨庆章谭景和
- 关键词：牛卵母细胞体外受精卵琥珀酸脱氢酶电镜细胞化学
- 猪骨髓间充质干细胞分离培养及生物学特性被引量：5
- 2013年
- 采集健康猪股骨骨髓,利用percoll梯度离心法分离单个核细胞,进行体外原代和传代培养,并用不同代数细胞进行了细胞生长能力、膜表面抗原(CD105、CD90、CD45)及诱导分化能力的检测。结果显示分离培养的单个核细胞贴壁生长,形态呈成纤维细胞样及涡旋状克隆团;细胞传代至第17代生长状况仍然良好;用F 3代细胞进行膜表面抗原标记显示,CD90和CD105阳性表达率分别为(97.4±1.8)%和(99.6±0.9)%,而CD45阳性表达率仅为(1.8±0.55)%,证实这些细胞具有猪骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem Cells,MSCs)表面抗原;经地塞米松、维生素C和β-磷酸甘油等诱导F 3代细胞,21d后出现钙物质沉积细胞群,用茜素红和Von kossa染色呈阳性,证实这些细胞已分化形成成骨细胞;经地塞米松、IBMX、胰岛素及吲哚美辛等诱导F 3代细胞,21d后细胞质出现脂滴样结构,用油红O染色呈阳性,证实已分化形成成脂细胞;冷冻-解冻细胞的膜表面抗原及多能分化能力与未冻存细胞的检测结果基本一致。结果证实,从猪骨髓中分离培养及经传代扩增获得的贴壁细胞是纯化的MSCs。
- 高健梁桂金朴英姬李方正张文平宋学雄
- 关键词：骨髓间充质干细胞诱导分化
- 猪卵巢卵母细胞体外成熟及体外受精过程中皮质颗粒变化的研究被引量：6
- 2000年
- 目的 研究猪皮质颗粒在体外成熟及体外受精过程中的变化 ,以及皮质颗粒与多精受精的关系。 方法 用异硫氰荧光素联接的花生四烯酸 (FITC- PNA)标记体外成熟不同时间及体外受精不同时间皮质颗粒。 结果 皮质颗粒在猪卵母细胞体外成熟过程中逐渐由皮质部向卵质膜下迁移 ,并在质膜下排布成单层。体外成熟过程中所排出的第 1极体也被 FITC- PNA所标记 ,说明第 1极体中含有皮质颗粒。在对不同体外成熟时间的卵母细胞进行授精时发现 ,皮质颗粒的释放速度与体外成熟时间呈正比例关系。为进一步证实皮质颗粒的排放速度与多精受精之间的关系 ,还进行了精子穿透实验。结果显示 ,体外成熟 48h的卵母细胞其多精受精率为 73% ,比体外成熟36 h(83% )、2 4h(80 % )的卵母细胞要低。并且进入卵子的精子数目 (1.7)比后两者 (分别为 3.1和 2 .9)的少。
- 杨信志宋学雄岳奎忠谭景和杨庆章
- 关键词：体外成熟体外受精皮质颗粒
- 细胞色素P450芳香化酶活性调控对小鼠卵巢发育的影响
- 2010年
- 本研究旨在探索P450芳香化酶抑制剂(来曲唑)对小鼠卵巢发育的影响。将SPF级昆明系雌性小鼠随机分为对照组和2、4、6、8、10、30、50g/kg来曲唑剂量组,连续灌服3d,在停药后的第9、15和30天观测小鼠卵巢的发育情况。结果表明:①在停药后第9、30天的6和8g/kg组及第15天的4～10g/kg组的卵巢指数显著高于对照组(P<0.05),而停药后第15和30天的50g/kg组显著低于(P<0.05)对照组和2～10g/kg组;②在停药后第9和15天的4～8g/kg组及停药后第30天的6g/kg组的初级卵泡数显著高于(P<0.05)对照组和其它各试验组,而停药后第9天的30和50g/kg组、第15天的50g/kg组及第30天的10～50g/kg组都显著低于(P<0.05)对照组和其它各试验组;③在停药后第9、15和30天的4～8g/kg组的次级卵泡数都显著高于对照组(P<0.05);而停药后第9天的30和50g/kg组、第30天的50g/kg组都显著低于对照组(P<0.05);④在停药后第9天的4～8g/kg组、第15天的6和8g/kg组及第30天的2～8g/kg组的成熟卵泡数都显著高于对照组(P<0.05);而停药后第9天的10～50g/kg组、第15、30天的30和50g/kg组几乎没有成熟卵泡的形成。以上结果表明,用6g/kg来曲唑浓度可一定程度抑制P450芳香化酶的活性,降低内源性雌激素合成,能够促进小鼠卵巢和卵泡的发育。
- 薛青光宋学雄楚宁宁孙旺吾曹俊新曲洪磊
- 关键词：小鼠卵巢来曲唑
- α-D-甘露糖残基在猪透明带中的分布及其在受精中的作用
- 2006年
- 为证明α-D-甘露糖残基在猪透明带中的分布及其在受精中的作用,用异硫氰酸荧光素络合小扁豆凝集素(fluorescein isothiocyanate-labelled Lens culinaris,FITC-LCA,一种D-甘露糖特异结合植物凝集素)标记去除卵丘细胞的体外成熟猪卵母细胞,用于观察LCA的标记情况及体外受精,并用甘露聚糖进行体外受精的竞争抑制实验及检测对精子顶体反应的影响.结果显示,LCA均匀标记于整个透明带且呈强荧光反应;LCA标记能够显著减少透明带表面精子结合数量并几乎完全阻断卵母细胞的受精能力;甘露聚糖能够显著降低透明带精子结合数量和卵母细胞的受精率;甘露聚糖在精子培养的不同时间段上都能明显增加顶体反应的精子数量.这些结果表明,猪透明带糖蛋白上的α-D-甘露糖残基是精子受体的重要组成部分,它能够诱导精子发生顶体反应,促进精子侵入透明带.
- 宋学雄李方正曹国强张进玉韩毅冰
- 关键词：透明带受精小扁豆凝集素
- 猪AMSCs成脂分化过程中KLF4的表达模式
- 旨在探讨猪脂肪间充质干细胞(AMSCs)成脂分化过程中Kruppel样因子4(KLF4)的表达模式。采用F3代以上猪AMSCs进行成脂诱导分化,用油红O染色提取法检测成脂分化程度,用PCR和荧光定量PCR检测KLF4的表...
- 李秀李方正郇延军高霞刘志敏姜忠玲宋学雄
- 关键词：成脂分化KLF4
- 文献传递
- 猪骨髓间充质干细胞分离培养和诱导分化脂肪细胞被引量：5
- 2015年
- 采用全骨髓培养法分离猪骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)并传代培养;取第4代纯化的MSCs在成脂诱导培养基中诱导分化;分化的成脂细胞用形态学和油红O染色法进行鉴定;用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测成脂分化标志基因PPARγ2和LPL mRNA的表达情况。结果显示,分离培养的猪MSCs细胞经连续传代形态上无明显改变;MSCs在成脂分化培养液中诱导分化2d开始有少量脂滴出现,油红O染色成阳性,诱导18d成脂转化率可达59.8%;在诱导分化第5、10、15天时,PPARγ2mRNA相对表达量分别是(5.065±0.159)、(6.268±0.340)、(9.277±0.261),LPL mRNA的相对表达量分别是(10.995±1.473)、(13.130±0.712)、(15.762±0.934)。结果表明,用本诱导条件诱导猪MSCs向脂肪细胞分化,经形态学和油红O染色鉴定,成脂细胞分化率可达60%,且随分化时间的延长,脂肪细胞标志基因表达增加。
- 张庆美李方正蒋忠玲孙东兴李东建宋学雄
- 关键词：骨髓间充质干细胞诱导分化脂肪细胞
- 兔胎儿肝脏发育及造血作用的形态学观察
- 2015年
- 为阐明兔胎儿肝脏发育与造血作用的组织学特征,用4组兔胎儿(平均体长分别为1.9、2.75、4.7 cm和10.35cm)肝脏,经石蜡切片,显微镜观察组织结构变化。结果显示:在1.9 cm组,肝实质已形成几个初级中央静脉,细胞索细胞密度稀疏,索内细胞以卵圆样细胞为主,散在少量多边形细胞,在细胞索间隙充满含有核幼红细胞的造血灶;在2.75cm组,中央静脉增多,肝细胞索细胞密集,窦状隙内以无核红细胞为主,有核幼红细胞减少;在4.7 cm组,中央静脉内皮细胞连续完整,肝细胞索多边形细胞增多,卵圆样细胞减少,索间隙变窄,含有成熟的有核红细胞,造血灶消失;在10.35 cm组,肝细胞索以多边形细胞为主,分散有少量的卵圆样细胞。这些结果表明,1.9 cm胎儿组是肝脏造血作用旺盛时期,2.75 cm胎儿肝脏造血作用减弱,而4.7 cm胎儿已无造血作用。
- 孙东兴吴丹丹姜忠玲李方正宋学雄
- 关键词：胎儿肝脏发育造血作用形态学
- shRNA在抗猪瘟病毒中稳定遗传表达的研究进展被引量：1
- 2013年
- RNA干扰(RNA interference,RNAi)是一种能特异性地介导同源基因沉默的现象,随着对其机制的深入了解,它在病毒性疾病的治疗和预防上发挥出日益重要的作用。本文介绍了RNAi的作用机制,干扰RNA载体短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)及其与转基因技术结合防治猪瘟病毒的作用,并从供体细胞类型的选择、干扰RNA的设计、位置效应及RNAi脱靶效应4个方面对影响RNAi持续干扰猪瘟病毒复制的因素进行了综述。
- 许小琴宋学雄黄天华
- 关键词：RNA干扰猪瘟病毒转基因短发夹RNA
- 电穿孔法介导抗猪瘟病毒质粒DNA转染仔猪成纤维细胞研究
- 2013年
- 本研究旨在用电穿孔法介导抗猪瘟病毒基因质粒转染仔猪成纤维细胞,优化电穿孔法转染条件。采用本实验培养的P6代仔猪成纤维细胞,用电穿孔法介导转染抗猪瘟病毒质粒,在电压、脉冲时间、脉冲次数、质粒DNA用量、电击后温度、电击缓冲液、质粒DNA构型等方面进行了转染条件优化的探索。结果显示,当电压为220V、脉冲时间25ms、脉冲1次,环形DNA用量为12μg,电击缓冲液为限定电转液时,细胞转染率高达47.49%。这些结果表明,用电穿孔法介导抗猪瘟病毒基因质粒转染仔猪成纤维细胞,可获得比较理想的细胞转染率。
- 张文平周婧李方正宋学雄
- 关键词：电穿孔转染
