公共文化服务平台

张雪: 作品数：11 被引量：54H指数：4; 供职机构：北京农学院动物科学技术学院更多>>; 发文基金：北京市自然科学基金北京市属高等学校人才强教计划资助项目北京市科技计划项目更多>>; 相关领域：农业科学理学文化科学更多>>

合作作者

副鸡禽杆菌lpxM蛋白的原核表达及免疫原性研究被引量：1: 2024年; [目的]探究副鸡禽杆菌(Avibacterium paragallinarum)外膜蛋白lpxM的免疫原性,为预防鸡传染性鼻炎提供理论参考。[方法]构建pET-28a-lpxM原核表达载体,经PCR扩增和双酶切鉴定后将阳性质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,用IPTG进行诱导表达,并对诱导时间和诱导浓度进行优化,用尿素缓冲液纯化重组蛋白lpxM并进行SDS-PAGE分析。利用Western blotting鉴定重组蛋白的特异性。将重组蛋白与MONTANIDEISA 71 VG佐剂制备成疫苗v-lpxM,通过动物试验观察重组蛋白的免疫效果。[结果]重组质粒pET-28a-lpxM转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导后成功表达,在37 ku处有目的蛋白特异性条带,在37℃、700 mmol/L IPTG、诱导4 h时蛋白表达量最高;重组蛋白lpxM在上清和沉淀中均有表达,且在沉淀中表达量相对较高;Western blotting结果显示,C型副鸡禽杆菌Modesto株的阳性鸡血清与纯化后的重组蛋白可发生免疫反应。免疫保护试验结果显示,v-lpxM疫苗对A、B和C型副鸡禽杆菌的保护率分别为0、20%和60%。[结论]本研究成功构建了原核表达载体pET-28a-lpxM,实现了lpxM重组蛋白的高效表达,且表现出良好的免疫原性。研究结果为探究副鸡禽杆菌外膜蛋白lpxM的免疫学特性以及为鸡传染性鼻炎的预防和疫苗的研发奠定了基础。; 梁之瑄梅晨张雪徐浩钧支岩李焕荣李焕荣; 关键词：副鸡禽杆菌原核表达免疫原性

猪流行性腹泻病毒Real-timePCR检测方法的建立被引量：6: 2014年; 为定量检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)载量,建立PEDV的Real-time PCR方法。用RT-PCR方法扩增PEDV的M基因片段,构建含有M基因片段的重组质粒,用该重组质粒进行SYBR Green I Real-time PCR,来建立检测PEDV的荧光定量PCR方法。结果显示:在(5.56×102～5.56×107)拷贝/μL范围内,所建立方法具有优良的线性关系,其决定系数为0.9996,扩增效率为99.5%,扩增产物的熔解曲线只有一个特异性峰,无引物二聚体峰,熔解温度为(81.18±0.21)℃。该方法对猪传染性胃肠炎病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒、猪圆环病毒II型等猪源病毒均检测不到扩增产物,重复性试验的变异系数小于3%,对临床样品的检出率高于常规PCR方法。研究结果表明:建立的Real-time PCR检测方法特异性强、重复性好、灵敏性高,可用于PEDV的定量检测及其早期感染的快速诊断。; 孟凡伟张雪王俊单晶晶王鹏周双海王志军; 关键词：猪流行性腹泻病毒 SYBR I REAL-TIME PCR

1-MCP对桃果实内源乙烯及缝合线软化的影响被引量：1: 2012年; 为了明确桃果实缝合线软化与乙烯的关系,用1-MCP(1-methylcyclopropene)处理生长期的桃果实,用气相色谱测定乙烯的发生,观察缝合线软化果的发生率以及1-MCP对叶片和果实品质的影响。结果表明,1-MCP能有效地降低生长前期桃果实缝合线部位及种仁中乙烯的水平;减少种胚败育,其败育率仅为对照的20%;减少缝合线软化果的比例,软果率仅为2%,而对照则高达23%;1-MCP未对果实品质和叶片产生不良影响。因此认为1-MCP不仅能抑制果实采后贮藏过程中乙烯的发生,而且也能抑制生长期果实中乙烯的发生,可为采前生产上应用提供参考。; 刘志民贾小丽张雪马焕普; 关键词：乙烯

大学生就业的心理指导与职业规划: 2008年; 笔者根据近年来大学生就业所面临的困难,在心理调适与今后的职业规划等方面做出指导,希望大学生能正确面对就业问题,早日找到令人满意的工作,并在工作岗位上实现自己的社会与个人价值。; 张雪马淑芹; 关键词：就业心理调适

青贮玉米淀粉测定方法的研究被引量：3: 2022年; 本研究以‘北农青贮368’、‘京科青贮516’、‘京科968’、‘东科301’为研究对象,采用单因素和响应面试验优化青贮玉米中的可溶性糖的提取工艺,通过酶-DNS(3,5-Dinitrosalicylic acid)法与近红外扫描法测定青贮玉米淀粉含量,旨在获得青贮玉米中淀粉含量测定的最佳方法。结果表明:(1)可溶性糖提取的最佳工艺为料液比1∶58(g/mL),提取温度为86℃,提取时间为61 min,此条件下可溶性糖含量为11.25%。(2)酶-DNS法测定青贮玉米品种及其全株/秸秆淀粉含量分别为‘东科301’(43.95%/6.72%)、‘北农青贮368’(29.65%/6.28%)、‘京科青贮516’(31.09%/4.58%)、‘京科968’(39.22%/5.87%),相对标准偏差为0.04%~0.45%。(3)近红外扫描法青贮玉米品种及其全株/秸秆淀粉含量分别为‘东科301’(42.96%/5.88%)‘、北农青贮368’(28.39%/6.06%)、‘京科青贮516’(30.22%/4.91%)、‘京科968’(36.15%/5.94%)。两种方法相比差异不显著(P>0.05),酶-DNS法与近红外扫描法均可用于青贮玉米中淀粉含量的测定。研究结果可为快速、便捷测定青贮玉米中淀粉含量提供参照依据。; 张雪刘子放南张杰张秋芝; 关键词：青贮玉米近红外光谱法响应面法

清凉冲剂对鸡肠黏膜IgA^+的动态影响被引量：2: 2006年; 农大3号1日龄公雏300只,随机分为3组,每组100只。试验Ⅰ、Ⅱ组分别给予清凉冲剂Ⅰ(石膏、藿香、苍术、黄柏按等比例)和清凉冲剂Ⅱ(苍术∶黄柏∶石膏∶藿香=1∶1∶0.5∶1),按饲喂日粮0.1%添加,饮水投药。另一组为对照组。于7、21、35、49日龄剖杀,从十二指肠、空肠、回肠分别采取2 cm的肠段,利用免疫组化方法测定肠道中IgA+平均阳性表达率。结果表明:试验组肠黏膜中IgA+平均阳性表达率均随日龄增加而上升,49日龄时最为明显,其中十二指肠、空肠中IgA含量,试验Ⅱ组高于试验Ⅰ组;回肠中IgA含量,试验Ⅰ组比试验Ⅱ组高,与对照组相比存在显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)差异。表明清凉冲剂可以提高鸡的黏膜免疫指标IgA的含量。; 刘凤华许剑琴胡艳欣张雪; 关键词：清凉冲剂小肠 IGA

2011-2013年我国部分地区猪传染性胃肠炎病毒与猪流行性腹泻病毒的检测与分析: 引言由猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)引起的猪传染性胃肠炎(TGE)和由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的猪流行性腹泻(PED)是危害猪的主要急性胃肠道传染病,二者的临床特征极为相似,难以进行临床鉴别诊断[1];而PCR技...; 于红欣张雪孟凡伟周双海

桃果实缝合线软化过程中内源激素的变化被引量：22: 2008年; 为了明确桃果实缝合线过早软化的原因,以大久保桃为试材,利用气质联用和高效液相色谱的方法,对缝合线软化果(障碍果)和正常果的种仁、缝合线处果肉和其它部位果肉中的生长素(IAA)、玉米素(Z)、脱落酸(ABA)、茉莉酸(JA)的浓度进行了测定分析。结果表明,果肉ABA浓度是种仁的8～9倍,并随着果实的发育逐渐增加,接近成熟时达到最高,主要表现出对果肉成熟的调控作用。障碍果中Z的浓度在内果皮硬化初期明显高于正常果,与其缝合线异常生长(凸起)吻合;障碍果种仁的IAA浓度在内果皮硬化初期明显低于正常果,果肉中IAA浓度在内果皮硬化后上升,且障碍果高于正常果,说明IAA对中果皮细胞的扩大与成熟软化起调控作用。JA在种仁中的浓度是果肉的3～6倍,在硬核初期障碍果明显低于正常果,到硬核结束时则高于正常果,推测可能JA与内果皮发育有关。; 张雪刘志民陈华君马焕普; 关键词：桃果实

猪传染性胃肠炎病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用被引量：11: 2015年; 为了建立一种定量检测猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的实时荧光定量PCR方法,用RT-PCR扩增TGEV的M基因片段,构建含有TGEV M基因片段的重组质粒。用系列稀释后的重组质粒为模板,基于SYBR GreenⅠ来进行检测TGEV的实时荧光定量PCR扩增。结果显示,扩增效率为103.0%,相邻扩增曲线之间间距均匀,所有产物的熔解曲线具有单一整齐的峰,标准曲线具有优良的线性关系,最低可准确检测63copies/μL的核酸模板,重复性试验的变异系数小于3%。用建立的PCR对3种常见猪源RNA病毒的检测结果均为阴性,对65份临床样品的检出率高于常规PCR。结果表明,建立了一种灵敏度高、特异性强、重复性好的检测TGEV的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,可用于TGEV的定量检测和猪传染性胃肠炎的早期快速诊断。; 张雪杨倩于红欣王俊孟凡伟周双海; 关键词：猪传染性胃肠炎病毒 SYBR 荧光定量PCR 早期快速诊断

猪圆环病毒1型与2型双重PCR检测方法的建立及应用被引量：7: 2019年; 【目的】建立一种可同时检测猪圆环病毒1型(PCV1)和2型(PCV2)的双重PCR检测方法并进行临床应用。【方法】对PCV1和PCV2的单项PCR方法分别进行条件优化后对两种病毒的双重PCR进行条件优化并进行特异性与敏感性试验,然后用单项PCR方法和双重PCR对临床样品进行比较检测。【结果】双重PCR检测方法对PCV1和PCV2的检测灵敏度分别为1.7×10~3、4×10~3 copies/μL,该方法对当前常见猪源DNA病毒的检测结果都是阴性。该方法对2013—2017年15个猪场的145份断奶仔猪样品的检测结果显示,PCV1和PCV2的个体阳性率分别为11.7%和77.2%,与单项PCR方法检测结果无显著(P>0.05)差异,且两种方法检出的PCV1或PCV2的阳性猪场完全一致;临床样品中PCV2的猪场阳性率与个体阳性率都极显著(P<0.01)高于PCV1。【结论】建立了一种有较高敏感性与特异性的PCV1和PCV2的双重PCR检测方法,当前猪场中PCV2感染较PCV1感染明显占优势。; 王立娇胡胜云张雪张雪于红欣周双海; 关键词：猪圆环病毒1型猪圆环病毒2型双重PCR

张雪

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

张雪

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈