徐祎欣 作品数:9 被引量:7 H指数:2 供职机构: 南京大学医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省自然科学基金 中国博士后科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
系统性红斑狼疮患者外周血CD19+B淋巴细胞的基因表达谱芯片分析 李晓曦 徐祎欣 马铃 侯亚义 孙凌云RNAi抑制TLR9表达影响小鼠骨髓来源树突状细胞对CpG的应答 被引量:3 2009年 为了探讨特异性降低Toll样受体9(TLR9)表达后,小鼠骨髓来源树突状细胞(dendritic cell,DC)对CpG刺激的应答反应,我们合成了特异性干扰TLR9表达的小干扰RNA(small-interference RNA,siRNA),用Lipofectamine2000转入DC,利用Block-iT检测评估了转染效率;RT-PCR方法检测了干扰效果;Annexin V和PI双染检测了细胞凋亡率。进一步在CpG作用后,用流式细胞术分析了DC表面标志CD40和MHC II的表达以及DC吞噬FITC-dextran(右旋糖酐)的能力。结果显示,siRNA转染效率较高,TLR9表达被显著下调。干扰TLR9后DC在CpG作用下,表面标志CD40和MHCII表达未被上调,但吞噬功能维持较强的水平,DC表现出未成熟状态。这些结果提示,我们建立的RNA干扰(RNA in-terference,RNAi)方法能够有效阻断TLR9的表达,为进一步研究CpG信号刺激对DC成熟和功能变化的影响提供了一种有效工具。 马玲 李晓曦 徐祎欣 赵叶琳 赵晓寅 孙凌云 侯亚义关键词:树突状细胞 CPG 脐带来源间充质干细胞对人B细胞系细胞的调控 被引量:3 2014年 目的:探讨脐带来源的MSC对B细胞生长、活化、功能、信号通路的影响,为阐明MSC对B细胞的调控以及作用机制提供理论基础。方法:以人非Hodgkin淋巴瘤B细胞系Daudi、Namalwa和Raji为研究模型,在CpG刺激和不刺激下,与脐带MSC分别共培养3天后,收集悬浮的B细胞,进行细胞计数,PI染色检测细胞周期,Annexin V染色检测凋亡;流式细胞仪检测表面免疫球蛋白、MHC分子和共刺激分子的表达,Transwell实验证明细胞接触的依赖性。实时定量PCR检测与MSC共培养6、12、24、48 h后细胞因子的mRNA水平。Western blot检测MAPK、JAK-STAT、PI3K信号通路蛋白的激活情况,抑制剂证明信号通路对细胞功能的影响。结果:MSC可阻滞Namalwa和Raji于G0/G1期,对3种B细胞系增殖和凋亡没有显著影响;显著抑制Daudi、Namalwa表面IgM的表达和3种B细胞表面CD86的表达,且抑制效应不依赖细胞接触和COX2的作用;显著上调Daudi内CCL2、COX2、IL-8的mRNA水平。但不影响TNF-α;显著激活3种细胞株上的ERK信号,ERK抑制剂可减弱MSC对Daudi表面分子和CCL2的调控。结论:MSC可阻滞B细胞系周期,通过分泌可溶性因子抑制B细胞系表面分子的活化、促进细胞因子的产生,ERK信号通路参与了MSC对B细胞系上述功能的调控,提示MSC抑制B细胞的免疫效应从而在治疗免疫疾病上发挥重要作用。 徐祎欣 樊竑冶 董冠军 刘飞 任德善 侯亚义关键词:间充质干细胞 B细胞 CPG ERK 17β-estradiol协同CpG活化小鼠DC并上调其MCM6的表达 目的:雌激素对免疫系统有多种调控作用,自身免疫性系统性红斑狼疮(SLE)多发于青年女性,其特征性症状为体内抗DNA抗体的明显增多。机体主要是通过TLR9识别DNA,而在SLE等自身免疫性疾病发表中起重要作用的B细胞上表达... 徐祎欣 李晓曦 马玲 侯亚义雌激素参与B细胞的活化及其Toll样受体9通路的激活 徐祎欣 李晓曦 谢浩 马铃 侯亚义 孙凌云RNAi抑制Toll样受体9表达影响小鼠骨髓来源树突状细胞对CpG的应答 马玲 李晓曦 徐祎欣 赵叶琳 赵晓寅 侯亚义 孙凌云E2/MSC调控B细胞的功能及IL-12基因抑制鳞癌的作用 本研究分为两部分工作,前三章内容以典型的自身免疫性疾病——系统性红斑狼疮为研究背景,研究了雌二醇和间充质干细胞对B淋巴细胞的调节;最后两章为IL-12基因免疫治疗肿瘤的研究。 一、雌二醇可通过TLR9信号增强B细胞的状... 徐祎欣关键词:B淋巴细胞 白细胞介素12 基因免疫治疗 17-β雌二醇增强TLR9信号引起的B细胞活化 目的:雌激素对免疫系统有多种调控作用,自身免疫性系统性红斑狼疮(SLE)多发于青年女性,其特征性症状为体内抗DNA抗体的明显增多。机体主要是通过TLR9识别DNA,而在SLE等自身免疫性疾病发表中起重要作用的B细胞上表达... 徐祎欣 李晓曦 马玲 侯亚义应用基因芯片检测系统性红斑狼疮患者外周血B淋巴细胞 被引量:1 2009年 目的应用寡聚核苷酸基因表达芯片研究系统性红斑狼疮(SLE)患者与健康志愿者外周血B淋巴细胞基因表达谱的变化。方法应用包含21522条70mer长度Oligo DNA的寡聚核苷酸芯片(22K Human Genome Arrav)分别检测6例SLE患者和6名健康志愿者外周血B淋巴细胞基因表达谱,应用聚类分析法分析差异表达的基因。结果SLE患者外周血B淋巴细胞和健康志愿者B淋巴细胞之间基因表达谱有显著差异,芯片中聚类表达显著上调的基因15个,主要包括Ⅰ型干扰素(IFN)通路中的相关分子;聚类表达显著下调的基因22个,主要包括神经内分泌相关的精氨酸甲基化转移酶家族等与雌激素代谢相关的基因。进一步对这些差异表达基因进行了初步的功能分类分析,分析结果表明这些基因主要与B淋巴细胞的JAK—STAT信号通路和激素代谢相关。结论SLE患者外周血B淋巴细胞基因表达谱存在显著差异,芯片显示氨基酸代谢、激素代谢、细胞增殖和凋亡、炎症反应等相关生物学功能的改变可能参与SLE的发病。 李晓曦 孙凌云 徐祎欣 马铃 侯亚义关键词:B淋巴细胞 基因表达谱