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布鲁氏菌S2 WboA基因缺失株的构建及免疫效果被引量：18: 2008年; 【目的】WboA基因编码光滑型布鲁氏菌脂多糖(LPS)O-侧链合成必须的糖基转移酶,该基因的缺失或破坏会影响布鲁氏菌光滑型表型的形成。本研究拟构建WboA基因缺失的重组粗糙型布鲁氏菌,以使布鲁氏菌弱毒疫苗与野毒株布鲁氏菌感染相区分。【方法】以猪源光滑型布鲁氏菌S2株为研究对象,通过同源重组将氯霉素抗性基因(Cmr)完全替代S2株的WboA基因,获得重组粗糙型布鲁氏菌rS2-WboA株。【结果】rS2-WboA株在适宜的培养基(TSA)上传50代后仍保持对氯霉素的抗性。用1×107 CFU rS2-WboA免疫Balb/c小鼠和豚鼠,1个月后均能通过平板凝集试验检测到粗糙型抗体。1×1011 CFU rS2-WboA菌攻毒Balb/c小鼠后,不会引起死亡,并且能抵抗200 CFU强毒M28的攻击。小鼠试验显示了rS2-WboA与原始株S2相似的保护性和更高的安全性,其保护性也略高于另一重组株rS2-WbkC。【结论】WboA可作为构建重组粗糙型布鲁氏菌疫苗株缺失的靶基因。; 丁家波程君生牟巍毛开荣张尔利蒋玉文; 关键词：布鲁氏菌免疫性

布鲁氏菌种属鉴定多重PCR方法的建立及初步应用: 用BCSP31作为布鲁氏菌属特异性基因,以IS711基因拷贝数差异作为布鲁氏菌种间特异性标志,建立了布鲁氏菌种属特异性的多重PCR鉴定方法。用建立的多重PCR方法,对11株(牛种A19,A544,A387;羊种M111,...; 丁家波张存帅程君生彭小兵蒋颖张尔利蒋玉文毛开荣; 关键词：布鲁氏菌多重PCR; 文献传递

布鲁菌种属鉴定多重PCR方法的建立及初步应用被引量：14: 2009年; 用BCSP31作为布鲁菌属特异性基因,以IS711基因拷贝数差异作为布鲁菌种间特异性标志,建立了布鲁菌种属特异性的多重PCR鉴定方法。用建立的多重PCR方法对11株(牛种A19,A544,A387;羊种M111,M28,M16;犬种RM6/66;绵羊种63/290;猪种S2,rS2,S1330)不同种来源的布鲁菌菌体和基因组进行鉴定,结果牛种菌能扩增大小分别为494,223,178bp3条带,羊种菌能扩增出大小分别为733,223,178bp3条带,犬种菌能扩增出大小分别为223,178bp2条带,绵羊种菌能扩增出大小分别为976,223,178bp3条带,猪种菌能扩增出大小分别为285,223,178bp3条带,均与预期一致;而作为对照的大肠杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌、流产沙门菌和都柏林沙门菌,均未扩增出任何条带。结果表明,本研究所建立的方法具有良好的特异性,能够区分不同种源的布鲁菌,可用于布鲁菌种属的快速鉴定和流行病学调查。; 丁家波张存帅彭小兵蒋颖程君生张尔利蒋玉文毛开荣; 关键词：布鲁菌多重PCR

牛结核病Dot－ELISA快速检测试剂盒: 本发明提供了一种牛结核病快速、敏感的诊断方法。该方法通过基因重组技术，利用大肠埃希氏菌体外共表达牛结核分枝杆菌早期分泌蛋白EAST6和CFP10，表达产物经纯化和定量后吸附到硝酸纤维素膜上作为检测抗原，从而建立具有良好敏...; 丁家波牟巍蒋玉文张存帅毛开荣张尔利程君生; 文献传递

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