崔晓东
- 作品数:56 被引量:107H指数:7
- 供职机构:山西大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金山西省自然科学基金山西省科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生轻工技术与工程农业科学更多>>
- 双抗夹心酶联免疫吸附法检测荞麦过敏蛋白被引量:3
- 2015年
- 提取制备荞麦过敏原蛋白(TBt)并免疫动物,分别制备鼠多克隆抗体和兔多克隆抗体,建立了双抗夹心酶联免疫吸附检测法(ELISA)用于检测食品中的荞麦过敏原。SDS-PAGE结果表明,纯化的TBt纯度达到98%以上,鼠抗血清效价为1∶6400。建立的双抗夹心ELISA法对荞麦过敏原蛋白的最低检测限为0.16μg/m L,线性范围为0.16~16μg/m L。并采用建立的双抗夹心ELISA法对市场出售的15种食品中荞麦过敏成分进行了检测。结果显示,该方法对绝大多数食品中的荞麦过敏原都有很好的特异性及灵敏性,说明该法可用于食物过敏原的诊断及食品中微量荞麦过敏成分的检测。
- 张新瑀崔晓东杨欢葛川王转花
- 关键词:荞麦多克隆抗体酶联免疫吸附法
- 利用昆虫表达系统生产芦丁水解酶并制备槲皮素的方法
- 本发明公开一种利用昆虫表达系统生产芦丁水解酶并制备槲皮素的方法。本发明利用RT‑PCR方法获得FtRHE基因,与pFastBac Dual载体进行连接,获得重组的pFastBac Dual‑FtRHE质粒,并将该质粒转化...
- 崔晓东王转花杜程
- 一种重组型荞麦胰蛋白酶抑制剂突变体以及胰蛋白酶亲和材料
- 本发明公开了一种重组型荞麦胰蛋白酶抑制剂BTI突变体,命名为e‑BTI,其特征在于,根据BTI的基因序列,设计突变引物,对BTI的S41T以及P44T位点进行突变得到。本发明制得的e‑BTI热稳定性明显高于BTI,而且显...
- 李晨崔晓东李娇
- 文献传递
- rBTI联合紫杉醇通过激活NFκB/p65促进MCF-7细胞凋亡
- 2014年
- rBTI、紫杉醇均有抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡等作用,但两者联合用药对肿瘤细胞的影响尚不明确.本文通过MTT比色法检测rBTI与紫杉醇联合作用对MCF-7细胞增殖的影响;采用流式细胞术分析,对MCF-7细胞凋亡以及ROS水平进行检测;利用qRT-PCR和Western印迹方法,检测rBTI与紫杉醇联合作用后凋亡因子表达情况.结果表明,rBTI(2.5μmol/L)与紫杉醇(0.05~0.5μmol/L)联合作用于MCF-7细胞后,能显著抑制其增殖.将rBTI与紫杉醇进行联合协同用药,诱导了MCF-7细胞凋亡及ROS的产生;同时与rBTI单独作用时相比,联合作用明显上调了p53、Bax的表达,促进了IκBα蛋白的磷酸化以及NFκB/p65的核转位;与rBTI组和紫杉醇单独作用组相比,两者联合用药明显下调了Bcl-2和CyclinD1的表达.本研究证实,rBTI联合紫杉醇通过诱导ROS的产生,激活NFκB/p65信号转导途径,协同促进MCF-7细胞的凋亡.
- 李玉英吴燕子白崇智崔晓东王转花
- 关键词:紫杉醇核转录因子MCF-7细胞活性氧凋亡
- 一种诱导DC细胞成熟的苦荞提取物、培养基及诱导方法
- 本发明公开了一种DC细胞成熟的苦荞提取物、凝集素、诱导DC细胞成熟的培养基及诱导方法。所述苦荞提取物的提取方法包括:提取苦荞种子所含蛋白质;Resource Q阴离子交换层析;和Sephadex G75凝胶过滤层析,获得...
- 白崇智王转花李玉英崔晓东
- 文献传递
- 一种芝麻粕阳离子多肽的制备方法和应用
- 本发明提供了一种芝麻粕阳离子多肽(Cationic?Peptides?of?Sesame?Pomace,CPSP)的制备方法,以及该多肽在制备功能性食品中的应用。其制备方法是将芝麻粕粉碎,加入蛋白提取液提取,随后加入硫酸...
- 崔晓东王转花马晓丽
- 文献传递
- 特异性过敏原TBt多克隆抗体的制备与鉴定被引量:1
- 2011年
- 目的:制备特异性苦荞主要过敏原TB t的多克隆抗体,为深入研究TB t分子中各结构域的功能奠定基础。方法:通过盐析,离子交换层析,分子筛层析等方法从苦荞种子中纯化出过敏蛋白TB t,免疫新西兰兔子,制备多克隆抗体。用间接ELISA、W estern b lot检测该抗体的效价和特异性;竞争ELISA研究IgG抗体对TB t过敏患者血清IgE的抑制作用。结果:间接ELISA法检测所制备抗体的效价达1∶256 000左右;W estern b lot显示该抗体能与TB t蛋白特异结合;竞争ELISA表明制备的IgG抗体能够特异性抑制荞麦过敏患者血清IgE与过敏蛋白的结合。结论:制备的TB t多抗血清具有较高的效价和良好的特异性,该多克隆抗体可用于TB t的免疫活性鉴定,为下一步研究该蛋白的分子特征及免疫治疗奠定了基础。
- 杨振煌崔晓东李平李玉英王转花
- 关键词:苦荞多克隆抗体
- 一种杨梅素氧化产物及其制备方法和应用
- 本发明涉及生物化学技术领域,公开了一种杨梅素氧化产物及其制备方法和应用,本发明首次利用辣根过氧化物酶催化的方法改造了杨梅素,获得了杨梅素氧化产物,该杨梅素氧化产物在提高杨梅素水溶性的同时,保留了杨梅素大部分的抗氧化活性,...
- 李娇孙敏李晨崔晓东
- 一种重组型荞麦胰蛋白酶抑制剂突变体以及胰蛋白酶亲和材料
- 本发明公开了一种重组型荞麦胰蛋白酶抑制剂BTI突变体,命名为e‑BTI,其特征在于,根据BTI的基因序列,设计突变引物,对BTI的S41T以及P44T位点进行突变得到。本发明制得的e‑BTI热稳定性明显高于BTI,而且显...
- 李晨崔晓东李娇
- 文献传递
- 苦荞凝集素的纯化及性质鉴定被引量:7
- 2015年
- 目的:从苦荞麦种子中提取、纯化苦荞凝集素,对其凝血及酶学活性等性质进行初步研究。方法:采用缓冲液抽提、硫酸铵沉淀、透析及DEAE-纤维素阴离子交换层析(DEAE fast flow,DEAE FF纯化凝集素;高碘酸希夫(periodic acid-Schiff,PAS染色鉴定其蛋白种类,硫酸-苯酚法测定糖含量;凝血实验和糖抑制实验检测其凝血活性和结合糖特异性;以对硝基苯磷酸二钠为底物,测定磷酸酯酶活性。结果:从苦荞麦种子中获得了一种具有凝血功能的蛋白质——苦荞凝集素(tartary buckwheat lectin,TBL)。纯化的TBL在十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE图谱上显示单一条带,根据SDS-PAGE计算其分子质量约为62 kD。PAS染色证明TBL为糖蛋白,糖含量为5.8%。凝血实验表明TBL对人的O型血红细胞具有特异性凝集作用,效价为15μmL对其他血型的红细胞没有凝血效应。血凝活性被D甘露糖和D-葡萄糖抑制,推测其是一种甘露糖结合凝集素。酶学性质鉴定显示,TBL具有磷酸酯酶活性,米氏常数Km=9.86×10-3 mol/L。结论:TBL可能是苦荞麦种子中的一种具有多种酶学功能的甘露糖凝集素。
- 申剑崔晓东李玉英王转花
- 关键词:苦荞凝集素糖蛋白磷酸酯酶